The oxidative modification of low density lipoprotein(LDL) has been implicated in the development of atherosclerosis. Oxidized LDL are found in macrophage foam cell, and it can induce an macrophage proliferation in atherosclerotic plaque. In this study, we investigated the hypothesis that gamisoyosan(GS) may reduce atherosclerosis by lowering the oxidiazability of LDL, To achive this goal, we examined the effect of GS on LDL oxidation, nitric oxide production in mouse macrophage cell line, RAW264.7, and the effect of GS on cupuric sulfate-induced cytotoxicity, LDH release, and macrophage activity. GS inhibited the generation of oxidized LDL from native LDL in RAW264.7 cell culture, and decreased the release of LDH from cupric sulfate-stimulated RAW264.7 cell. In other experiments, GS activated RAW264.7 cell, and prolonged the survival time, and increased nitric oxide production in Raw 264.7 cells.
아스코크로린(Ascochlorin, ASC)은 Ascochyta viciae로부터 추출된 프레닐페놀 물질로, 혈청 콜레스테롤과 트리글리세라이드 수치를 감소시키고 종양 성장을 억제한다는 연구 결과가 보고되어 있다. 본 논문에서는 아스코크로린이 생리학적 혹은 병리학적인 작용과 염증반응에서 약리학적으로 유도되는 반응을 어떻게 조절하며, 이러한 메커니즘에 대해 이해하기 위해 mouse macrophage Raw264.7 세포에 아스코크로린을 처리하여 이에 대한 프로테옴의 특이적인 발현에 대해 분석하였다. 따라서 본 연구는 LPS를 처리한 mouse macrophage Raw264.7 세포에 아스코크로린을 처리하여 염증과정에 관련된 단백질의 발현 양상을 확인하기 위해 프로테오믹스를 시행하였다. Mouse macrophage RAW264.7 세포에 아스코크로린을 처리한 조건과 무처리한 조건으로 나누어 two-dimensional electrophoresis (2-D SDS-PAGE), matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry (MALDI-TOF-MS)와 bioinformatics 방법으로 아스코크로린을 처리한 mouse macrophage Raw264.6 세포의 프로테옴을 분석하였다. 그 결과 mouse macrophage Raw264.7 세포에 아스코크로린 처리 시 Calreticulin이 4배 감소, ${\beta}-actin$도 4배 감소 그리고 vimentin이 1.5배 감소함을 확인 할 수 있었다. 그러나 rabaptin 아스코크로린 처리에 의해 3배 증가함을 확인 할 수 있었다. 이러한 단백질 발현은 RT-PCR을 수행하여 결과에 대해 재확인 하였으며, 프로테오믹스와 동일한 결과를 얻을 수 있었다. 따라서 본 연구를 통해 LPS 처리에 의해 활성화된 mouse macrophage RAW264.7 세포에 ASC를 처리한 후 이차원 전기영동법을 이용하여, 단백질의 발현 변화 및 양상을 규명하고 단백질 지도를 확립 하였으며, RAW264.7 세포를 이용한 면역세포 모델에서 ASC의 항염증 작용을 중심으로 생리활성 조절기능을 확인 할 수 있었다. 향후 분자 기능 조절 연구와 전 임상 연구를 통해 ASC의 생리활성 조절 기능을 규명한다면 ASC는 항염증 및 항암활성을 갖는 약물로 개발될 것으로 기대된다.
The purpose of this study was to investigate the expression mechanism of MCP-1 in gamma-irradiated RAW 264.7 macrophage cells. MCP-1 plays an important role in attracting monocyte to injured site at the early inflammation stage. However the production mechanism of MCP-1 by gamma-irradiation in RAW 264.7 macrophage cells was almost undiscovered. We found that MCP-1 was produced in RAW 264.7 macrophage cells by irradiation with 5 Gy. And these inceases were attenuated by specific inhibitors treatment, such as $NF-{\kappa}B$, JNK, ERK, JAK2, and Pyk2. These results indicate that radiation-induced MCP-1 production is mediated by MyD88- and TRIF-dependent pathways in RAW 264.7 macrophage cells. Furthermore, gamma-irradiation induced heme oxygenase-1 (HO-1) expression in RAW 264.7 macrophage cells. However this induction level was reduced before MCP-1 and $IFN-{\beta}$ production.
The oxidative notification of low density lipoprotein(LDL) has been implicated in the development of atherosclerosis. Oxidized LDL are found in macrophage foam cell, and it can induce an macrophage proliferation in atherosclerotic plaque. In this study, we investigated the hypothesis that Samkieum may reduce atherosclerosis by lowering the oxidiazability of LDL, To achieve this goal, we examined the effect of Samkieum on LDL oxidation nitric oxide production in mouse macrophage cell line, RAW264.7, and the effect of Samkieum on cupuric sulfate-induced cytotoxicity, LDH release, and macrophage activity. Samkieum inhibited the generation of oxidized LDL from native LDL in RAW264.7 cell culture, and decreased the release of LDH from cupric sulfate-stimulated RAW264.7 cell. In other experiments, Samkieum activated RAW264.7 cell, and prolonged the survival time, and increased nitric oxide production in Raw 264.7 cells.
Objectives : The purpose of this study is to investigate the biological Effect of multi-herbal drug 'KOCO-P1' on mouse macrophage Raw 264.7 cells. Methods : Multi-herbal drug 'KOCO-P1' was composed of Ginseng Radix, Astragali Radix, Polygonati Rhizoma, Liriopis Tuber, and Scrophulariae Radix. Cytotoxicity and cytoprotective activity of K0C0-P1 was verificated by MTT assay. And antioxidative effect of K0C0-P1 against EtOH, Nicotine was inspected by Hydroperoxide assay. Results : K0C0-P1 showed no cytotoxicity on RAW 264.7 cells for 24, 48, 72 hours. KOCO-P1 at 200, 100, and 50 ug/mL reduced the production of H202 in Raw 264.7 cells by EtOH. KOCO-P1 at 50 ug/mL reduced the production of H202 in Raw 264.7 cells by Nicotine. Conclusions : KOCO-P1 could be supposed to have antioxidative effect on macrophage with no cytotoxicity.
The leaves of Staphylea bumalda (S. bumalda) as a deciduous tree distributed in Korea, China and Japan are used to treat respiratory diseases or inflammation. However, there is no scientific research on the immune-enhancing activity of S. bumalda leaves. Thus, in this study, we investigated the effect of water extracts from S. bumalda leaves (SBL) on the macrophage activity using mouse macrophage cells, RAW264.7. SBL increased production of immunomodulators such as NO, iNOS, IL-1β, IL-6, TNF-α and MCP-1 in RAW264.7 cells and activated phagocytic activity of RAW264.7 cells. Inhibition of TLR2 and TLR4 blocked SBL-mediated production of immunomodulators in RAW264.7 cells. In addition, SBL-mediated production of immunomodulators was attenuated by JNK inhibition in RAW264.7 cells. SBL increased JNK phosphorylation, while Inhibition of TLR2 and TLR4 blocked SBL-mediated JNK phosphorylation in RAW264.7 cells. These results are thought to be evidence that SBL activates JNK through stimulation of TLR2 and TLR4 in macrophage to induce the production of immunomodulators. In LPS-stimulated RAW264.7 cells, SBL inhibited over-production of immunomodulators. Summarizing the results, SBL showed immunostimulatory activity under normal conditions and immunosuppressive activity under LPS-induced excessive immune response conditions.
Macrophage is the important cell for the immune system. Many of herbal drugs were searched about their immune-modulating activity. The purpose of this study is to investigate the biological effect of water extract from ARTEMISIAE ARGI FOLIUM (WAAF) on mouse macrophage Raw 264.7 cells. ARTEMISIAE ARGI FOLIUM was known to have the antibacterial, immune-enhancing, and anticoagulative properties. Cytotoxicity of WAAF was verified by MTT assay. The intracellular production of hydro peroxide ($H_2O_2$) by WAAF was examined. The productions of nitric oxide (NO) and $TNF-{\alpha}$ from Raw 264.7 cell by WAAF were also examined. WAAF showed no cytotoxicity on RAW 264.7 cells for 3 hours. WAAF increased the production of $H_2O_2$ in Raw 264.7 cells. WAAF decrease the production of NO from the cells at low concentrations but increased at high concentrations. WAAF increased the production of $TNF-{\alpha}$ from the cells. Therefore, It could be suggested that WAAF has the immune-modulating effect.
Flos Lonicerae Japonicae (the flower buds of Lonicera japonica Thunberg) has been used as an antibacterial and antiviral drug in Korean Medicine. The aim of this study is to evaluate the effect of Flos Lonicerae Japonicae water extract (FL) on the production of cytokines in RAW 264.7 mouse macrophages stimulated by lipopolysaccharide (LPS). After 24 h treatment, the production of various cytokines from RAW 264.7 was measured with multiplex cytokine assay using Bio-Plex 200 suspension array system. FL at concentrations of 50, 100, and 200 ㎍/mL significantly inhibited productions of tumor necrosis factor-α, macrophage inflammatory protein (MIP)-1β, and MIP-2 in LPS-stimulated RAW 264.7 cells; FL at concentrations of 100 and 200 ㎍/mL significantly inhibited productions of leukemia inhibitory factor, LIX (CXCL5), and RANTES in LPS-stimulated RAW 264.7 cells; FL at concentrations of 200 ㎍/mL significantly inhibited productions of granulocyte-macrophage colony-stimulating factor and macrophage colony-stimulating factor in LPS-stimulated RAW 264.7 cells; FL at concentrations of 50 and 100 ㎍/mL significantly increased productions of interleukin (IL)-10 in LPS-stimulated RAW 264.7 cells; FL at concentrations of 50, 100, and 200 ㎍/mL significantly increased productions of IL-6 and interferon gamma-induced protein-10 in LPS-stimulated RAW 264.7 cells; FL at concentrations of 100 and 200 ㎍/mL significantly increased productions of monocyte chemoattractant protein-1 in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. Taken together, these data mean that FL might modulate productions of cytokines, chemokines, and growth factor in LPS-stimulated macrophages. Further study needs to verify the exact mechanism for modulatory activities of FL with macrophages.
Objectives : The leaves of Artemisia argyi L. have been used for the treatment of bleeding-related diseases in traditional korean medicine. But the immunological activities with macrophage have not been sufficiently reported. This study is to investigate the immunological bioactivities of the herbal acupuncture solution obtained from leaves of Artemisia argyi L. (AAAS). Methods & Results : Against Nicotine and Acetaldehyde, AAAS increased significantly the production of hydrogen peroxide (H2O2) within mouse macrophage Raw 264.7 cells above the concentration of 10 ${\mu}g/m{\ell}$. AAAS increased significantly the production of nitric oxide (NO) in Raw 264. 7 cells above the concentration of 100 ${\mu}g/m{\ell}$ against EtOH. And AAAS increased significantly the production of nitric oxide (NO) in Raw 264. 7 cells above the concentration of 200 ${\mu}g/m{\ell}$ against Nicotine, Acetaminophen, and Acetaldehyde. Conclusions : These results suggest that AAAS could be thought to have the immunological activities related with the production of hydrogen peroxide and NO in macrophage.
Ju-Hyeong Yu;So Jeong Park;Jae Won Lee;Jin Boo Jeong
한국자원식물학회:학술대회논문집
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한국자원식물학회 2022년도 추계학술대회
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pp.88-88
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2022
In this study, we investigated the effect of Solanum nigrum aerial parts (SNAP) on macrophage activation and macrophage autophagy in RAW264.7 cells. SNAP increased the production of immunostimulatory factors and phagocytosis in RAW264.7 cells. TLR4 inhibition blocked SNAP-mediated production of immunostimulatory factors. In addition, the JNK inhibition reduced the SNAP-mediated production of immunostimulatory factors, and the SNAP-mediated JNK activation was blocked by the TLR4 inhibition. SNAP activated macrophage autophagy. TLR4 inhibition blocked SNAP-mediated macrophage autophagy and inhibition of p38 and JNK attenuated SNAP-mediated macrophage autophagy. These findings indicate that SNAP may induce TLR4/JNK-mediated macrophage activation and TLR4/p38 and JNK-mediated macrophage autophagy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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