• 제목/요약/키워드: RAPD primer analysis

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Listeria spp.의 RAPD typing을 위한 Primer의 분리력 비교 (Primers for typing Listeria spp. using Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) ANalysis)

  • 임형근;홍종해;박경진;최원상
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제18권2호
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    • pp.67-72
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    • 2003
  • RAPD 분석은 한 개의 primer를 이용하여 임의의 DNA 조각을 증폭하는 것이다. 이때 만들어지는 여러 형태의 DNA pattern을 이용하여 리스테리아 모노사이토제네스를 분류할 수 있다. 리스테리아균들을 효과적으로 RAPD typing 할 수 있는 primer들을 엄선하기 위하여 리스테리아 표준균주 13종을 대상으로 총 31가지 primer들의 RAPD 분리력을 비교하여 보았다. 결과는 재현성이 높았으며 이중 6가지 primer(primer 6, HLWL74, UBC155, UBC127, Lis5, Lis11)가 discrimination index, band의 숫자, band scoring의 난이도 등을 고려해 볼 때 나머지 primer 들에 비해 우수한 분리력을 보였다. 이들 primer들은 장차 리스테리아의 RAPD typing에 이용될 수 있을 것으로 보이며, 현재는 이들을 이용하여 돈육공장의 오염원 규명을 위한 연구를 수행 중이다.

Salmonella spp.의 RAPD Typing을 위한 Primer의 분리력 비교 (Primers for Typing Salmonella spp. using Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) Analysis)

  • 임형근;이경희;홍종해;박경진;최원상
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제18권4호
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    • pp.224-228
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    • 2003
  • RAPD 분석은 한 개의 primer를 이용하여 임의의 DNA조각을 증폭하는 것이다. 이때 만들어지는 여러 형태의 DNA band유형을 이용하여 살모넬라를 분류할 수 있다. 살모넬라를 효과적으로 RAPD typing할 수 있는 primer들을 엄선하기 위하여 살모넬라 표준군주 16종을 대상으로 총 20가지 primer들의 RAPD 분리력을 비교하여 보았다. 결과는 재현성이 높았으며 이중 primer A, OPG04, OPG10, OPL-03을 16가지 균 모두를 다른 유형으로 분리하였고 primer OPB-17, OPB-6, OPG08, OPL-02는 15가지 유형으로 분리하였다. 이들은 discrimination index, band의 숫자, band scoring의 난이도 등을 고려해 볼 때 나머지 primer 들에 비해 우수한 분리력을 보였다. 이들 primer들은 장창 살모넬라의 RAPD typing에 이용될 수 있을 것으로 보이며, 현재는 이들을 이용하여 돈육 공장의 오염원 구명을 위한 연구를 수행 중이다.

연쇄상구균의 표현형적 특성과 RAPD profiles 비교 (Comparison of RAPD Profiles and Phenotypical Characters of Streptococcal Strains)

  • 송진경;김종훈;김은희
    • 한국어병학회지
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    • 제16권1호
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    • pp.51-59
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    • 2003
  • Streptococcal infection is one of the most serious disease of cultured olive flounder, Paralychthys olivaceus in Korea and caused by more than one species. However, there has been considerable confusions about the taxonomic position of the fish pathogenic streptococci. In this study, We performed the randomly amplified polymorphic DNA(RAPD) pattern analysis to evaluate the possible classification in 8 streptococci isolated from diseased olive flounder and reference strains based on their DNA structure. RAPD PCR with DNA solution prepared by simple boiling and 10-mer random primer was appeared to be a good tool for discrimination of different streptococcal strains. Phenotypical characters by simple biological test and API 20 Strep corresponded well to the specific profiles of RAPD in streptococcal isolates of this study. Therefore, the RAPD profile was considered as one of differential characters to discriminate the streptococcal isolates from diseased olive flounder.

PCR-RAPD 기법에 의한 무지개송어 Genome DNA 의 다형현상 (Genomic Polymorphisms of Genome DNA by Polymerase Chain Reaction-RAPD Analysis Using Arbitrary Primers in Rainbow Trout)

  • Yoon, J.M.
    • 한국가축번식학회지
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    • 제23권4호
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    • pp.303-311
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    • 1999
  • 본 연구는 정자세포로부터 분리된 genome 내 DNA를 PCR 기법으로 증폭시킨 후 random amplified polymorphic DNA(RAPD) 분석을 통해 무지개송어의 품종 내 유전적 특성과 변이성을 해석하고 품종의 특이 유전적 표지를 개발하기 위해서 수행되었다. 20 종류의 primer를 사용하여 RAPD 양상을 검색한 후 다형현상의 출현빈도와 band 수에 기초하여 이들 중 6개의 primer를 선정하여 이용하였다. 그 중에 4개의 primer는 17개의 RAPD marker를 나타내었고, 그중 primer 당 8개인 48개 (28%)의 band 가 다형성을 보여주었다. 6개의 primer 중 4개는 개체들 사이에 다형성을 나타내는 band를 나타내었다. Bandsharing 의 경우 연어와 비교될 만큼 무지개송어는 3개의 특이적인 DNA marker를 가지고 있었다 (2.3. 2.0 및 1.3kb). 같은 무작위 primer를 이용해서 나타난 개별적인 band는 단일 primer 가 무지개송어의 정자핵 DNA의 경우 적어도 3개의 독립적인 genome 내 다형성을 탐지해 낼 수 있다는 것을 제시하고 있다. 이러한 primer에 의해서 나타난 RAPD 다형성은 개체식별을 위한 유전적 표지인자로서 사용될 수 있는 가능성을 제시하였으며, RAPD-PCR은 많은 어종에서 다형현상을 밝혀내는 기술이라 할 수 있다. 본 연구는 RAPD marker가 풍부하고 재현성이 있으며 RAPD 다형성을 지닌 marker를 사용하여 이러한 중요한 양식대상어종에서 미래의 gene mapping과 MAS 를 위한 기초를 제공해 줄 수 있다. RAPD 다형성은 어류의 품종 분화를 위한 유전적 표지로서 유용한 것으로 결론지을 수 있을 것이다.

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뽕나무(Morus alba L.)의 RAPD 분석조건 최적화에 관한 연구 (Optimization of RAPD-FCR Conditions for Morus alba L.)

  • 정대수;양보경;김나영;정순재;남재성;이영병;이재헌;김경태;김도훈
    • 생명과학회지
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    • 제14권1호
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    • pp.110-114
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    • 2004
  • 본 연구는 뽕나무 품종간의 유전적 특성 분석을 위한 기초 자료로서 최적의 RAPD-PCR 조건을 확립하기 위하여 수행하였다. 본 연구를 위해 '밀성뽕', '청일뽕', '수일뽕' 그리고 한성뽕'등의 4품종을 이용하여 Operon사의 OPY15 (5'-AG-TCGCCCTT-3') primer를 사용, 여러 가지 PCR 조건하에서 실험하였다. DNA 농도, primer농도, $MgCl_2$ 농도, PCR 횟수, annealing temperature, pre-heating time의 조작유무 등 여러 가지 요인들을 대상으로 시험을 수행한 결과, $25 \mu$ 반응용액을 기준으로 50 ng의 template DNA, $1 \muM$의 random primer, 1.5 mM의$MgCl_2$45회의 PCR cycle, 45$^{\circ}C$의 annealing temperature 그리고 pre-heating time이 없는 조건이 최적으로 나타났다. 이러한 RAPD-PCR법의 안정적인 조건의 확립은 후차적인 뽕나무 품종간의 유전적 특성의 규명, 계통간의 관련, 신품종 육성 등을 위한 중요한 기초 자료로 활용될 것으로 생각된다.

Fusarium 종에서의 RAPD-PCR분석 (RAPD-PCR Analysis in Fusarium species)

  • 민병례;양연주;최영길
    • 미생물학회지
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    • 제35권2호
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    • pp.107-114
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    • 1999
  • Fusarium 균에 속하는 16종 21균주를 대상으로 RAPD-PCR 방법을 이용하여 DNA 다형성을 분석하여 계통 유전학적 유연관계를 검토하였다. 40개의 random primer 로 시험하여 실험한 모든 종에서 다형성을 나타내는 11개의 primer를 선별하였다. RAPD 분석결과 평균 23.9개씩 모두 263개의 크기가 다른 RAPD 밴드들을 조사할 수 있었다. 각 primer에 대해 각각 독특한 DNA 다형성을 나타내었고, 증폭된 DNA 크기는 0.1-3.0 kb 범위에서 형성되었다. 각 균주간의 genetic similarity를 계산하여 유연관계를 dendrogram 으로 나타내었다. Genetic similarity 0.627을 기준으로 하여 크게 4그룹으로 나눌 수 있었다.

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Randomly Amplified Polymorphic DNA (RAPD) 기술을 이용한 고려인삼의 유전분석을 위한 Primer 선발 및 변종별 비교 (Survey of Proper Primers and Genetic Analysis of Korean Ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer) Variants using the RAPD Technique)

  • 임용표;신최순;이석종;윤영남;조재성
    • Journal of Ginseng Research
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    • 제17권2호
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    • pp.153-158
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    • 1993
  • The study was carried out for comparison of variants and development of genetic markers using Randomly Amplified Polymorphic D사A (RAPD) analysis method. The ginseng variants used were as follows: Chungkyung-Chong, Hwangskoog-Chong, KG101 selected by the pureline selection method, and 6 kinds of Jakyung-Chong strains Uinjakyung, Jakyung-Chong 81783, Jakyung-Chong 847913, Jaky tong-Chong 79742, Jinjakyung of USSR, and Mimaki of Japan). Four of 10 RAPD primers showed the distinctive polymorphism among 9 ginseng variants and lines, and were selected for more detailed polymorphic analysis. The sequences of 4 selected primers were TGCCGAGCTG (Primer#2), AATCGGGCTG (#4), GAAACGGGTG (U7), and GTGACGTAGG (#8). All primers produced several common bands among the strains. However, when primer # 2 was applied, the electrophoregram showed the specific band at 1.8 kb region in Chungkyung-Chong, Hwangskoog- chong, and KG101, and 1 kb in the Jakyung-Chong 847913. In primer #4, 1.1 kb band was shown in Chungkyung-Chong, Hwangskoog-Chong, KG101, and Jakyung-Chong 79742. In primer # 7, 700 bp band was appeared in Jakyung-Chong 81783 and Jinjakyung of USSR In primer # 8, 800 bp band was observed only in Mimaki, comparing to another strains. When Similarity Index (SI) was calculated, Chungkyung-Chong and Hwngskoog-Chong, and Jakyung- chong 81783 and Jinjakyung of USSR showed the most close SI, 0.11 and 0.08, respectively. The data of KG101, which showed the SI of 0.13 with the group of Chungkyung-Chong and Hwangskoog-Chong, coincided with the fact that it was released from Hwangskoog-Chong by breeding process. The data of Jakyung strains indicated the significant variation among the strains. From these results, RAPD analysis method could be succesively applied to the classification and genetic analysis for breeding of Korean ginseng.

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홍화 수집종의 RAPD에 의한 유연관계 분석 (Intraspecific Relationship Analysis of Safflower (Carthamus tinctorius L.) Lines Collected by RAPD Markers)

  • 김재철;최성용;신동현;김세종
    • 한국자원식물학회지
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    • 제19권2호
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    • pp.336-339
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    • 2006
  • 홍화 수집종의 RAPD 분석을 통한 유전적 다양성 및 유연관계를 밝히고 품종군을 분류하여 품종육성의 기초자료로 활용코자 시험한 결과는 아래와 같다. RAPD 분석에 적용한 37개의 Primer 중 25개의 적정 primer를 선발하였고, 증폭원 PCR산물은 $0.1{\sim}4.0kb$에서 재현성있는 band를 보였으며 각 primer에 의해 증폭된 band의 수는 $1{\sim}9$개로 다양하였고 평균 4.8개였다. PCR 반응에 사용된 25개의 primer에서 120개의 band가 관찰되었으며 다형성을 보이는 band될 수는 23개(19.2%)였다. RAPD-PCR에 의해 얻어진 dendrogram에서 유연계수 0.042를 기준으로 합을 했을 때 6개 군으로 분류되었고 II군과 III군은 각각 12종(38%)씩 속하였다.

PCR-RAPD를 이용한 제주말의 유전적 다양성분석 (Genetic Diversity Analysis of the Cheju Horse Using Random Amplified Polymorphic DNAs)

  • Cho, Byung-Wook;Lee, Kil-Wang
    • 생명과학회지
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    • 제14권3호
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    • pp.521-524
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    • 2004
  • 본 연구는 short oligonucleotide primer를 이용하여 마 품종간 유전 분석을 실시 하고자 PCR증폭 기법을 확립하고, 확립된 기술을 이용하여 제주도에 사육중인 천념기념물 347호로 등록된 제주말과 경주마로 잘 알려진 더러브렛간의 유전적인 다양성을 분석한 결과 마 품종간 차이를 보이는 DNA marker는 9개의 primer에서 확인되었으며, 이중 6개의 primer에서 더러브렛 특이 밴드와 나머지 3개에서 제주 마 특이 RAPD 밴드가 확인되어 cloning과 sequencing후에 SCAR primer를 제작하여 마 품종 식별에 활용할 수 있을 것으로 사료되며, 본 연구결과 RAPD표지인자는 마 품종간의 유전 분석에 매우 유용한 것으로 판단되었다.

Molecular Differentiation of Panax Species by RAPD Analysis

  • Shim, Young-Hun;Choi, Jung-Ho;Park, Chan-Dong;Lim, Chul-Joo;Cho, Jung-Hee;Kim, Hong-Jin
    • Archives of Pharmacal Research
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    • 제26권8호
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    • pp.601-605
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    • 2003
  • Traditional taxonomic methods used for the identification and differentiation of ginsengs rely primarily on morphological observations or physiochemical methods, which cannot be used efficiently when only powdered forms or shredded material is available. Randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) was used to determine the unique DNA profiles that are characteristic not only of the genus Panax but also of various Panax subgroups collected from five different countries. RAPD results of OP-5A primer showed a specific single band that is characteristic of all ginseng samples. RAPD results of OP-13B primer demonstrated that OP-13B primer could be used as a unique RAPD marker to differentiate Panax species. These results support that this approach could be applied to distinguish Korean Ginseng (Panax ginseng) from others at the molecular level.