For the establishment of more reliable and applicable methods for the diagnosis of tuberculosis in dairy cattle, avian- and mammalian PPD tuberculins were prepared according to the methods of Weybridge purified protein derivative tuberculins with minor modifications. PPD tuberculin was not only a very pure product from a chemical standpoint, but also one which, judged on the basis of laboratory results, was likely to be more potent and reliable than HCSM tuberculin.
상당히 성공적인 사람병원체인 결핵균을 Robert Koch가 발견한 이래, 결핵 방제의 상당한 진보에도 불구하고, 결핵의 발생은 현재까지 계속되어오고 있다(Tiruviluamala and Reichman 2002). 그러므로, 완전한 민감성과 특이성을 갖는 신속한 진단방법이 결핵과 결핵의 잠복감염을 진단하는데 요구되어지며(Tiruviluamala and Reichman 2002), 계속적으로 결핵균과 BCG의 유전체와 단백질체 연구를 통하여 결핵 방제수단이 발전되어질 것이다 (Jungblut et al. 1999). 본 연구는 PPD가 결핵을 진단하는 특이한 항원만으로 정확하게 조화를 이루고 있지 않다는 것을 보여주었으며, 그것의 역가는 결론적으로 생물학적으로 평가되어져야 하지만, PPD의 제조는 단백질체 분석 기법에 의해 분석되고 표준화될 수 있음을 보여주었다. 이를 통하여 결핵 피내진단의 일괄된 결과를 위해 PPD 사용 전에 이와같은 단백질체 분석기법을 적용할 수 있을 것으로 사료되며, 본 연구에서 밝혀진 특이 항원은 새로운 피내진단항원으로 적용될 수 있을 것으로 사료된다.
This article provides an efficient 18F-labeling protocol based on a rapid condensation reaction between 2-cyanobenzothiazole (CBT) and N-terminal cysteine-containing biomolecules. The 18F-labeled CBT (18F-1) was prepared by radiofluorination of the tosylated precursor 4 with 18-crown-6/K+/[18F]F- complex. Using the purified 18F-1, 18F-labeled peptide (18F-7) and protein (18F-8) could be synthesized efficiently under mild conditions. This strategy would provide a convenient approach for rapid and site-specific 18F-labeling of various peptides and proteins for in vivo imaging and biomedical applications.
The nucleocapsid(NP) protein of Newcastle disease virus (NDV) and its derivative (NP$\sub$cfus)containing the myc region and six histidine residues fused to its C-terminus were pcpressed aboundantly in Escherichia coli. The proteins were purified by sucrose gradient centrifugation. Both the NP and NP$\sub$cfus/ proteins self-assem- bled into ring-like particles stacked together to from nucleocapsid-like structure which are heterogeneous in length with a diameter of 20${\pm}$2 nm and central holow of 5${\pm}$1 nm. Only a very small amount of the monomers in the particles was linked by inter-molecular disulfide bonds. Fusion of the C-terminal end to 29 amino acids inclusive of the myc epitope and His tag did not impair ring assembly buy inhibited the formation of the long herringbone structures. Immunogold lableing of the particles with the anti-myc antibody showed that the C-terminus of the NP$\sub$cfus/ protein is exposed on the surface of these ring-like particles.
Hypocholesterolemic peptide isolated from glycimin (11S protein) hydrolyzate by trypsin was purified and identified as LPYP and IAVPGEVA. To investigate the effects of phyiscal properties of side chains of the hypocholesterolemic activity, some of mutant peptides were designed and synthesized chemically. The structure related structures of each peptide were simulated and constructed and their conformations were observed by using spectropolarimeter. The hypocholesterolemic activities were monitored by assaying the inhibition of 3-hydroxy-3-methylglutaryl CoA reductase (HMG-CoA reductase) in vitro and by the determination of cholesterol content in mice serum. For LPYP derivatives, Hypocholesterolemic activity was lost when hydrophobic leucine residue at N-terminus was not so critical for maintaining hypocholesterolemic activity. For idealogical design of hypocholesterolemic peptides, the structure of HMG-CoA reductase are shown and inhibition mechanism of some peptides or inhibitors will be presented. For IAVPGEVA derivative inhibition of HMG-CoA reductase has been studied. For detail study of hypocholesterolemic activity, kinetic study of inhibition of peptides on HMG-CoA reductase and structural view of ligand binding should be investigated.
연구배경: 인체의 결핵균 감염에 대하여 체액성 면역과 세포 매개성 면역이 함께 관여하며 효소결합 면역 분석법으로 결핵균 항원에 대한 항체(IgG)를 측정하는 것은 결핵성 흉막염 진단법으로 이용할 수 있다. 방법: 1992년 5월부터 1994년 7월까지 인하대학교 인하병원에 흉막염으로 입원하였던 환자 중 원인이 확진된 결핵성 흉막염 환자 40예, 비결핵성 흉막염 환자 19예를 대상으로 하여 혈청 및 흉막액에서 PPD 항원과 LAM-B 항원에 대한 IgG 항체가의 흡광도를 측정 하였다. 결과: 1) 결핵성 흉막염군의 흉막액 및 혈청내 PPD와 LAM-B 항체가는 비결핵성 흉악염군보다 유의하게 높았다.(p<0.0005) 2) 혈청내 PPD와 LAM-B 항체가는 흉막액내 항체가 보다 높았다. 3) PPD와 LAM-B에 대한 흉막액 항체와 혈청 항체간에는 의미있는 상관관계를 보였다. 4) 흉막액 PPD 항체의 결핵성 흉막염 진단기준을 0.091로 할 경우 진단적 예민도는 55.0%, 94.7%를 나타내었다. 5) 흉막액 LAM-B 항체의 결핵성 흉막염 진단기준을 0.337로 할 경우 진단적 예민도는 50.0%, 특이도는 94.7%를 나타내었다. 5)결핵성 흉막염군의 진단 양성률은 PPD 피부반응 검사, 흉막액의 양, 활동성 폐결핵 동반여부 등에 의해 영향받지 않았다. 결론: PPD와 LAM-B에 대한 IgG 측정은 결핵성 흉막염의 진단에 도움을 줄 것으로 사료된다. 아울러 PPD와 LAM-B에 대한 IgG는 수동적으로 흉막조직을 통해 혈청에서 흉막액으로 이동함을 제시하고 있다.
배 경: 결핵에 대한 인체의 면역반응의 근간을 이루는 것은 대식세포가 결핵균을 탐식하여 사멸시키는 것이다. 이 과정에는 Interferon-gamma(IFN-$\gamma$)와 Tumor necrosis factor-alpha(TNF-$\alpha$) 가 중요한 역할을 한다. 저자들은 phytohemagglutinin(PHA) 혹은 purified protein derivative(PPD)에 의한 말초혈액 단핵구의 IFN-$\gamma$와 TNF-$\alpha$의 분비능이 폐결핵 환자들에서 치료함에 따라 어떻게 변화하는지를 살펴보고자하였다. 방 법: 폐결핵으로 확진되었고 전형적인 임상상을 보이는 치료시작 전 환자 5명, 치료시작 후 4개월이내의 환자 11명, 치료시작 후 4 개월에서 9개월 사이의 환자 6명 그리고 치료를 종료한 환자 7명을 대상으로 하였다. 환자의 말초혈액 단핵구를 분리하여 PHA와 PPD로 자극한 후 IFN-$\gamma$와 TNF-$\alpha$를 측정하여 서로 비교하였다. 결 과: 각 군간에 PHA와 PPD로 자극한 후 말초혈액 단핵구의 IFN-$\gamma$와 TNF-$\alpha$의 분비능은 차이가 없었다. 결 론: 전형적인 임상상을 보이는 폐결핵환자들에서 그 치료 시점에 따른 IFN-$\gamma$와 TNF-$\alpha$의 분비능의 차이는 없었다.
목적 : 골쇄보(骨碎補) (Drynariae Rhizoma)는 한의학에서 골격계 질환의 치유력을 강화시키는 것으로 알려져 있는데, 항 virus, 항 박테리아, 항 염증 작용이 있는 것으로 보고되고 있다. 질병을 치료하기 위하여 면역 반응을 조절하는 기전에 관하여 오랫 동안 많은 관심을 기울여왔는데, 식물에서 추출한 약재들이 면역기능을 조절할 수 있는 가능성에 대하여 광범위하게 연구되었다. 이에 저자는 골쇄보(骨碎補)의 ethanol 추출물을 가지고 항 세포성과 변역 조절 기능에 대하여 연구하였다. 방법 : 사람의 혈액단핵구 (PBMC)의 배양은 thymidine 법으로 검정하고 nitric oxide (NO) 생성은 mouse macrophage RAW 264.7 세포주를 이용하였으며 IL-2, IFN 와 TNF-a 생성은 ELISA 기술로 검정하였다. 세포 증식은 FACScan으로 측정하고 세포 표면항원 CD16, CD25 및 HLA-DR 은 FITC/PE 항체로 측정하였다. 결과 : 골쇄보(骨碎補)는 mitogen (phytohaemagglutinin; PHA) 과 antigen (purified protein derivative; PPD) 에 의해 자극받은 human peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) 의 증식을 억제하였다. 더욱이, 골쇄보(骨碎補)는 mouse 와 인간에 기원한 여러 세포들의 성장을 억제하였다. 또한, nitric oxide (NO), interleukin-2 (IL-2)와 tumor necrosis $factor-{\alpha}\;(TNF-{\alpha})$ 의 생성을 억제하였다. 한편, human PBMCs 에서 intracytoplasmic $interferon-{\gamma}\;(IFN-{\gamma})$와 cell surface markers 인 CD16, HLA-DR 의 expression은 골쇄보(骨碎補)에 의하여 영향을 받지 않았으나, CD25 expression 은 현저히 통제되었다. 결론 : 골쇄보(骨碎補) ethanol 추출물이 in vitro 에서 항 증식성과 변역 억제작용을 가지고 있다는 가능성을 의미하는 것으로 사료된다.
The trend in the prevalence of bovine tuberculosis (BTB) in Korean dairy cattle was investigated in relation to test programs used between 1961 and 2004, during which a total of 8,961,061 dairy cows were tested and 10,248 confirmed to have BTB. The annual prevalence increased in the late 1960s, then decreased during the 1970s and 1980s, and started to increase again from the late 1990s. It seemed that the prevalence varies according to the different test program used. The prevalence of BTB was higher when the tests were performed with heat-concentrated synthetic medium (HCSM) or purified protein derivative (PPD) tuberculin alone compared to that when using combined HCSM and PPD tuberculin testing.
Comparative studies of histopathologic lesions from 23 purified protein derivative (PPD) positive cattle, 21 slaughter cattle found with tuberculosis, and 11 tuberculosis-positive elk (Cervus elaphus) were performed. PPD positive cattle did not show specific histopathologic lesions in all 23 heads that were no visible lesion reactor. Slaughter cattle found with tuberculosis revealed microscopically classical granulomatous lesion (tubercle) with central caseous necrosis surrounded by mantle of epithelioid cells and Langhan's giant cells capsuled by connective tissue in lung. Elk was noted with some different lesion patterns with classical granulomatous lesion and suppurative abscesses that was composed of fibrin, degenerated cells without having connective tissue. In addition, many Langhan's giant cells infiltration in alveoli at peripheral lesion were observed in some cases of classical granulomatous lesion and suppurative abscesses.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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