Ji Hyeon Ahn;Dae Won Kim;Joon Ha Park;Tae-Kyeong Lee;Hyang-Ah Lee;Moo-Ho Won;Choong-Hyun Lee
International Journal of Molecular Medicine
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제44권3호
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pp.939-948
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2019
Chemokine C-X3-C motif ligand 1 (CX3CL1) and its sole receptor, CX3CR1, are known to be involved in neuronal damage/death following brain ischemia. In the present study, time-dependent expression changes of CX3CL1 and CX3CR1 proteins were investigated in the hippocampal CA1 field following 5 min of transient global cerebral ischemia (tgCI) in gerbils. To induce tgCI in gerbils, bilateral common carotid arteries were occluded for 5 min using aneurysm clips. Expression changes of CX3CL1 and CX3CR1 proteins were assessed at 1, 2 and 5 days after tgCI using western blotting and immunohistochemistry. CX3CL1 immunoreactivity was strong in the CA1 pyramidal cells of animals in the sham operation group. Weak CX3CL1 immunoreactivity was detected at 6 h after tgCI, recovered at 1 day after tgCI and disappeared from 5 days after tgCI. CX3CR1 immunoreactivity was very weak in CA1 pyramidal cells of the sham animals. CX3CR1 immunoreactivity in CA1 pyramidal cells was significantly increased at 1 days after tgCI and gradually decreased thereafter. On the other hand, CX3CR1 immunoreactivity was significantly increased in microglia from 5 days after tgCI. These results showed that CX3CL1 and CX3CR1 protein expression levels in pyramidal cells and microglia in the hippocampal CA1 field following tgCI were changed, indicating that tgCI-induced expression changes of CX3CL1 and CX3CR1 proteins might be closely associated with tgCI-induced delayed neuronal death and microglial activation.
The purpose of this investigation is to evaluate the effects of Samwha-tang(三化湯) Extracts on reversible forebrain ischemia experimentally induced from the occlusion of middle cerebral artery. The volume of cerebral ischemia, the volume of cerebral edema, and the change of pyramidal neuron of the CA1 area in hippocampus through light microscopy were investigated. we obtained the following results. The volume of the control group, which had ischemic damage was 21%, and the volume of the sample group, which had ischemic damage, was 16%. The ratio of the volume of the right/left hemisphere was 117.2 in the control group, and 108.8 in the sample group. Also, the light microscopy revealed that the pyramidal cells of CA1 area in hippocampus had many damages like changes into discontinuous and unsystematic forms. But, in the sample group, the cells were less damaged compared with the control group.
Cell segmentation and counting represent one of the most important tasks required in order to provide an exhaustive understanding of biological images. Conventional features suffer the lack of spatial consistency by causing the joining of the cells and, thus, complicating the cell counting task. We propose, in this work, a cascade of networks that take as inputs different versions of the original image. After constructing a Gaussian pyramid representation of the microscopy data, the inputs of different size and spatial resolution are given to a cascade of deep convolutional autoencoders whose task is to reconstruct the segmentation mask. The coarse masks obtained from the different networks are summed up in order to provide the final mask. The principal and main contribution of this work is to propose a novel method for the cell counting. Unlike the majority of the methods that use the obtained segmentation mask as the prior information for counting, we propose to utilize the hidden latent representations, often called the high-level features, as the inputs of a neural network based regressor. While the segmentation part of our method performs as good as the conventional deep learning methods, the proposed cell counting approach outperforms the state-of-the-art methods.
Glutamate dehydrogenase (GDH) is one of the main enzymes involved in the formation and metabolism of the neurotransmitter glutamate. In the present study, we investigated the distribution of the GDH-immunoreactive cells in the rat brain using monoclonal antibodies against bovine brain GDH isoprotein. GDH-immunoreactive cell were distributed in the basal ganglia, thalamus and the nuclei belong to substantia innominata, and its connecting area, subthalamic nucleus, zona incerta, and substantia niqra. We could see GDH-immunoreactive cells in the hippocampus, septal nuclei associated with the limbic system, the anterior thalamic nuclei connecting between the hypothalamus and limbic system, and its associated structures, amygdaloid nuclear complex, the dorsal raphe and median raphe nuclei and the reticular formation of the midbrain. The GDH-immunoreactive cells were shown in the pyramidal neurons of the cerebral cortex, the Purkinie cells of the cerebella cortex, their associated structures, ventral thalamic nuclei and the reticular thalamic nuclei that seem to function as neural conduction in the thalamus.
발생기 횐쥐 대뇌피질 발생의 형태적 변화와 이에 미치는 ECEE 영향을 구명하기 위해, 태생 14일, 태생 18일, 생후 수유기 및 이유기와 성체 대뇌를 각 부위로 나누어 H-E 염색으로 관찰하였다. EGEE 투여시 태생 14일에 대뇌피질의 두께는 두정엽피질이 제일 두꺼웠으나$(95{\pm}12.7\;{\mu}m)$, 대조군$(102{\pm}14.0\;{\mu}m)$에 비해 얇았고, 다른 피질에 비해 후두엽피질$(57{\pm}10.5\;{\mu}m)$이 제일 얇았다. 각 엽의 두께는 수유기 때에 급성장하는 경향을 나타내었으나, 이유기 이후 성장이 둔화되어 성체기 때와 유사했으며, 성체기 때는 두정엽피질$(93.4{\pm}21.6\;{\mu}m)$에서 가장 많이 성장하였다. EGEE 투여시 대뇌피질내 신경모세포의 수는 태생 14일 두정엽피질의 외투층에서 제일 많았으나$(207.7{\pm}11.4/10^{-2}\;mm$, 대조군에 비해 감소되었고$(224.2{\pm}13.8/10^{-2}\;mm$, 크기는 출생후 3일 후두엽피질의 뇌실막세포층에서 제일 크게 나타났으나$(7.5{\pm}1.3\;{\mu}m)$), 대조군$(9.0{\pm}1.2\;{\mu}m)$에 비해 감소되었다. 대조군과 같이 과립세포와 추체세포의 수는 두정엽피질의 II층과 III층에서 가장 많았으나, 대조군에 비해 감소되었고, 크기는 후두엽피질의 IV층과 V층에서 가장 컸으나, 대조군에 비해 감소되었다. EGEE 투여시 대조군과 같이 태생기와 출생후 3일까지의 대뇌피질은 뇌실막세포층, 외투층, 연변층의 3층으로 분화되나, 조직내 빈 강소와 공포가 나타나고, 신경모세포가 합착된 양상이 나타났다. 출생후 5일이후 수유기 때 대뇌피질층은 대조군과 동일하게 4층으로 나눌 수 있으나, 과립세포와 추체세포 내에 빈 강소나 공포가 나타났고, 신경세포의 수는 감소하였다. 이유기와 성체기 때는 대뇌피질의 세포층 구분이 뚜렷하지 않고, 외과립세포, 외추체세포들이 섞여 조직내 빈 강소나 공포가 형성되며, 신경세포 주위 혈관의 내강이 확대되거나 합착되어 나타났다.
It has been well documented that transient forebrain global ischemia causes selective neuronal degeneration in hippocampal CA1 pyramidal neurons with a delay of a few days. The mechanism of this delayed hippocampal CA1 pyramidal neuronal death (DND) is still controversial. To delineate the mechanisms of the DND, the effects of treatment with MK-801, an NMDA receptor antagonist, kynurenic acid, a NMDA/non-NMDA receptor antagonist, and/or cycloheximide, a protein synthesis inhibitor, on the DND were investigated in male Wistar rats. To examine the participation of apoptotic neuronal death in the DND, TUNEL staining was performed in ischemic brain section. Global ischemia was induced by 4-vessel occlusion for 20 min. All animals in this study showed the DND 3 and 7 days after the ischemic insult. The DND that occured 3 days and 7 days after the ischemia were not affected by pretreatment with MK-801 (1 mg/kg), but markedly attenuated by the pretreatment with kynurenic acid (500 mg/kg). Treatment with cycloheximide (1 mg/kg) also markedly inhibited the DND. The magnitudes of attenuation by the two drugs were similar. The magnitude of attenuation by co-treatments with kynurenic acid and cycloheximide was not greater than that with any single treatment. TUNEL staining was negative in the sections obtained 1 or 2 days after the ischemic insults, but it was positive at hippocampal CA1 pyramidal cells in sections collected 3 days after the ischemia. These results suggested that the DND should be mediated by the activation of non-NMDA receptor, not by the activation of NMDA receptor and that the activation of AMPA receptor should induce the apoptotic process in the DND.
Objectives : This study was carried out to evaluate the effect of Boyanghwano-tang Extracts on Reversible Forebrain Ischemia in Mongolian Gerbils. Methods : The water content of cerebral edema and the morphologicalㆍneurocytochemistrical change of neuron in MG were implemented to conduct this study. Results : The change rate of water content by ischemia in the normal group was 78.90% on the third day and 79.12% on the seventh day after an attack of ischemia. The rate in the control group was 80.34% and 81.72%. In the sample group the rate was 79.85% and 80.97%. This is a significant result. According to the result of the optical microscopic examination, the cells seen to be continuous and systematic in the pyramidal cells of hippocampus were changed into discontinuous and unsystematic forms in the control group. But compared with the control group, the cells were less damaged in the sample group. Conclusions : The data shows that the effect of Boyanghwano-tang Extracts on Reversible Forebrain Ischemia in MG is a significant result.
This study investigated whether propofol, an intravenous, non-barbiturate anesthetic, could reduce brain damage following global forebrain ischemia. Transient global ischemia was induced in gerbils by occlusion of bilateral carotid arteries for 3 min. Propofol (50 mg/kg) was administered intraperitoneally 30 min before, immediately after, and at 1 h, 2 h, 6 h after occlusion. Thereafter, propofol was administered twice daily for three days. Treated animals were processed in parallel with ischemic animals receiving 10% intralipid as a vehicle or with sham-operated controls. In histologic findings, counts of viable neurons were made in the pyramidal cell layer of the hippocampal CA1 area 4 days after ischemia. The number of viable neurons in the pyramidal cell layer of CA1 area was similar in animals treated with a vehicle or a subanesthetic dose of propofol. In terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT)-mediated dUTP nick end-labeling (TUNEL) assay, semiquantitative analysis of dark-brown neuronal cells was made in the hippocampal CA1 area. There was no significant difference in the degree of TUNEL staining in the hippocampal CA1 area between vehicle-treated and propofol-treated animals. These results show that subanesthetic dose of propofol does not reduce delayed neuronal cell death following transient global ischemia in Mongolian gerbils.
Antireflective pyramid arrays can be readily obtained via anisotropic etching in alkaline solution (KOH, NaOH), which is widely used in crystalline-Si (c-Si) solar cells. The periodic inverted pyramid arrays show even lower light reflectivity because of their superior light-trapping characteristics. Since this inverted pyramidal structures are mostly achieved using very complex techniques such as photolithograpy and laser processes requiring extra costs, here, we demonstrate the Cu-nanoparticle assisted chemical etching processes to make the inverted pyramidal arrays without the need of photolithography. We have mainly controlled the concentration of $Cu(NO_3)_2$, HF, $H_2O_2$ and temperature as well as time factors that affecting the reaction. Optimal inverted pyramid structure was obtained through reaction parameters control. The reflectance of inverted pyramid arrays showed < 10% over 400 to 1100 nm wavelength range while showing 15~20% in random pyramid arrays.
Berberine, an isoquinoline alkaloid found in Coptidis Rhizoma(goldenthread) extract, has multiple pharmacological effects such as anti-inflammatory, antimicrobial and anti-ischemic effects. In the present study, we examined the effects of berberine on neuronal survival and differentiation in a hippocampal precursor cell line and in the memory deficient rat model. Berberine increased in a dose dependent manner the survival of hippocampal precursor cells as well as differentiated cells. In addition, berberine promoted neuronal differentiation of hippocampal precursor cells. In the memory deficient rat model induced by stereotaxic injection of ibotenic acid into entorhinal cortex(Ibo model), hippocampal cells were increased about 2.7 fold in the pyramidal layer of CA1 region and about 2 fold in the dentate gyrus by administration of berberine after 2 weeks of ibotenic acid injection. Furthermore, neuronal cells immunoreactive to calbindin were increased in the hippocampus and entorhinal cortex area by administration of berberine. Taken together, these results suggest that berberine has neuroprotective effect in the Ibo model rat brain by promoting the neuronal survival and differentiation.
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