Fundamental study was carried out to elucidate the mechanisms of biological degradation of dyestuff in environments. A few bacterial strains which were capable of degrading amarnath were obtained from soil through an extensive screening program and identified by microbiolological properties. Conditions for bacterial growth and amaranth degradation were characterized and optimized, and the degradation products were identified. The results were as follows. 1. The most active strain A12-1 to be capable of degradation of amaranth was identified as Pseudomonas sp. 2. Optimal conditions for growth of the strain A12-1 were:$35^{\circ}C$ and pH 7.5, and growth was markedly increaesd by aeration. 3. Degradation of amaranth by the strain was accessed under similiar conditions for growth, however significantly inhibited when the culture was aerated. 4. Both bacterial growth and amaranth degradation were gradually decreased with increased concentration of amaranth in the culture. 5. Reaction of the crude enzyme from the strain A12-1 was optimal at $35^{\circ}C$ and pH 7.5 for degrading amaranth. 6. Sodium naphthionate and R-amino salt were found to be the products of amaranth degradation by the strain A12-1.
Of 23 psychrotrophic bacteria isolated from the west Pacific deep-sea sediments, 19 were assigned to the $\gamma$-Proteobacteria, 3 to the <$\beta$-Proteobacteria, and 1 to the Gram-positive bacteria, as determined by their 16S rDNA sequences. Ten psychrotrophs, affiliated to the Psychrobacter, Pseudoalteromonas, and Pseudomonas genera in the $\gamma$-Proteobacteria group, were screened for lipolytic bacteria. The majority of the lipolytic isolates had growth temperatures between 4-$30^\circ{C}$, and all of them were neutrophilic, aerobic, or facultatively anaerobic, and some were able to produce multiple kinds of ectohydrolytic enzymes. The deep-sea strains Psychrobacter sp. wp37 and Pseudoalteromonas sp. wp27 were chosen for further lipase production analysis. Both strains had the highest lipase production when grown at 10 to $20^\circ{C}$; their highest lipase production occurred at the late-exponential growth stage; and the majority of the enzymes were excreted to the outside of the cells. Lipases from both strains had the same optimal reaction temperature and pH (20-$30^\circ{C}$, pH 7-8) and could retain about 60% of their highest activity at $4^\circ{C}$. Furthermore, SDS-PAGE and an in-gel activity test showed that they had the same high molecular mass of about 85 kDa.
The chitinase-producing strain TKU008 was isolated from soil in Taiwan, and it was identified as a new species of Pseudomonas. The culture condition suitable for production of chitinase was found to be shaking at $30^{\circ}C$ for 4 days in 100 ml of medium containing 1% shrimp and crab shell powder, 0.1% $K_2HPO_4$, and 0.05% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ (pH 7). The TKU008 chitinase was suppressed by the simultaneously existing protease, which also showed the maximum activity at the fourth day of incubation. The molecular mass of the chitinase was estimated to be 40 kDa by SDS-PAGE. The optimum pH, optimum temperature, pH stability, and thermal stability of the chitinase were pH 7, $50^{\circ}C$, pH 6-7, and <$50^{\circ}C$, respectively. The chitinase was completely inhibited by $Mn^{2+}$ and $Cu^{2+}$. The results of peptide mass mapping showed that 11 tryptic peptides of the chitinase were identical to the chitinase CW from Bacillus cereus (GenBank Accession No. gi 45827175) with a 32% sequence coverage.
The present work is aimed at providing additional new pure cultures of oxalate utilizing bacteria and its preliminary characterization for further work in the field of oxalate-metabolism and taxonomic studies. The taxonomy of 14 mesophilic, aerobic oxalotrophic bacteria isolated by an enrichment culture technique from soils rhizosphers, and the juice of the petiole/stem tissue of plants was investigated. Isolates were characterized with 95 morphological, biochemical and physiological tests. Cellular lipid components and carotenoids of isolates were also studied as an aid to taxonomic characterization. All isolates were Gram-negative, oxidase and catalase positive and no growth factors were required. In addition to oxalates, some of the strains grow on methanol and/or formate. The taxonomic similarities among isolates, reference strains or previously reported oxalotrophic bacteria were analysed by using the Simple Matching (S/ sub SM/) and Jaccard (S$\_$J/) Coefficients. Clustering was performed by using the unweighted pair group method with arithmetic averages (UPGMA) algorithm. The oxalotrophic strains formed five major and two single-member clusters at the 70-86% similarity level. Based on the numerical taxonomy, isolates were separated into three phenotypic groups. Pink-pigmented strains belonged to Methylobacterium extorquens, yellow-pigmented strains were most similar to Pseudomonas sp. YOx and Xanthobacter autorophicus, and heterogeneous non-pigmented strains were closely related to genera Azospirillum, Ancylobacter, Burkholderia and Pseudomonas. New strains belonged to the genera Pseudomonas, Azospirillum and Ancylobacter that differ taxonomically from other known oxalate oxidizers were obtained. Numerical analysis indicated that some strains of the yellow-pigmented and nonpigmented clusters might represent new species.
The effects of the presence of commercial non-ionic surfactants on the cell growth and diesel degradation by Pseudomonas sp. OSD were studied. Most surfactants inhibited the diesel biodegradation at high concentration(1000mg/1). However, some surfactants showed no inhibition at lower concentrations. Tween 20, Brij 58, Brij 78 were not inhibitory to the diesel biodegradation even at high concentration. These chosen surfactants has relatively high HLB values. There exists complicated relationship for diesel bioremediation between cell hydrophobicity, surfactant HLB, contaminants, an soil.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.27
no.3
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pp.441-447
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1998
A bacterial strain No. 43 was isolated from soil samples as a levan-assimiating microorganism producing an extracellular levanase and hydrolying levan to levanbiose. According to the taxonomic characteristics of its morphological and physiological properties, the strain was idenified as Pseudomonas sp. No. 43. The optimum culura medium was composed of 10g levan, 5g(NH4)2SO4, 3g NH4Cl, 3g polypepton, 1g K2HPO4, 0.5gMgSO4.7H2O, and 0.2g MnCl2.4H2O per liter. The cultivation for levanase was carried out in pH 7.0 at 4$0^{\circ}C$ for 28hr. The reaction product was a kind of oligosaccharide and it was purified by chilled ethanol precipitation and gel filtration for evalluation of degree of polymerization (DP). The purified product was determined as levanbiose of MW 342 and DP2 by HPLC and FAB-MS.
Here, we attempted to evaluate the activity of artificially transconjugated multiple plasmids in 'designer biocatalysts' for the bioremediation of cocontaminated sites under nonselective conditions. We observed profound losses in the percent survivals of artificially transconjugated plasmid activity ($66 - 78\%$ loss immediately after freeze-drying, $99.45 - 99.88\%$ loss by the end of 6 months storage) in reconstituted Pseudomonas sp. KM12TC. Such unpredictable high losses of this particular plasmid appeared to clearly be a deleterious effect. However, even after 6 months of storage, the cells remained able to degrade $95\%$ of phenol within 9 days, and the full effiux of$^%${73} As, as compared to that of the non-freeze-dried cells, was successfully achieved 4 to 9 days later. These results indicate that 'stable designer biocatalysts' can remain viable, even after freeze-drying and 6 months of storage.
A novel bacteriocin produced by Streptococcus parauberis Z49 strain was characterized and efficiently extracted from fermented cultures by use of aqueous two-phase systems. The nisin-like bacteriocin, which was active even after a heat treatment at $121^{\circ}C$ for 15 min and in the broad pH range from 2 to 12, showed inhibition of bacterial growth of Micrococcus luteus, Lactobacillus spp., Lactobacillus fermentum, Enterococcus faecium, Listereia monocytogenes, and Pseudomonas fluorescens. Optimal conditions of PEG 600/$Na_2SO_4$ aqueous two-phase systems for the simple and rapid extraction of a novel bacteriocin were determined to be PEG 600 15%, $Na_2SO_4$ 30%, and NaCl 8%, where the bacteriocin was concentrated in PEG layer.
Kim, Yumi;Oh, Jong-Min;Jung, Hea-Yeon;Lee, Seung Yeop;Roh, Yul
Economic and Environmental Geology
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v.47
no.4
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pp.431-439
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2014
The purposes of this research were to investigate the enrichment of metal-reducing bacteria from KURT groundwater and the identification of the microbial diversity by 16S rRNA as well as to examine microbial Fe(III)/Mn(IV) reduction and to analyze morphological features of interactions between microbes and precipitates and their mineralogical composition. To cultivate metal-reducing bacteria from groundwater sampled at the KURT in S. Korea, different electron donors such as glucose, acetate, lactate, formate, pyruvate and Fe(III)-citrate as an electron accepter were added into growth media. The enriched culture was identified by 16S rRNA gene sequence analysis for the diversity of microbial species. The effect of electron donors (i.e., glucose, acetate, lactate, formate, pyruvate) and electron acceptors (i.e., akaganeite, manganese oxide) on microbial iron/manganese reduction and biomineralization were examined using the 1st enriched culture, respectively. SEM, EDX, and XRD analyses were used to determine morphological features, chemical composition of microbes and mineralogical characteristics of the iron and manganese minerals. Based on 16S rRNA gene analysis, the four species, Fusibacter, Desulfuromonas, Actinobacteria, Pseudomonas sp., from KURT groundwater were identified as anaerobic metal reducers and these microbes precipitated metals outside of cells in common. XRD and EDX analyses showed that Fe(III)-containing mineral, akaganeite (${\beta}$-FeOOH), reduced into Fe(II)/Fe(III)-containing magnetite ($Fe_3O_4$) and Mn(IV)-containing manganese oxide (${\lambda}-MnO_2$) into Mn(II)-containing rhodochrosite ($MnCO_3$) by the microbes. These results implicate that microbial metabolism and respiratory activities under anaerobic condition result in reduction and biomineralization of iron and manganese minerals. Therefore, the microbes cultivated from groundwater in KURT might play a major role to reduce various metals from highly toxic, mobile to less toxic, immobile.
CHO WONSIL;LEE EUN-HEE;SHIM EUN-HWA;KIM JAISOO;RYU HEE WOOK;CHO KYUNG-SUK
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.15
no.5
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pp.952-964
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2005
The diesel-degrading activities of biofilms sampled from petroleum-contaminated groundwaters in urban subway drainage systems were examined in liquid cultures, and the microbial populations of the biofilms were characterized by denaturing gel gradient electrophoresis (DGGE) and 16S rDNA sequence analysis. Biofilm samples derived from two sites (19 K and 20 K) at subway Station N and Station I could degrade around $80\%$ of applied diesel within 20 and 40 days, respectively, at $15^{\circ}C$, and these results were strongly correlated with the growth patterns of the biofilms. The closest phylogenetic neighbor of a dominant component in the 19 K biofilm was Thiothrix fructosivorans strain Q ($100\%$ similarity). Four dominant strains in the 20 K biofilm were closely related to Thiothrix fructosivorans strain Q ($100\%$ similarity), Thiothrix sp. CC-5 ($100\%$ similarity), Sphaerotilus sp. IF14 ($99\%$ similarity), and Cytophaga-Flexibacter-Bacterioides (CFB) group bacterium RW262 ($98\%$ similarity). Three dominant members in the Station I biofilms were very similar to uncultured Cytophagales clone CRE-PA82 ($91\%$ similarity), Pseudomonas sp. WDL5 ($97\%$ similarity), and uncultured CFB group bacterium LCK-64 ($94\%$ similarity). The microbial components of the biofilms differed depending on the sampling site. This is the first report on the isolation of clones highly similar to Thiothrix fructosivorans and Thiothrix sp. from biofilms in petroleum-polluted groundwaters, and the first evidence that these organisms may play major roles in petroleum degradation and/or biofilm-development.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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