Park, Kap-Joo;Lee, Byeong-Chol;Lee, Jae-Seok;Park, Chan-Sun;Cho, Myung-Hwan
Korean Journal of Environmental Biology
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v.29
no.1
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pp.52-60
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2011
Today, the weather is changing continually, due to the progress of global warming. As the weather changes, the habitats of different organisms will change as well. It cannot be predicted whether or not the weather will change with each passing day. In particular, the biological distribution of the areas climate change affects constitutes a major factor in determining the natural state of indigenous plants; additionally, plants are constantly exposed to rhizospheric microorganisms, which are bound to be sensitive to these changes. Interest has grown in the relationship between plants and rhizopheric microorganisms. As a result of this interest we elected to research and experiment further. We researched the dominant changes that occur between plants and rhizospheric organisms due to global warming. First, we used temperature as a variable. We employed four different temperatures and four different sites: room temperature ($27^{\circ}C$), $+2^{\circ}C$, $+4^{\circ}C$, and $+6^{\circ}C$. The four different sites we used were populated by the following species: Pinus deniflora, Pinus koraiensis, Quercus acutissima, and Alnus japonica. We counted colonies of these plants and divided them. Then, using 16S rRNA analysis we identified the microorganisms. In conclusion, we identified the following genera, which were as follows: 10 species of Bacillus, 2 Enterobacter species, 4 Pseudomonas species, 1 Arthrobacter species, 1 Chryseobacterium species, and 1 Rhodococcus species. Among these genera, the dominant species in Pinus deniflora was discovered in the same genus, but a different species dominated at $33^{\circ}C$. Additionally, that of Pinus koraiensis changed in both genus and species which changed into the Chryseobacrterium genus from the Bacilus genus at $33^{\circ}C$.
Trichloroethylene (TCE) is a widely used substance in commercial and industrial applications, yet it must be removed from the contaminated soil and groundwater environment due to its toxic and carcinogenic nature. We investigated bacterial community structure, dominant bacterial strain, and removal efficiency in a TCE contaminated groundwater treatment system using immobilized carrier. The microbial diversity was determined by the nucleotide sequences of 16S rRNA gene library. The major bacterial population of the contaminated groundwater treatment system was belonging to BTEX degradation bacteria. The bacterial community consisted mainly of one genus of Pseudomonas (Pseudomonas putida group). The domination of Pseudomonas putida group may be caused by high concentration of toluene and TCE. Furthermore, we isolated a toluene and TCE degrading bacterium, named Pseudomonas sp. DHC8, from the immobilized carrier in bioreactor which was designed to remove TCE from the contaminated ground water. Based on the results of morphological and physiological characteristics, and 16S rRNA gene sequence analysis, strain DHC8 was identified as a member of Pseudomonas putida group. When TCE (0.83 mg/L) and toluene (60.61 mg/L) were degraded by this strain, removal efficiencies were 72.3% and 100% for 12.5 h, respectively. Toluene removal rate was 2.89 ${\mu}mol/g$-DCW/h and TCE removal rate was 0.02 ${\mu}mol/g$-DCW/h. These findings will be helpful for maintaining maximum TCE removal efficiency of a reactor for bioremediation of TCE.
Kim, Ji-Young;Kim, Young-Chang;You, Lim-Jai;Lee, Ki-Sung;Ok, Ka-Jong;Hee, Min-Kyung;Kim, Chi-Kyung
Journal of Microbiology
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v.35
no.1
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pp.53-60
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1997
Pseudomonas sp. P20 and Pseudomonas sp. DJ-12 isolated from the polluted environment are capable of degrading biphenyl and 4-chlorobiphenyl (4CB) to produce benzoic acid and 4-chlorobenzoic acid (4CBA) respectively, by pcbABCD-encoded enzymes. 4CBA can be further degraded by Pseudomonas sp. DJ-12, but not by Pseudomonas sp P20. However, the meta-cleavage activities of 2, 3-dihydroxybiphenyl (2, 3-DHBP) and 4-chloro-2, 3-DHBP dioxygenases (2, 3-DHBD) encoded by pcbC in Pseudomonas sp. P20 were stronger than Pseudomonas sp. DJ-12. In this study, the pcbC gene encoding 2, 3-DHBD was cloned from the genomic DNA of Pseudomonas sp. P20 by using pKT230. A hybrid plasmid pKK1 was constructed and E. coli KK1 transformant was selected by transforming the pKK1 hybrid plasmid carrying pcbC into E. coli XL1-Blue. By transferring the pKK1 plasmide of E. coli KK1 into Pseudomonas sp. DJ-12 by conjugation, a recombinant strain Pseudomonas sp. P20, Pseudomonas sp. DJ-12, and the recombinant cell assay methods. Pseudomonas sp. DJ12-C readily degraded 4CB and 2, 3-DHBP to produce 2-hydroxy-6-oxo-6-phenylhexa-2, 4-dienoic acid (HOPDA), and the resulting 4CBA and benzoic acid were continuously catabolized. Pseudomonas sp. DJ12-C degraded 1 mM 4CB completely after incubation for 20 h, but Pseudomonas sp. P20 and Pseudomonas sp. DJ-12 showed only 90% and Pseudomonas sp. DJ-12 had, but its degradation activity to 2, 3-DHBP, 3-methylcatechol, and catechol was improved.
4-Chlorobiphenyl-degrading Pseudomonas sp. DJ-12 was able to degrade 4-chlorobenzoate(4CBA), 4-iodobenzoate, and 4-bromobenzoate completely under aerobic conditions. During. the degradation of 4CBA by Pseudomonas sp. DJ-12, chloride ions were released by dechlorination and 4-hydroxybenzoate was produced as an intermediate metabolite. The NotI-KNA fragments of pKC157 containing dechlorination genes hybridized with the gene encoding 4CBA:CoA dehalogenase of Pseudomonas sp. CBS3 which is responsible for the hydrolytic dechlorination of 4CBA. These results imply that Pseudomonas sp. DJ-12 degrades 4CBA to 40hydroxybenzoate via dechlorination as the initial step of its degradativ pathway. The genes responsible for dechlorination of 4CBA were found to be blcated on the chromosomal DNA of Pseudomonas sp. DJ-12.
Pseudomonas sp. P20 was a bacterial isolate which has the ability to degrade 4-chlorobi- phenyl(4CB) to 4-chlorobenzoic acid via the process of meta-cleavage. The recombinant plasmid pCK1 was constructed by insetting the 14-kb EcoRI fragment of the chromosomal DNA containing the 4CB-degrading genes into the vector pBluescript SK(+). Subsequently, E. coli XL1-Blue was transformed with the hybrid plasmid producing the recombinant E. coli CK1. The recombinant cells degraded 4CB and 2,3-dihydroxybiphenyl(2,3-DHBP) by the pcbAB and pcbCD gene products, respectively. The pcbC gene was expressed most abundantly at the late exponential phase in E. coli CK1 as well as in Pseudomonas sp. P20, and the level of the pcbC gene product, 2,3-DHBP dioxygenase, expressed in E. coli CK1 was about two-times higher than in Pseudomonas sp. P20. The activities of 2,3-DHBP dioxygenase on catechol and 3-methylcatechol were about 26 to 31% of its activity on 2,3-DHBP, but the enzyme did not reveal any activities on 4-methylcatechol and 4-chlorocatechol.
With the enrichment culture technique, bacterial strains which degrade diesel oil were isolated from soil contaminated with diesel oil. One of the isolates named GENECO 1 showed the highest activity for emulsification of diesel oil as well as the highest growth rate. This strain, GENECO 1, was identified as a Pseudomonas sp. based on its biochemical, physiological characteristics and 16S rDNA sequences. The optimal cultural conditions for cell growth and oil emulsifying activity of its culture were as follow; $30^{\circ}C$ for temperature, 7.0 for pH. Diesel oil degradation was analysed by the gas chromatography. More than 95% of 1% treated diesel oil were converted into a form no longer extractable by mixed organic solvents after 96 hours incubation.
In order to evaluate the soil microbiological characteristics of paddy fields in Korea, surface soils were sampled from 63 sites in different agroclimatic zones before submersion of the fields. The distribution of microorganisms and the microbial diversity indices were examined. Soil microbial populations were generally higher in southern area than in northern area. The colony forming units(cfus) of fluorescence Pseudomonas sp. showed the greatest regional differences, among the microbes investigated. On the topographical differences, the cfus of aerobic bacteria, fluorescence Pseudomonas sp. and Azotobacter sp. maintained high level in coastal plains; and on the sail textural difference, fungus was the highest in clay soil, but Bacillus sp., Azotobacter sp and denitrifiers were the highest in silty clay loam soil at 0.05 probability level based on the multiple range test. The numbers of ammonium oxidizers and Azotobacter sp. were increased with soil pH. Microbial diversity indices of paddy fields which calculated from the percentages of Bacillus sp. fluorescence Pseudomonas sp. Azotobacter sp. denitrifiers, ammonium oxidizers, nitrite oxidizers, actinomycetes and fungus to these total microbial numbers were between 0.109 and 0.661. On the soil textures, the microbial diversity indices of sandy, sandy loam, silty clay loam, clay loam and clay soil were 0.443, 0.427, 0.414, 0.405 and 0.362 respectively.
Pseudomonas sp. GRC3 produced extracellular chitinase(s) and ${\beta}$-1,3-glucanase(s), possible biocontrol agents. Both of enzymes appeared to inhibit the growth of plant phathogens, especially Phytophthora capsici. Antifungal activities of Pseudomonas sp. GRC3 determined was more than 78% inhibition rate against P. capsici.
A strain of Pseudomonas sp. isolated from soil was shown to produce a high level of extracellular endo-inulinase. In this work, the endo-inulinase gene (inu1) of the bacterial strain was cloned into the plasmid pBR322 by using EcoRI restriction endonuclease and E. coli HB101 as a host strain. One out of 7, 000 transformants obtained from the above cloning experiment formed a clear zone around its colony on the selective medium supplemented with 2.0% inulin after a prolonged incubation at 37$\circ$C and subsequent cold shock treatment. The functional clone was found to carry a recombinant plasmid (pKMG50) with a 3.7 kb genomic insert containing the genetic information for the inulinase activity. The inulinase from E. coli HB101/pKMG50 was proved to be an endo-acting enzyme and produced constitutively in the recombinant E. coli cells. Zymogram of the enzyme from the recombinant cells with inulin substrate indicated that the molecular mass of the active protein was 190 Kd, while that of the endo-inulinase from the Pseudomonas strain was 170 Kd. This size discrepancy suggested that the inulinase from the recombinant E. coli HB101 cells might be the initial product of translation, not the mature form produced in the strain of Pseudomonas sp..
The beneficial effects of Eisenia fetida on soil properties have been attributed to their interaction with soil microorganisms. The bacterial diversity of the intestinal tract of E. fetida was investigated by culture-dependent and culture-independent methods including denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) and pyrosequencing analyses. In a pure culture, Lysinibacillus fusiformis (51%), Bacillus cereus (30%), Enterobacter aerogenes (21%), and L. sphaericus (15%) were identified as the dominant microorganisms. In the DGGE analyses, B. cereus (15.1%), Enterobacter sp. (13.6%), an uncultured bacterium (13.1%), and B. stearothermophilus (7.8%) were identified as the dominant microorganisms. In the pyrosequencing analyses, Microbacterium soli (26%), B. cereus (10%), M. esteraromaticum (6%), and Frigoribacterium sp. (6%) were identified as the dominant microorganisms. The other strains identified were Aeromonas sp., Pseudomonas sp., Borrelia sp., Cellulosimicrobium sp., Klebsiella sp., and Leifsonia sp. The results illustrate that culture independent methods are better able to detect unculturable microorganisms and a wider range of species, as opposed to isolation by culture dependent methods.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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