Chromosomal gene transferable hybrid plasmids, RP4::Mu cts and RP4::mini-Mu, were transferred by conjugation from E. coli to Pseudomonas strains. In order to use for recipient cells of RP4::Mu cts and RP4:: mini-Mu, plasmid-free Pseudomonas strains were characterized for their antobiotic resistance, aromatic hydrocarbon utility and degradation patterns of chlorinated herbicide. Transfer frequencies of RP4::mini-Mu exhibited about $10^{-2}$ to $10^{-4}$, while those of RP4::Mu cts exhibited very low value of $10^{-7}$ in recipients tested except Pseudomonas aeruginosa KU557. Existance of hybrid plasmids in Pseudomonas transconjugants were identified by their antibiotic resistance and agarose gel electrophoresis. In case of RP4::Mu cts transconjugants it was also confirmed by demonstrating that they were capable of releasing phage and forming plaques at $43^{\circ}C$. Plaque forming unit of the transconjugants was about $10^{5}$. It was shown by the stability test that RP4::Mu cts and RP4::mini-Mu in Pseudomonas were relatively stable.
Multi-drug resistant Pseudomonas aeruginosa has been implicated in a variety of serious therapeutic problems in clinical environments. Among the 968 P. aeruginosa isolates obtained from two hospitals in Daegu, Korea, we acquired 17 isolates that were resistant to all available tested antimicrobial agents, with the exception of colistin (colistin-only sensitive). We characterized the antimicrobial susceptibilities, $metallo-{\beta}-lactamases$, and epidemiological relatedness among the colistin-only sensitive P. aeruginosa isolates. All colistin-only sensitive isolates were positive in the modified Hodge test and imipenem-EDTA synergy test, thereby indicating the production of $metallo-{\beta}-lactamases$. 11 isolates from the secondary hospital and six isolates from the tertiary teaching hospital harbored $bla_{VIM-2}$ and $bla_{IMP-1}$, respectively. The pulsed-field gel electrophoretic analysis of the SpeI-digested DNA from P. aeruginosa isolates indicated that two different clones of colistin-only sensitive P. aeruginosa originated from each hospital, and had spread within the hospital environment. Overall, colistin-only sensitive P. aeruginosa was detected in Korea for the first time, but no pan-drug resistant bacteria were identified. Nationwide surveillance is required in order to monitor the emergence of colistin-only sensitive or pan-drug resistant bacteria.
Pseudomonas aeruginosa $GRC_2$, siderophore-producing strain, inhibited growth of Macrophomina phaseolina in vitro and reduced charcoal rot in seeds of Brassica juncea in field when coated with adaptive strains. P. aeruginosa $GRC_2$ and Azotobacter chroococcum $AC_1$ produced indole-3-acetic acid and solubilized insoluble phosphate. A. chroococcum $AC_1$ fixed nitrogen asymbiotically. Urea and diammonium phosphateadaptive variant strains of P. aeruginosa and A. chroococcum strongly inhibited M. phaseolina in comparison to parental strains. Bacterization of seeds induced seed germination, seedling growth, and enhanced yield of B. juncea by 10.87% as compared to full doses of urea and diammonium phosphate. Both adaptive strains of chemical fertilizers aggressively colonized roots, showing effectiveness to growth and developments of B. juncea.
Hyesun Yu;Areum Shin;Doo Ri Kim;Jaeyoung Choi;Hee Young Ju;Joongbum Cho;Cheol-In Kang;Yae-Jean Kim
Pediatric Infection and Vaccine
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v.30
no.1
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pp.47-54
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2023
With the widespread use of broad-spectrum antibiotics in clinical practice, the emergence of multidrug-resistant (MDR) gram-negative bacteria has become a global problem. The MDR Pseudomonas aeruginosa infection is especially difficult to treat and increases mortality in critically ill patients. Ceftolozane-tazobactam (ZerbaxaTM) is a fifth-generation cephalosporin and beta-lactamase inhibitor that has proved to be effective for treating complicated urinary tract infections and complicated intra-abdominal infections caused by MDR P. aeruginosa. Herein, we report the first case of pediatric hematologic cancer in Korea that was successfully treated for MDR P. aeruginosa bacteremia with Ceftolozane-tazobactam.
Experiments were performed in mice(Balb/C) to support the basic efficacy of the human immunoglobulin (IgG) preparation. The antibacterial activity of IgG purified from human sera was examined with or without the quinolone agent, ciprofloxacin(CPFX), against Pseudomonas aeruginosa isolated from clinical specimens. Results were as follows: Antibacterial activities in terms of the percentage of survivors, after administration of Ps. aeruginosa into mouse intraperitoneal cavity were in the following order, single IgG group, CPFX administration after IgG pretreatment group, IgG and CPFX combined administration group and CPFX alone group. The number of living bacteria was monitored in blood and liver tissue of mice infected with Ps. aeriginosa and treated by IgG administration. The increase of living bacteria in liver was more drastic than that in blood. Leukocytosis was observed in mice injected with IgG, excluding those only with ciprofloxacin, after 8 hours of administration to see a decrease to normal number of bacteria after 18 hours. No significant difference was noticed between pretreatment group and post treatment group. In vitro susceptibility test of IgG against Ps. aeruginosa, minimal inhibitory concentration(MIC) was $250{\mu}g/ml$, resistant to IgG, regardless of a combined administration with CPFX. In vitro test revealed that the IgG itself did not have anti-Ps. aeruginosa activity.
Hye In Ahn;Hyun-Jae Jang;Ok-Kyoung Kwon;Jung-Hee Kim;Jae-Hoon Oh;Seung-Ho Kim;Sei-Ryang Oh;Sang-Bae Han;Kyung-Seop Ahn;Ji-Won Park
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.33
no.4
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pp.430-440
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2023
The type three secretion system (T3SS) is a major virulence system of Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa). The effector protein Exotoxin S (ExoS) produced by P. aeruginosa is secreted into the host cells via the T3SS. For the purpose of an experiment on inhibitors with regard to ExoS secretion, we developed a sandwich-type enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) system. Quercetin was selected because it has a prominent ExoS inhibition effect and also is known to have anti-inflammatory and antioxidant effects on mammalian cells. In this study, we investigated the effects of quercetin on the expression and secretion of ExoS using ELISA and Western blot analysis methods. The results showed that the secretion of ExoS was significantly decreased by 10 and 20 µM of quercetin. Also, popB, popD, pscF, and pcrV which are composed of the T3SS needle, are reduced by quercetin at the mRNA level. We also confirmed the inhibitory effect of quercetin on cytokines (IL-6, IL-1β, and IL-18) in P. aeruginosa-infected H292 cells by real-time polymerase chain reaction (PCR) and ELISA. Collectively, quercetin inhibits the secretion of ExoS by reducing both ExoS production and the expression of the needle protein of T3SS. Furthermore, these results suggest that quercetin has the potential to be used as an anti-toxic treatment for the inflammatory disease caused by P. aeruginosa infection.
Sirisha, K.;Kumar, C. Ganesh;Ramakrishna, Kallaganti Venkata Siva;Gunda, Shravan Kumar
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.45
no.3
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pp.209-217
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2017
In the enduring investigation of the bioactive microbes, Pseudomonas aeruginosa strain (referred to as CGK-KS-1 (ICTB-315)), isolated from Chumathang hot spring, Ladakh, and India, was identified to possess a major bioactive fraction with antimicrobial and anti-biofilm properties. This bioactive metabolite was purified through bioactivity-guided fractionation. The chemical structure of this major compound was elucidated as phenazine-1-carboxamide (PCN) based on $^1H$ and $^{13}C$ NMR, FT-IR, EI-HR-MS and 2D NMR spectroscopic techniques. In the current study, PCN exhibited antimicrobial activity with MIC values ranging between $1.9-3.9{\mu}g/ml$ against various test human pathogens and Xanthomonas spp. PCN showed the anti-biofilm property with the $IC_{50}$ values ranging from 17.04 to $60.7{\mu}M$ against different test pathogens. The in silico docking studies showed PCN strongly interacted with various proteins of different Xanthomonas spp. with high binding energies. We report herein for the first time the anti-biofilm property and the docking studies of PCN. The extrolite from P. aeruginosa strain CGK-KS-1 showed promising bioactivities and may be considered as a potential candidate for application in various biocontrol strategies.
The hydrogen-producting bacterium was isolated from fresh water and identified as Enterbacter cloacae. The isolated was named Enterobacter cloacae YJ-1. In batch culture, The optimum cultivation temperature and pH of strain YJ-1 was 35$^{\circ}C$ and 7.5, respectively. All of the added glucose was consumed completely during fermentation even though pH was not controlled. Amount of hydrogen produced on each condition of 2% glucose, 4% sucrose and 5% fructose was 950, 1000 and 948 mL/L, respectively and resulted in increasing hydrogen production approximately 2.5-times more than controlled condition. The macimum hydrogen production was obtained when 50mM phosphate was added. was obtained when 50mM phosphate was added. In repeated0batch culture, yeast extract, but the production amount was not changed on the condition of over 0.5%, Most of the organic acides produced during the fermentation were formic and acetic acid, and propionic acid was moiety also generated.
Brown algal extracts have long been used as feed supplements to promote health of farm animals. Here, we show new molecular insights in to the mechanism of action of a fucose containing polymer (FCP) rich fraction from the brown seaweed Ascophyllum nodosum using the Caenorhabditis elegans-Pseudomonas aeruginosa PA14 infection model. FCP enhanced survival of C. elegans against pathogen stress, correlated with up-regulation of key immune response genes such as: lipases, lysozyme (lys-1), saponin-like protein (spp-1), thaumatin-like protein (tlp-1), matridin SK domain protein (msk-1), antibacterial protein (abf-1), and lectin family protein (lfp). Further, FCP caused down regulation of P. aeruginosa quorum sensing genes: (lasI, lasR, rhlI, and rhlR), secreted virulence factors (lipase, proteases, and elastases) and toxic metabolites (pyocyanin, hydrogen cyanide, and siderophore). Biofilm formation and motility of pathogenic bacteria were also greatly attenuated when the culture media were treated with FCP. Interestingly, FCP failed to mitigate the pathogen stress in skn-1, daf-2, and pmk-1 mutants of C. elegans. This indicated that, FCP treatment acted on the regulation of fundamental innate immune pathways, which are conserved across the majority of organisms including humans. This study suggests the possible use of FCP, a seaweed component, as a functional food source for healthy living.
Seedling damping-off and bottom rot caused by Rhizoctonia solani are yield limiting diseases of crisphead lettuce. To provide biocontrol measure in the management of the diseases, biocontrol strain Pseudomonas aeruginosa LY-11 was isolated from lettuce rhizosphere and introduced into crisphead lettuce rhizosphere by the seed coating delivery method. Alginate was used as a coating material to generate beads containing $10^6-10^{6.5}$ colony-forming units (CFUs) of viable bacterial cells of LY-11. When seeds germinated from the alginate beads containing the strain LY-11, the bacteria established mostly in plant rhizosphere to maintain at least $10^4$ CFU per gram of plant tissues. Crisphead lettuce seedlings germinated from the entrapped seeds were less affected from damping-off and bottom rot with disease control values of 70.4% and 85.4% respectively. Although P. aeruginosa LY-11 colonized plant rhizosphere and not phyllosphere, the result indicated that bottom rot caused by the foliar inoculation of R. solani was effectively reduced by the rhizobacteria. All data suggested that immobilized rhizobacterial application in seeds by alginate coating could control damping-off and induce induced systemic resistance of crisphead lettuce to reduce bottom rot.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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