• 농업과학연구
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• 제25권1호
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• pp.107-117
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• 1998

특수 가금육인 꿩고기의 이용성을 높이고 가공에 대한 기초자료를 얻기 위하여 꿩고기에 단백분해 효소를 작용시켜 추출물을 제조할 때 추출온도, 시간 및 사용한 효소의 첨가량에 따라 추출물의 조단백질 함량, 아미노태 질소 함량, 가수분해율 및 수율, 아미노산 조성 등을 분석하였다. 꿩고기 추출물 제조시 $130^{\circ}C$에서 추출한 조단백질의 함량은 $100^{\circ}C$에서 추출한 것보다 현저히 증가하였으나 아미노태 질소의 함량은 별 차이가 없었다. 꿩고기에 단백질분해 효소인 protease NP, prozyme A를 처리하면 조단백질의 함량 및 아미노태 질소 함량이 상당히 높아 졌으며 protease NP가 더욱더 실용적이었다. 꿩고기로부터 얻어지는 추출물의 수율은 $100^{\circ}C$에서 처리한 것은 2.24~7.10%, $130^{\circ}C$에서 5.51~10.45%이었으며, 추출 시간 및 효소 첨가량에 의한 영향은 비교적 적었다. 꿩고기의 추출 수율은 추출온도, 효소의 종류, 효소 첨가량, 추출시간의 순으로 영향을 미쳤다. 아미노태 질소 함량은 효소 처리한 것이 가장 높았으며, 효소 첨가량, 추출시간, 추출온도의 순으로 영향을 미쳤으나 처리간 함량의 변화는 적었다 꿩고기 추출물의 유리 아미노산 함량은 protease NP로 처리하는 것이 $100^{\circ}C$ 또는 $130^{\circ}C$에서 가열 처리하는 것보다 현저히 높았다.

• 세라미스트
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• 제21권3호
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• pp.204-215
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• 2018

Proteases are one of the most abundant classes of enzymes in living organisms and have been considered major targets for drug development. However, despite the ability to specifically cleave their substrates, many attempts to assay protease activity have generally relied upon the use of gel zymography or fluorophore-labeled peptide substrates, which is limited in rapid and multiplex analysis. Here we review the recent advances in nanoparticle (NP)-utilized assays of protease activity focused on in vitro and cell imaging-based approaches. Owing to large surface area and unprecedented physical properties of NPs, these approaches are anticipated to facilitate many applications related to protease activity-based disease diagnosis and drug discovery.

• 한국응용곤충학회지
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• 제27권4호
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• pp.211-218
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• 1988

담배거세미나방(Spodoptera litura: SI), 누에(Bombyx mori: Bm) 및 흰불나방(Hyphantria cunea : Hc)으로부터 분리된 핵다각체병 바이러스(nuclear polyhedrosis virus : NPV)의 다각체의 단백질의 특성과 그에 대한 alkaline protease의 영향을 SDS-PAGE 및 혈정학적 방법으로 분석했다. Alkaline protease를 부활화시킨 후 다가체 단백질을 SDS-PAGE한 결과, BmNPV의 경우 30kD, SINPV와 HcNPV는 31kD의 단일 major band 및 이것들의 종합체(polymer)인 57kD와 66kD의 minor band들이 관찰되었다. Alkaline protease의 부활화를 성략한 SI NPV 다각체를 알칼리 용액으로 시간 차이를 두고 처리한 후 SDS-PAGE한 결고, 알칼리 처리시간이 경과함에 따라서 alkaline protease활성에 의해 다각체 단백질이 일정한 pattern으로 저분자화됨이 뚜렷하였다. SINPV 와 BmNPV 다각체 단백질의 항체를 제조하여 SINPV, BmNPV및 HcNPV 다각체 단백질간의 혈정학적 상동성을 이중형역광산법과 Western blot으로 비교한 결과는 3종 모두에서 공통 antigenic determinants의 존재가 인정되었으며 major 다각체 단백질의 종합체 형성과 alkaline protease에 의한 분해를 확인했다.

• 한국식품과학회지
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• 제34권4호
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• pp.570-576
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• 2002

골뱅이의 가공 부산물인 내장의 효율적인 이용을 위해 골뱅이 내장을 마쇄한 후, 염을 25% 첨가하고 단백질 가수분해효소로서 상업용으로 많이 이용되는 Flavourzyme, Neutrase, Protease NP Prozyme을 각각 0.05, 0.1% 첨가하여 $10^{\circ}C$에서 6개월 동안 숙성하여 특성을 관찰하였다. 상업용 효소를 첨가한 모든 골뱅이 내장젓갈에서 숙성 30일까지 급격하게 감소하며, 숙성기간이 증가할수록 약간의 pH가 증가하였으며 숙성 150일에서 pH가 약간 감소하여 숙성기간 180일에서는 pH $6.1{\sim}6.4$까지 다시 증가하는 경향을 나타내었다. 특히, Flavourzyme 첨가구가 다른 효소 첨가구에 비해 pH 변화의 증감이 큰 편이며, Prozyme 첨가구는 이와는 달리, 점차적으로 pH의 감소경향을 나타내었다. 아미노 질소 변화는 효소 첨가량에 비례하여 증가하였으며, 최대 아미노 질소는 Flavourzyme 0.1% 첨가구가 646 mg%를 나타내었다. 총질소 함량은 숙성기간 120일까지는 계속적인 증가를 보였으며, 숙성 120일부터 180일까지 다시 급격하게 감소하는 경향을 보였으며, 효소에 따른 총질소 함량의 증감이 상이하게 관찰되었다. SDS-PAGE에 의한 골뱅이 내장젓갈의 분해결과는 모든 효소 첨가구에서 높은 염함량에도 불구하고 숙성기간의 증가에 따라 점차적으로 분해되는 것을 보였지만, 효소 첨가량에 따라서는 뚜렷한 변화가 관찰되지 않았다. 또한, 골뱅이 내장젓갈을 6개월간 숙성한 후, 시판되고 있는 2종류의 액젓과 색도를 비교하여 골뱅이 내장 젓갈이 L값이 2배 이상 높았고, a값과 b값은 거의 유사하게 측정되었다.

• 한국식품과학회지
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• 제40권2호
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• pp.190-193
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• 2008

소간추출물은 각종 간질환에 해독효과를 가진 것으로 알려져있다. 항독성 소간추출물의 대량생산 공정을 개발하고자 효소의 선발 및 가수분해의 최적조건을 탐색하였고, 확립된 분해조건으로 항독성 소간추출물의 시제품을 제조하여 일반성분, 미생물, 그리고 비타민 $B_{12}$함량을 분석하였다. Bromelain, papain, ficin, pancreatin, 그리고 protease NP등의 효소 중 추출물의 건물량과아미노태 질소의 수율이 양호하고 경제성이 뛰어난 papain을 최적효소로 선발하였다. Papain(1%)을 소간 분쇄물에 첨가하여 65$^{\circ}C$에서 24시간 동안 가수분해하는 조건을 확립하였다. 분무건조한 항독성 소간추출물의 시제품은 원료 간 대비 11%의 수율을 보였고 건물량은 95%, 총질소 함량은 11.8%이었다. 또한 병원성 미생물은 검출되지 않았고 비타민 $B_{12}$ 함량은 4.1 ${\mu}$g/g이었다. 본 연구에서 확립한 가수분해조건은 높은 수율의 항독성 소간추출물 생산에 적용할 수 있을 것으로 생각한다.

• 미생물학회지
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• 제30권6호
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• pp.528-532
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• 1992

계면 활성제 특히 Triton X-100 의 첨가에 의해 ATP-의존성 효소의 subunit 인 Clp P 의 안정도를 높히고, 염의 첨가에 의한 효소 활성의 유지 정도와 Clp P 호소에 대한 생화학적 성질을 조사하였다. Clp A 가 가지고 있는 ATPase 활성을 나타내기 위하여서는 Clp P 의 단백질 분해 효소활성이 요구되며 Clp 효소의 다량체형성을 조사한 결과 ATP 가 존재하지 않을 경우에는 Clp A 와 Clp P 효소가 각각 용출하였으며 ATP 및 Mg 를 첨가하였을 때에는 complex 를 형성하여 분자량이 600,000 이상으로서 Clp P 효소는 Hexamer 로서 효소활성을 나타내며 Clp A 와 Clp P 의 다량체 형성이 요구되고 형성시에 ATP 가 관여하고 있는 것으로 나타났다.

• BMB Reports
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• 제44권10호
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• pp.665-668
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• 2011

In order to clarify the impact of Ca-binding sites (Ca1 and 2) on the conformational stability of neutral proteases (NPs), we have analyzed the thermal, pH and organic solvent stability of a NP variant, V189P/A195E/G203D/A268E (Q-mutant), from Salinovibrio proteolyticus. This mutant has shown to bind calcium more tightly than the wild-type (WT) at Ca1 and to possess Ca2. Q-mutant was resisted against autolysis, thermoinactivation and pH denaturation in a Ca-dependent manner and exhibited better activity in organic solvents compared to the WT enzyme. These results imply that Ca1 and Ca2 are important for the conformational stability of NPs.