Crops lack genetic resistance to most necrotrophic soil-borne pathogens and parasitic nematodes that are ubiquitous in agroecosystems worldwide. To overcome this disadvantage, plants recruit and nurture specific group of antagonistic microorganisms from the soil microbiome to defend their roots against pathogens and other pests. The best example of this microbe-based defense of roots is observed in disease-suppressive soils in which the suppressiveness is induced by continuously growing crops that are susceptible to a pathogen. Suppressive soils occur globally yet the microbial basis of most is still poorly described. Fusarium wilt, caused by Fusarium oxysporum f. sp. fragariae is a major disease of strawberry and is naturally suppressed in Korean fields that have undergone continuous strawberry monoculture. Here we show that members of the genus Streptomyces are the specific bacterial components of the microbiome responsible for the suppressiveness that controls Fusarium wilt of strawberry. Furthermore, genome sequencing revealed that Streptomyces griseus, which produces a novel thiopetide antibiotic, is the principal species involved in the suppressiveness. Finally, chemical-genetic studies demonstrated that S. griseus antagonizes F. oxysporum by interfering with fungal cell wall synthesis. An attack by F. oxysporum initiates a defensive "cry for help" by strawberry root and the mustering of microbial defenses led by Streptomyces. These results provide a model for future studies to elucidate the basis of microbially-based defense systems and soil suppressiveness from the field to the molecular level.
The amino acid composition of rice is a major concern of rice breeders because amino acids are among the most important nutrient components in rice. In this study, a genetic map was constructed with a population of 134 recombinant inbred lines (RILs) from a cross between Dasanbyeo (Tongil-type indica) and TR22183 (temperate japonica), as a means to detect the main and epistatic effect quantitative trait loci (QTLs) for the amino acid content (AAC). Using a linkage map which covered a total of 1458 cM based on 239 molecular marker loci, a total of six main-effect QTLs (M-QTLs) was identified for the content of six amino acids that were mapped onto chromosome 3. For all the M-QTLs, the TR22183 allele increased the trait values. The QTL cluster (flanked by id3015453 and id3016090) on chromosome 3 was associated with the content of five amino acids. The phenotypic variation, explained by the individual QTLs located in this cluster, ranged from 10.2 to 12.4%. In addition, 26 epistatic QTLs (Ep-QTLs) were detected and the 25 loci involved in this interaction were distributed on all nine chromosomes. Both the M-QTLs and Ep-QTLs detected in this study will be useful in breeding programs which target the development of rice with improved amino acid composition.
한국작물학회 2017년도 9th Asian Crop Science Association conference
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pp.103-103
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2017
Vigorous root growth at the seedling stage in dry direct-seeded conditions is considered as a critical trait because it is involved in seedling emergence, early vegetative vigour, nutrient uptake as well as drought tolerance. In this study, we performed QTL mapping using the recombinant inbred lines obtained from the cross between Tongil-type Dasan and temperate japonica TR22183 (DT-RILs) to identify QTL underlying early root development. TR22183, which was previously reported to have high nitrogen utility and cold tolerance, showed vigorous root growth at the seedling stage in semi-drought conditions. Root length, fresh weight and dry weight of TR22183 were significantly higher than in Dasan. By QTL analysis with genotyping-by-sequencing method, we identified two QTLs for root fresh weight (RFW) in chromosome 7 and root dry weight (RDW) in chromosome 8, explaining phenotypic variances of 13.5% and 10.6%, respectively. These QTLs would be used to develop rice varieties adapted to direct-seeded cultivating system.
The agronomic traits, such as days to flowering and maturity, plant height, 100-seed weight and seed filling period, are quantitatively inherited and important characters in soybean(Glycine max L. Merr.). A total of 126 $F_5$ recombinant inbred lines(RILs) developed from the cross of PI 171451$\times$Hwaeomputkong were used to identify quantitative trait loci(QTLs) for days to flowering(FD), days to maturity(MD), plant height(PH), 100-seed weight(SW), number of branches(NB) and seed filling period(FP). A total of 136 simple sequence repeat(SSR) markers segregated in a RIL population were distributed over 20 linkage groups(LGs), covering 1073.9 cM of the soybean genome with the average distance between adjacent markers of 7.9 cM. Five independent QTLs were identified for FD, three for MD, two for PH, three for SW, one for NB and one for FP. Of these, three QTLs were related to more than two traits of FD, MD, PH, NB and FP and mapped near the same positions on LGs H and O. Thus, these traits could be correlated with biologically controlled major QTLs in this soybean RIL population.
Cai Chun Mei;Van Kyujung;Kim Moon Young;Lee Suk-Ha
한국작물학회지
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제50권5호
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pp.361-367
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2005
Single nucleotide polymorphisms (SNPs) are valuable DNA markers due to their abundance and potential for use in automated high-throughput genotyping. Numerous SNP genotyping assays have been developed. In this report, one of effective and high throughput SNP genotyping assays, which was named the template-directed dye-terminator incorporation with fluorescence polarization detection (FP-TDI) was described. Although the most of this assay succeed, the objective of this work was to determine the reasons for the failures, find ways to improve the assay and reduce the running cost. Ninety $F_2$-derived soybean, Glycine max (L.) Merr., RILs from a cross between 'Pureunkong' and 'Jinpumkong 2' were genotyped at four SNPs. FP measurement was done on $Victot^3$ microplate reader (perkinelmer Inc., Boston, MA, USA). Increasing the number of thermal cycles in the single-base extension step increased the separation of the FP values between the products corresponding to different genotypes. But in some assays, excess of heterozygous genotypes was observed with increase of PCR cycles. We discovered that the excess heterozygous was due to misincorporation of one of the dyeterminators during the primer extension reaction. After pyrophosphatase incubation and thermal cycle control, misincoporation can be effectively prevented. Using long amplicons instead of short amplicons for SNP genotyping and decreasing the amount of dye terminator and Acyclopol Taq polymerase to 1/2 or 1/3 decreased the cost of the assay. With these minor adjustments, the FP-TDI assay can be used more accurately and cost-effectively.
Plant breeders have focused on improving plant architecture as an effective means to increase crop yield. Here, we identify the main-effect quantitative trait loci (QTLs) for plant shape-related traits in rice (Oryza sativa) and find candidate genes by applying whole genome re-sequencing of two parental cultivars using next-generation sequencing. To identify QTLs influencing plant shape, we analyzed six traits: plant height, tiller number, panicle diameter, panicle length, flag leaf length, and flag leaf width. We performed QTL analysis with 178 $F_7$ recombinant inbred lines (RILs) from a cross of japonica rice line 'SNU-SG1' and indica rice line 'Milyang23'. Using 131 molecular markers, including 28 insertion/deletion markers, we identified 11 main- and 16 minor-effect QTLs for the six traits with a threshold LOD value > 2.8. Our sequence analysis identified fifty-four candidate genes for the main-effect QTLs. By further comparison of coding sequences and meta-expression profiles between japonica and indica rice varieties, we finally chose 15 strong candidate genes for the 11 main-effect QTLs. Our study shows that the whole-genome sequence data substantially enhanced the efficiency of polymorphic marker development for QTL fine-mapping and the identification of possible candidate genes. This yields useful genetic resources for breeding high-yielding rice cultivars with improved plant architecture.
Kim Ki-Seung;Van Kyujung;Kim Moon Young;Lee Suk-Ha
한국작물학회지
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제49권5호
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pp.429-433
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2004
A single recessive gene, rxp, controls the bacterial leaf pustule (BLP) resistance in soybean and in our previous article, it has been mapped on linkage group (LG) D2 of molecular genetic map of soybean. A total of 130 recombinant inbred lines (RILs) from a cross between BLP-resistant SS2-2 and BLP-susceptible Jangyeobkong were used to identify molecular markers linked to rxp. Fifteen simple sequence repeat (SSR) markers on LG D2 were screened to construct a genetic map of rxp locus. Only four SSR markers, Satt135, Satt372, Satt448, and Satt486, showed parental polymorphisms. Using these markers, genetic scaffold map was constructed covering 26.2cM. Based on the single analysis of variance, Satt372 among these four SSR markers was the most significantly associated with the resistance to BLP. To develop new amplified fragment length polymorphism (AFLP) marker linked to the resistance gene, bulked segregant analysis (BSA) was employed. Resistance and susceptible bulks were made by pooling equal amount of genomic DNAs from ten of each in the segregating population. A total of 192 primer combinations were used to identify specific bands to the resistance, selecting three putative AFLP markers. These AFLP markers produced the fragment present in SS2-2 and the resistant bulk, and not in Jangyeobkong and the susceptible bulk. Linkage analysis revealed that McctEact97 $(P=0.0004,\;R^2=14.67\%)$ was more significant than Satt372, previously reported as the most closely linked marker.
Two subspecies, japonica and indica, have been reported in rice, which differ in several ecotypic traits. However, reproductive barriers in hybrid progenies between subspecies have been major obstacles in breeding programs using inter-subspecific hybridization. As the first step to elucidate the reproductive barriers, we developed subspecies-specific(SS) STS markers in this study. A total of 765 STS primers were designed through comparing DNA sequences at every $2{\sim}3$cM interval between japonica and indica rices, which are available at Web DBs such as IRGSP, NCBI, TIGR, and GRAMENE, and tested for subspecies-specificity using 15 indica and 15 japonica varieties of diverse origin. Of them, 67 STS markers were identified as SS STS markers and their subspecies-specificity scores were estimated. The SS markers were dispersed throughout the genome along chromosomes. Of them, 64 SS markers were mapped on an RIL population derived from a Dasanbyeo(indica)/TR22183(japonica) cross. Genomic inclination of RILs was evaluated based on the genotyping with different types of markers. Association test between markers and segregation distortion revealed that segregation distortion might not be the cause of generating SS markers. The SS markers will be applicable to estimate the genomic inclination of varieties or lines and to study the differentiation of indica and japonica, and ultimately to breed true hybrid rice varieties in which desirable characters from both subspecies are recombined.
Kwon, Soon-Jae;Hong, Sung-Won;Son, Jae-Han;Lee, Ju Kyong;Cha, Yong-Soon;Eun, Moo-Young;Kim, Nam-Soo
Molecules and Cells
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제21권3호
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pp.360-366
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2006
Up to 35% of the rice genome consists of various kinds of transposons, and CACTA and MITE are two of the major class 2 DNA transposons in the genome. We have employed the consensus sequences of Rim2/Hipa CACTA, Stowaway MITE Pangrangja, and Tourist MITE Ditto for transposon display (TD) analysis to locate them on a genetic map, with 58 SSR markers used to anchor them. The TD analysis produced a high profile of the polymorphisms between the parental lines, Oryza sativa var. Gihobyeo/O. sativa var. Milyang, in intraspecific $F_{15}$ RIL lines, locating 368 markers of Rim2/Hipa CACTA, 78 markers of Tourist MITE Ditto, and 22 markers of Stowaway MITE Pangrangja. In the segregation analysis, non-parental segregating bands and segregation distortion bands were observed. The recombinant genetic map spans 3023.9 cM, with 5.7 cM the average distance between markers. The TD markers were distributed unequally on the chromosomes because many TD markers were located in pericentric chromosomal regions except in the cases of chromosomes 2, 3, 6 and 9. Although the number of transposon markers was not sufficient to include all rice class 2 transposons, the current map of CACTA and MITE transposons should provide new insight into the genome organization of rice since no previous DNA transposon map is available.
Quantitative trait loci (QTLs) controlling ability of somatic embryogenesis were identified in soybean. A frame map with 204-point markers was developed using an RI population consisting of 117 $F_{11}$ lines derived from a cross between cultivar 'Keburi' and a weedy soybean 'Masshokutou Kou 502'. The parents differed greatly in their abilities of somatic embryogenesis using immature cotyledons as explants. The ability of somatic embryogenesis was evaluated in five different experiments: the $F_{11}$ (evaluated in 1998) and $F_{15}$ (2002) generations cultured on basal media supplemented with $40\;mg\;l^{-1}$ 2,4-D (2,4-D1998 and 2,4-D2002), $F_{14}$ (2001) generation on medium with $40\;mg\;l^{-1}$ 2,4-D and high sucrose concentration [2,4-D2001 ($30\;g\;l^{-1}$ sucrose)], and the $F_{11}$ (1998) and $F_{12}$ (1999) generations on medium with $10\;mg\;l^{-1}$ NAA (NAA1998 and NAA1999). The RILs showed wide and continuous variations in each of the five experiments. In the composite interval mapping analysis, 2 QTLs were found in group 8 (D1b + W, LOD = 5.42, $r^2$ = 37.5) in the experiment of 2,4-D1998 and in group 6 (C2, LOD = 6.03, $r^2$ = 26.0) in the experiment of 2,4-D2001 (high concentration sucrose). In both QTLs, alleles of 'Masshokutou Kou 502' with high ability of somatic embryogenesis contributed to the QTLs. For the other three experiments, no QTL was detected in the criteria of LOD >3.0, suggesting the presence of minor genes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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