• 제목/요약/키워드: RAPD Markers

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Development of PCR-Based Sequence Characterized DNA Markers for the Identification and Detection, Genetic Diversity of Didymella bryoniae with Random Amplified polymorphic DNA(RAPD)

  • Kyo, Seo-Il;Shim, Chang-Ki;Kim, Dong-Kil;Baep, Dong-Won;Lee, Seon-Chul;Kim, Hee-Kyu
    • 한국식물병리학회:학술대회논문집
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    • 한국식물병리학회 2003년도 정기총회 및 추계학술발표회
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    • pp.130-130
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    • 2003
  • Gummy stem blight pathogen is very difficult not only to monitor the inoculum levels prior to host infection, and also it is destructive and hard to control in field condition. We have applied RAPD technique to elucidate the genetic diversity of the genomic DNA of Didymella bryoniae and also to generate specific diagnostic DNA probe useful for identification and detection. The 40 primers produced clear bands consistently from the genomic DNA of twenty isolates of Didymella bryoniae, and two hundred seventy-three amplified fragments were produced with 40 primers. The combined data from 273 bands was analyzed by a cluster analysis using UPGMA method with an arithmetic average program of NTSYS-PC (Version 1.80) to generate a dendrogram. At the distance level of 0.7, two major RAPD groups were differentiated among 20 strains. RAPD group (RG) I included 8 isolates from watermelon except one isolate from melon. RAPD group (RG) IV included 12 isolates from squash, cucumber, watermelon and melon.. In amplification experiment with SCAR specific primer RG1F-RG1R resulted in a single band of 650bp fragment only for 8 isolates out of 20 isolates that should be designated as RAPD Group 1. However, same set of experiment done with RGIIF-RGIIR did not result in any amplified product.. Our attempts to detect intraspecific diversity of ITS region of rDNA by amplifying ITS region and 17s rDNA region for 20 isolates and restriction digestion of amplified fragment with 12 enzymes did not reveal polymorphic band. In order to develop RAPD markers for RGIV specific primer, a candidate PCR fragment( ≒1.4kb) was purified and Southern hybridized to the amplified fragment RGIV isolates. This promising candidate probe recognized only RGIV isolates

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한국과 몽고 일부 재배마늘의 유전적 변이와 재배종 특이적 RAPD 마커의 탐색 (Genetic Variation and Identification of RAPD Markers from Some Garlic Cultivars in Korea and Mongolia)

  • 배성국;정은아;권순태
    • 한국자원식물학회지
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    • 제23권5호
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    • pp.458-464
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    • 2010
  • 국내외에서 재배되는 12종의 마늘을 수집하여 총 143개의 임의의 primer를 이용하여 RAPD분석을 실시한 결과 55개의 primer로부터 종간에 다형성을 보이는 DNA밴드가 나타났다. RAPD에 의해 다형성을 보인 55개의 primer에서 확인된 총 DNA 밴드 수는 187개였으며, 그 중 128개(68.5%)가 12종의 마늘 지방종간에 다형성을 나타내었다. PCR에서 다형성을 보인 DNA 밴드를 대상으로 집단분석을 실시한 결과 유전적 유사도가 0.71이상에서 3개의 그룹으로 나누어 졌는데, 제1그룹은 의성, 서산, 삼척, 예천-A, 예천-B종, 의성노랑, 정선, 남도, 단양 및 육백종 등으로 대서종을 제외한 한국의 재배종이 모두 포함되었으며, 제2그룹과 제3그룹은 각각 몽골종과 대서종 단독으로 나누어졌다. 종 특이적으로 DNA밴드를 나타내는 primer를 분석한 결과 21개 primer에서 30개의 DNA밴드가 어느 특정의 지방종에만 나타나는 것으로 확인되어, 지방종 마늘 10종을 구분할 수 있는 30개의 RAPD 마커가 확인되었다.

RAPD에 의한 지리산 내 산거울 집단의 공간적 상관관계 분석 (Spatial Autocorrelation Analysis of Carex humilis on Mt. Giri by RAPD)

  • 이복규;이병룡;허만규
    • 생명과학회지
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    • 제20권9호
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    • pp.1287-1293
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    • 2010
  • RAPD에 의한 지리산 내 산거울 집단의 유전자 빈도와 지리적 거리에 따른 공간적 상관관계를 분석하였다. 전체 102 DNA 분절(밴드)이 107 개체에서 탐지되었다. 102 밴드 중 48(47.1%)개 밴드는 다형성을 나타내었다. 분집단간 다형성의 비교에서 거리 구간 I와 V가 가장 낮은 변이(16.7%)를 나타내었고, 거리 구간 VIII이 가장 높은 변이를 나타내었다(22.6%). 전체 다양도는 0.076이었다. 구간 VIII이 가장 높은 다양도(0.093)를 나타내었고, 구간 I가 가장 낮았다(0.063). 구간 사이의 유전적 유사도는 60 m 거리까지는 유사하였다. 지리산 집단에서 산거울은 강한 공간구조를 나타내고 있음이 RAPD 마커로 알 수 있었다. 이는 지리산 집단에서 낮은 이주자수와 개체들이 덩어리 모양의 분포를 나타내기 때문으로 판단된다. 본 연구에서 RAPD 마커로 산거울의 공간구조와 유전적 구조를 파악하는데 유용하게 이용될 수 있음을 입증하였다.

누에 RAPD-PCR 분석을 위한 기초연구 (Fundamental Study for RAPD-PR Analysis in the Silkworm, Bombyx mori)

  • 황재삼;이진성
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제38권1호
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    • pp.7-12
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    • 1996
  • 누에 RAPD-PCR 최적조건에 대해 실험한 결과, 중합효소 연쇄반응(PCR)의 최적조건은 반응액 25$\mu$l에 대해 주형 DNA 30ng, dNTP mixture 200$\mu$M, primer 300mM, Taq DNA Polymerase 1.0unit 및 Mg2+ 1.5mM로 판단되었으며, 또 상기의 실험조건을 기본으로 하여 annealing 온도를 탐색한 결과 35$^{\circ}C$-42$^{\circ}C$에서 DNA의 증폭이 안정적임이 밝혀졌다. 또한 동일한 품종내에서 개체간 및 암수간의 DNA 다형성은 인정되지 않았고, 품종간 DNA 다형성은 OPM 04 primer를 사용한 결과 5개의 RAPD 마커로 인정 되었다. 양친간 다형성이 인정된 primer를 사용하여 F2 33개체에 대해 DNA를 증폭시킨 결과 800 bp band가 3 :1 로 분리되었으므로 누에 품종간 유전적 유연관계 및 유전자 지도작성의 가능성을 제시했다.

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국내 식품으로부터 분리한 Listeria Species의 RAPD 분석 (Randomly Amplified Polymorphic DNA Analysis of Listeria Species Isolated from Foods in Korea)

  • 최영춘;박부길;이택수;오덕환
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제29권4호
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    • pp.606-614
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    • 2000
  • Randomly Amplified Polymorphic DNA (RAPD) 기술을 이용하여 국내 식품으 로부터 분리한 Listeria sp. 분리균주에 대한 DNA polymorphism을 분석하고 유연환계를 비 교하며, 유용 marker를 개발할 목적으로 10가지 10-mer primer를 이용하여 PCR을 수행한 결과 5개의 primer(OPA-01, OP-26-01, OP-26-02, OPB-01, OP-26-10)가 선별되었고, 76개 의 DNA 단편이 증폭되었다. 이 중 OPA-01과 OP-26-10 promer에 의한 약 1.5 kb와 0.7 kb의 증폭 band는 모든 Listeria 분리균에서 관찰할수 있었으나, 이 증폭된 DNA 단편은 Listeria sp.에만 특이적인 것은 아니었다. NTSYS 프로그램을 이용해서 Listeria sp. 분리구 간의 유전적 유연관계를 알아본 결과 7개의 cluster로 나누어졌고 유사도는 대체로 0.54~ 0.93사이였으며, 특히, No.3과 No.20은 93%로 가장 높은 유사도를 나타내었고, No.7과 No.24 또는 No.7과 No.45는 54%로 가장 낮은 유사도를 나타내었다. 이러한 결과는 RAPS 기술을 이용하여 쉽게 Listeria sp.를 subspecies로 분류할 수 있음을 시사하였다.

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RAPD PCR에 의한 4대강 쉬리 Coreoleuciscus splendidus 개체군들의 유전변이 분석 (Genetic Variation of Coreoleuciscus splendidus Populations from Four Major Rivers in Korea as Assessed by RAPD PCR)

  • 송하윤;방인철
    • 한국어류학회지
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    • 제21권2호
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    • pp.129-133
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    • 2009
  • 본 연구는 RAPD PCR 분석을 통하여 한국의 서한아 수계(한강, 금강)와 남한아 수계(섬진강, 낙동강)에 서식하는 쉬리 집단들 간의 유전변이를 비교하였다. 4집단들 간의 유전적 변이를 분석한 결과, 사용한 12개의 random primer들 모두에서 서한아 수계 집단과 남한아 수계의 집단들을 구분하여 주는 특이적 PCR 단편들을 확인할 수 있었다. 유전적 유사도 분석에서 한강, 금강의 서한아 수계 집단들과 섬진강, 낙동강의 남한아 수계 집단들의 유전적 유사도는 0.49~0.53로 낮게 나타났고 유전적 거리는 0.63~0.71로 높게 나타났다. 유전적 거리에 기초한 UPGMA dendrogram 분석에서도 서한아 수계와 남한아 수계의 집단들이 명확하게 구분되었다. 따라서 서한아와 남한아 수계의 쉬리 집단은 유전적 구조에 있어 큰 차이가 있으며, 남한아 수계의 쉬리는 서한아 수계 쉬리와 진화적으로 뚜렷하게 구분되는 집단으로 판단된다.

Universal Rice Primer (URP)-RAPD 방법에 의한 어류 종 특이 marker의 동정 (Identification of Potential Species-Specific Marker in Several Fish Species by RAPD Using Universal Rice Primers)

  • 김우진;김경길;이정호;박두원
    • 한국수산과학회지
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    • 제36권3호
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    • pp.317-320
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    • 2003
  • Morphologically similar fish species were subjected to the random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis using universal rice primer (URP). The fish species tested were sea basses (Lateolabrax japonicus and L. maculatus), eels (Anguilla japonica, A. bicolor bicolor, A. rostrata, and A. anguilla), and flounders (Limanda yokohamae and L. herzensteinin). Highly reproducible RAPD patterns were observed with several potential species-specific markers. The results indicate that RAPD technique using URP is useful for distinguishing fish psecies in a rapid manner.

Discrimination of the Genus Leontopodium Species (Gentianales: Asteraceae) Based on RAPD

  • Jeon, Mi Gyeong;Choi, Kang Jun;Kim, Ji Young
    • Journal of Forest and Environmental Science
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    • 제31권1호
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    • pp.68-71
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    • 2015
  • Korean L. leiolepis of the genus Leontopodium could be discriminate from the foreign L. alpinum using random amplified polymorphic DNA (RAPD). Among the 12 URP markers used for the detection, the URP-5 marker and the URP-7 marker detected polymorphic DNA bands, ranging from 400-1000 bp in the size of amplified DNA fragments.

RAPD 분석을 이용한 전복류의 유전적 차이 및 유연관계 (Genetic Divergence and Relationship among Abalone Species by RAPD Analysis)

  • 박철지;김현철;노재구;이정호;명정인
    • 한국양식학회지
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    • 제21권4호
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    • pp.346-350
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    • 2008
  • Haliotis속 전복류 내에서 종간의 유전적 차이 및 유연관계를 나타내는 유전표식으로 RAPD를 사용하여 그 유용성 정도를 파악하기 위하여 북반구 2종(H. discus hannai와 H. rufescens)과 남반구 2종(H. rubra와 H. midae)을 대상으로 RAPD 분석을 행하였다. 그 결과 RAPD는 Haliotis 종간의 구분은 명확히 구분할 수 있는 유용한 유전표식으로 평가되었으나, 유전적 유연관계에 있어서는 형태학적 및 지리학적 분포에 따른 유연관계와는 상이하게 나타났다.

Genetic Variation in the Selected Populations of Hovenia dulcis var. koreana Nakai. Based on RAPD Analysis

  • Kim Sea-Hyun;Han Jin-Gyu;Chung Hun-Gwan;Cho Yoon-Jin;Park Hyung-Soon
    • Plant Resources
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    • 제8권3호
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    • pp.293-299
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    • 2005
  • This study used RAPD markers to assume genetic diversity and variation in selected populations of Hovenia dulcis var. koreana. Ratio of polymorphic RAPD markers were 93.4% in selected populations of Hovenia dulcis Thunb., difference of genetic structure among populations and within populations showed 16.45%, 83.55%, respectively in amount of total genetic variation of 4 populations. Total gene diversity($H_T$) that show genetic diversity appeared 0.313 and coefficient of gene differentiation($G_{ST}$) that compare genetic differentiation of populations appeared 0.1645, analysis of AMOVA for variation among populations and within populations was significantly different (P<0.001). Genetic diversity of whole populations showed that 12.44% difference among population and 87.56% difference within populations. As a result, difference within populations was larger than difference among populations in genetic diversity. Nei's genetic distance and cluster analysis appeared that mean genetic distance among populations was 0.076, thus dividing two main groups and geographic relationship did not show in populations.

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