본 연구는 정자세포로부터 분리된 genome 내 DNA를 PCR 기법으로 증폭시킨 후 random amplified polymorphic DNA(RAPD) 분석을 통해 무지개송어의 품종 내 유전적 특성과 변이성을 해석하고 품종의 특이 유전적 표지를 개발하기 위해서 수행되었다. 20 종류의 primer를 사용하여 RAPD 양상을 검색한 후 다형현상의 출현빈도와 band 수에 기초하여 이들 중 6개의 primer를 선정하여 이용하였다. 그 중에 4개의 primer는 17개의 RAPD marker를 나타내었고, 그중 primer 당 8개인 48개 (28%)의 band 가 다형성을 보여주었다. 6개의 primer 중 4개는 개체들 사이에 다형성을 나타내는 band를 나타내었다. Bandsharing 의 경우 연어와 비교될 만큼 무지개송어는 3개의 특이적인 DNA marker를 가지고 있었다 (2.3. 2.0 및 1.3kb). 같은 무작위 primer를 이용해서 나타난 개별적인 band는 단일 primer 가 무지개송어의 정자핵 DNA의 경우 적어도 3개의 독립적인 genome 내 다형성을 탐지해 낼 수 있다는 것을 제시하고 있다. 이러한 primer에 의해서 나타난 RAPD 다형성은 개체식별을 위한 유전적 표지인자로서 사용될 수 있는 가능성을 제시하였으며, RAPD-PCR은 많은 어종에서 다형현상을 밝혀내는 기술이라 할 수 있다. 본 연구는 RAPD marker가 풍부하고 재현성이 있으며 RAPD 다형성을 지닌 marker를 사용하여 이러한 중요한 양식대상어종에서 미래의 gene mapping과 MAS 를 위한 기초를 제공해 줄 수 있다. RAPD 다형성은 어류의 품종 분화를 위한 유전적 표지로서 유용한 것으로 결론지을 수 있을 것이다.
무지개송어의 대동맥에 삽입관을 부착한 후 스트레스와 관련된 생리화학적 반응을 조사하였고, 실험사료의 위내 강제공급 후 혈장내 유리 아미노산의 농도변화를 비교하였다. 무지개 송어에 있어 아미노산의 요구량 설정 모델 개발을 위한 기초연구로서 사료 영양학적 연구를 위한 새로운 사료공급 및 혈액채취 방법의 개발을 위하여, 강제투여 및 대동맥 삽입방법의 적용 가능성을 조사하였다. 스트레스와 관련된 생리화학적 반응조사에 있어서 혈액내 헤마토크리트(Ht)는 6시간에 최대치를 보였고, 12시간에 최초수준으로 돌아와 48시간까지 유지되었고 혈장내 코티졸과 글루코스는 3시간에 증가하기 시작하여 6시간에 최대치를 보였으며(P<0.05), 48시간에 최초수준으로 돌아왔다. 혈장내 총 단백질 함량, 삼투압, Na농도, K농도, Cl농도, 헤모글로빈(Hb)수와 적혈구수(red blood cell, RBC)는 48시간동안 큰 변화를 보이지 않았다. 실험사료의 위내 강제 공급 후 혈장내 유리 아미노산의 농도 변화는, arginine, histidine, Iysine, methionine, threonine. valine, glutamic acid. isoleucine, leucine, phenylalanine과 tryptophan이 사료공급 후 4시간에 최대치를 보였고, 8~24시간사이에 최초수준 또는 감소하고, 48시간까지 일정하게 유지되었다. glycine은 사료공급 후 4~8사이에 감소하여 12시간에 최대치를 보였고 24시간에 최초수준으로 돌아왔다. alanine과 aspartic acid의 농도는 사료공급 후 4시간에 최대치를 보였고, 48시간에 기본농도로 돌아왔다. 상기 결과를 토대로, 위내 강제 공급 방법과 대동맥 삽입방법을 무지개 송어의 사료 영양학적 연구에 적용 가능하였고, 유리아미노산의 농도 측정으로 필수 아미노산 요구량 추정이 가능함을 보여주었다.
Carbonic anhydrase (CA)는 생물체 내에 널리 존재하는 아연(Zinc)을 함유한 금속성효소(metalloenzyme)이다. 이는 생리학적 조건에서 주로 $CO_2$의 hydration과 bicarbonate의 dehydration의 반응을 촉매하는 기능을 한다. 이러한 CA는 거의 모든 생물체 내에서 발견되고 16개 이상의 동질효소들이 포유류에서 분리되었다. 반면 포유류와 달리 포유류가 아닌 생물체, 특히 어류와 해양생물에 대한 CA와 그에 대한 동질효소에 관한 자료는 매우 제한적이다. 어류 내에서 CA는 삼투압과 산-염기 평형을 조절하는 매우 중요한 효소로 알려져 있으며, 또한 어류 내 조직 중의 하나인 아가미는 산-염기 조절, 이온 교환, 생체 내 pH 조절 등을 수행하는 부위로 알려져 있다. 실험생물인 무지개송어는 국내 해양 양식 산업 분야에 있어서 매년마다 그 생산량이 증가하는 매우 중요한 해양자원이다. 게다가 환경 독성 연구 분야에 있어서 그 실험적인 가치가 인정되어 국내 외에서 실험동물로 널리 이용되고 있는 어류이다. 아가미 조직에서 분리한 단백질에서 분자량 30 kDa, 등전점 7.0의 위치에 해당하는 특이적인 band 가 형성된 모습을 관찰할 수 있었고 이는 확인 결과 CA인 것으로 판명되었다. 또한 CA의 존재여부가 확인된 아가미 조직 내에서 세부적인 발현 위치를 파악하기 위해 진행한 면역조직화학 실험 결과 CA가 아가미의 상피세포내에 존재하는 것을 파악 할 수 있었다.
난모세포성숙기 (peripheral germinal vesicle stage)의 무지개송어(Oncorhynchus mykiss)를 대상으로 방사성 표지 전구체(3H-pregnenolone, 3H-l7$\alpha$-hydroxyprogesterone 그리고 3H-androstenedione)를 이용하여 유 nitro에서 관찰한 협막세포층의 스테로이드 주 대사 경로는 다음과 같으며, pregnenolone -) 17a-hydroxypregnenolone$\longrightarrow$ 17u-hydroxyprogesterone $\longrightarrow$ androstenedione $\longrightarrow$ testosterone 이는 $\Delta$5-스테로이드 경로의 존재가능성을 지적하고 있다.
Sungchul C. Bai;Park, Gunjun;Im ho Ok;Kim, Youngchul
한국양식학회:학술대회논문집
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한국양식학회 2003년도 추계학술발표대회 논문요약집
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pp.67-67
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2003
Dorsal aorta cannulated rainbow trout averaging 505 $\pm$ 6.5g (Mean $\pm$ SD) were divided into 7 groups (5 fish per group). Twenty four hour post feeding, cannulated fish were intubated with one of seven L-amino acid diets containing graded levels of Valine (Val. : 0.45, 0.95, 1.20, 1.45, 1.70, 1.95 or 2.45%) at 1% of body weight. Blood samples were taken at 0, 5 and 24hr after feeding the experimental diets. Post-prandial (5h after feeding) plasma-free Valine concentrations (PPval.) increased linearly from fish fed diets containing Valine between 0.45 and 1.45%, but the concentration remained constant from fish fed diets containing valine between 1.45 and 2.45%. Post-absorptive (24h after feeding) plasma free valine concentrations (PAval) increased linearly from fish fed diets containing valine between 0.45 and 1.45%, but the concentration remained constant from fish fed diets containing valine between 1.45 and 1.95%. Using the broken-line model analysis, the dietary valine requirement by PPval and PAval could be 1.44 and 1.50% in rainbow trout, respectively. These results supported that the estimated dietary valine requirement by PP(val.) and PA(val.) could be in close agreement with the values obtained from the previous conventional feeding method. Thus, the use of PFAA concentrations for determining essential amino acid requirements could be possible in rainbow trout with dorsal aorta cannulation.
Coloring agents in food materials plays important roles in the development of attractive products as well as in the functionality of food such as antioxidant or vitamin supplementation. Carrot has been used as an orange coloring agent in the decoration of food but also a major source of vitamin A complex. Though orange has been considered a typical color of carrot, the Rainbow carrot has been developed recently, which exhibit the various colors such as red, pale yellow, purple, orange or their mixtures. After categorization onto 8 groups by their colors, vitamin A complex (${\beta}$-carotene, lycopene and lutein) and soluble sugars (glucose, fructose, and sucrose) have been analyzed in carrots. The ${\beta}$-carotene was abundant in the groups of orange (Group-O) or groups with the orange color (group-OP, and group-YOP). The content of lycopene content was exclusively high in the red color carrot (group-R). The highest lutein contents were observed from the yellow-purple (group-YP) group. Meanwhile, little amounts of lycopene and ${\beta}$-carotene were observed in yellow-purple (group-YP) nor yellow (group-Y) on yellow (group-Y). Among the reducing sugars in 'rainbow carrots', the amount of sucrose was two times higher than those of fructose and glucose. However, the content of glucose, fructose and sucrose as well as the total reducing sugars did not differ between color groups suggesting little variations on their tastes.
경제성이 높은 어종인 무지개송어와 은연어를 대상으로 두 종간의 장점을 갖춘 신품종을 개발하기 위하여 종간 잡종 및 잡종 3배체를 유도하였다. 그 결과, 잡종의 부화율은 $51.7\%$로 여타 대조군에 비해 낮았으나 잡종 3배체의 부화율은 $77.6\%$로 무지개송어 3배체와 유사한 부화율을 보였다. 또한 부화 2개월후의 생존율은 잡종인 경우 $1.7\%$로 매우 낮았으나 잡종 3배체는 $54.5\%$로 무지개송어 3배체의 $56.6\%$ 생존율과 유사하였다. 잡종의 세포 및 핵의 평균 크기는 양친으로 사용된 두 종의 중간을 보였으며 잡종 3배체의 세포 및 핵의 크기는 잡종에 비해 크게 나타났다. 잡종의 염색체수는 60개로 나타나 n=30의 염색체수를 가진 무지개송어 난자와 n= 30의 염색체수를 가진 은연어 정자와 교배된 개체만이 생존력을 갖는 것으로 나타났다. 잡종 3배체의 경우 그의 염색 체수는 $90\~93$개로 Robertsonian형의 전좌에 의한 염색체 다형현상을 보여주었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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