Raquel, Helena;Lourenco, Tiago;Moita, Catarina;Oliveira, M. Margarida
Plant Biotechnology Reports
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v.2
no.1
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pp.75-85
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2008
Prune dwarf virus (PDV) is an Ilarvirus systemically infecting almond trees and other Prunus species and spreading through pollen, among other means. We have studied strategies based on coat protein (cp) gene to block PDV replication in host plant cells. A Portuguese isolate of PDV was obtained from infected almond leaves and used to produce the cDNA of the cp gene. Various constructs were prepared based on this sequence, aiming for the transgenic expression of the original or modified PDV coat protein (cpPDVSense and cpPDVMutated) or for the expression of cpPDV RNA (cpPDVAntisense and cpPDVwithout start codon). All constructs were tested in a PDV host model, Nicotiana benthamiana, and extensive molecular characterization and controlled infections were performed on transformants and their progenies. Transgenic plants expressing the coat protein RNA were able to block the proliferation of a PDV isolate sharing only 91% homology with the isolate used for cpPDV cloning, as evaluated by DAS-ELISA on newly developed leaves. With cp expression, the blockage of PDV proliferation in newly developed leaves was only achieved with the construct cpPDV Mutated, where the coat protein has a substitution in the 14th aa residue, with arginine replaced by alanine. This result points to a possible role of the mutated amino acid in the virus ability to replicate and proliferate. This work reveals the possibility of achieving protection against PDV through either coat protein RNA or mutated cp sequence.
A protein isolate was prepared from black soybean (Glycine max L. Merrill) that possessed higher antioxidant activity than ordinary white soy protein isolates. The isolate was partially hydrolyzed by alcalase to reduce the allergenicity of black soybean. Alcalase remarkably reduced the molecular mass of the major soybean allergens that have molecular weights of 53, 38, and 24 kDa. Hydrolytic breakdown occurred more effectively in Gly m Bd 30K than in Gly m Bd 60K or Gly m Bd 28K. Alcalase hydrolysis increased the solubility and hydrophobicity of the black soybean protein isolate. The foaming activity and stability of black soybean proteins were highly increased by the partial hydrolysis.
A potyvirus causing chlorotic mottle and yellow spots on leaves of Dianthus barbatus was isolated and identified as an isolate of Carnation vein mottle virus (CVMV). Purified preparations of Chenopodium quinoa infected with CVMV-K showed filamentous particles between 695 and 785 om long. Many cytoplasmic inclusions were observed, and these consisted of pinwheels, dense bands, loops, and circles. The coat protein of CVMV-K was about 32 KDa in western blot analysis using a CVMV antibody. The nucleotide sequence of coat protein gene showed 97.6% homology with a Japanese isolate. The genome size of CVMV-K was about 9.0 kb by dsRNA analysis. These results indicate that the virus is an isolate of CVMV. This is the first report on CVMV in Korea.
In this study the rheological properties of Jeung-pyun prepared with soybean protein isolate (SPI) were investigated. SPI Jeung-pyun samples were manufactured with 3% whole protein, 7S protein, or 11S protein (w/w). In terms of moisture content the Jeung-pyun samples prepared with soybean flour had greater moisture contents than the control group. With the addition of SPI water binding capacity solubility and swelling power increased. Dough pH decreased during the fermentation, but increased after steaming and the SPI Jeung-pyun samples presented higher pH levels han the control group. Foaming ability was significantly strong in the 7S, 11S and whole protein groups. The surface structures of the 7S, 11S and whole protein Jeung-pyun samples displayed small uniform pores when examined by SEM. Overall, the results suggest that SPI can contribute to quality improvements in Jeung-pyun through effects on dough fermentation.
An obligate methanol-oxidizing bacterium, Methylobacillus sp. strain SK1, which grows only on methanol was isolated from soil. The isolate was nonmotile Gram-negtive rod. It does not have internal membrane system. The colonies were small, whitish-yellow, and smooth. The guanine plus cytosine content of the DNA was 48 mol%. Cellular fatty acids consisted predominantly of large amounts of straight-chain saturated $C_{16:0}$ acid and unsaturated $C_{16:1}$ acid. The major ubiquinone was Q-8, and Q-10 was present as minor component. The cell was obligately aerobic and exhibited catalase, but no oxidase, activity. Poly-.betha.-hydroxybutyrate, endospores, or cysts were not observed. the isolate could grow only on methanol in mineral medium. Growth factors were not required. The isolate was unable to use methane, formaldehyde, formate, methylamine, and several other organic compounds tested as a sole source of carbon and energy. Growth was optimal at 35.deg.C and pH 7.5. It could not grow at 42.deg.C. The doubling time was 1.2h at 30.deg.C when grown with 1.0%(v/v) methanol. The growth was not affected by antibiotics inhibiting cell wall synthesis and carbon monoxide but was completely suppressed by those inhibiting protein synthesis. Methanol was found to be assimilated through the ribulose monophosphate pathway. Cytochromes of b-, c-, and o- types were found. Cell-free extracts contained a phenazine methosulfate-linked methanol dehydrogenase activity, which required ammonium ions as an activator. Cells harvested after the late exponential phase seemed to contain blue protein.ein.
Soy protein isolate (SPI)-based nanocomposite films with three different types of nanoclays, such as Cloisite $Na^+$, Cloisite 20A, and Cloisite 30B, were prepared using a solution casting method, and their optical, tensile, and water vapor barrier properties were determined to investigate the effect of nano-clay type on film properties. Among the tested nanoclays, Cloisite $Na^+$, a hydrophilic montmorillonite (MMT), exhibited the highest transparency with least opaqueness, the highest tensile strength, and the highest water vapor barrier properties, indicating Cloisite $Na^+$ is the most compatible with SPI polymer matrix to form nanocomposite films. The film properties of SPI/Cloisite $Na^+$ nanocomposite films were strongly dependent on the concentration of the clay. Film properties such as optical, tensile, and water vapor barrier properties improved significantly (p<0.05) as the concentration of clay increased. However, the effectiveness of addition of the clay reduced above a certain level (i.e., 5wt%), indicating that there is an optimum amount of clay addition to exploit the full advantage of nanocmposite films.
Cheese analogs using lipoxygenase-defected soymilk and ${\alpha}$-chymotrypsin modified soy protein isolate (SPI) were prepared. Color, textural properties, sensory attributes and melting spreadability of cheese analogs were evaluated and compared with mozzarella cheese, and relationships between textural properties, sensory attributes and melting spreadability of cheese analogs were analyzed. Off-flavors were not mostly discriminated. Cheese analogs containing 10% SPI untreated and containing 6% and 8% SPI treated by ${\alpha}$-chymotrypsin in ${\Delta}E$ value of color were the most similar to mozzarella cheese. Quality characteristics and melting spreadability of cheese analogs were highly affected and improved by ${\alpha}$-chymotrypsin modification. Sensory attributes and melting spreadability of cheese analogs containing 6% SPI treated by ${\alpha}$-chymotrypsin were the most similar to mozzarella cheese, while in textural properties, cheese analogs containing 10% SPI were the most similar with mozzarella cheese. Hardness in sensory attributes was highly positively correlated with hardness (r>0.65), adhesiveness (r>0.56), chewiness (r>0.77) and gumminess (r>0.76) in textural properties, while it was highly negatively correlated with melting spreadability (r>-0.68).
Newcastle disease virus (NDV) is the causative agent of a highly contagious and devastating Newcastle disease of poultry. A NDV (isolate DK1/07) was isolated from apparently healthy wild spot-billed ducks (Anas poecilorhyncha) captured at upper branch of the SapGyo Creek in Chungbuk province, Korea during early 2007. The DK1/07 isolate of minimum chicken embryo lethal dose killed all SPF chicken embryos within 60 h. The cleavage site of the F protein possessed the amino acid sequence $^{112}R-R-Q-K-R-F^{117}$, which is a motif characteristic of virulent NDV strains. The F protein-based phylogenetic analysis revealed that the DK1/07 duck isolate was included in the cluster of genotype VIId and most closely related to recent NDV isolates obtained from chicken farms in Korea. Epidemiological importance of virulent NDV from wild duck is discussed.
The effects of soybean oil and cyclodextrin were studied on the quality characteristics and storage of frozen soy yogurt prepared from proteolytic soy protein isolate. The viscosity and overrun of frozen soy yogurt were improved by the addition of soybean oil and cyclodextrin. Upon the addition of cyclodextrin, there was a decrease in the peroxide value of yogurt with subsequent increase by the addition of soybean oil during frozen storage. During the process of storage, there was an increase in the acetone and diacetyl contents, but methanol, ethanol and butanol contents decreased. However, the value of hexanal content was not consistent in the obtained results. Sensory characteristics of frozen soy yogurt such as mouth feel, and overall quality were improved by the addition of cyclodextrin and remained the same frozen storage at $-20^{\circ}C$ for 30 days.
The Gelidium corneum (GC)-whey protein isolate (WPI) blend film containing grapefruit seed extract (GSE) was prepared by incorporating different amounts (0, 0.02, 0.04, 0.08, 0.1%) of GSE into the film. The film's tensile strength (TS) and water vapor permeability (WVP) were improved by the addition of GSE. The film containing 0.1% GSE had a TS of 3.27 MPa, whereas the control had 2.64 MPa. WVP of the film was also significantly decreased by the addition of GSE. Addition of 0.1% GSE decreased the populations of Escherichia coli O157:H7, Listeria monocytogenes, and Salmonella Typhimurium by 1.0, 1.6, and 0.6 log CFU/g, respectively, compared to the control. Fish paste was packed with the GC-WPI blend film containing GSE, and microbial change in the fish paste inoculated with E. coli O157:H7, L. monocytogenes, and S. Typhimurium during storage was examined. Populations of E. coli O157:H7, L. monocytogenes, and S. Typhimurium were decreased by 0.60, 0.48, and 0.85 log CFU/g, after 7 day of storage, respectively. These results suggest packaging fish paste in the GC-WPI blend film containing GSE can extend the shelf life.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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