목 적: 본 연구는 연구자로 하여금 [잔여배아보관실적대장]과 [잔여배아제공실적대장]을 명확하게 작성토록 하고 관리자 및 감독자로 하여금 이를 합리적이고 통일된 관리 및 점검을 할 수 있도록 하기 위한 방법을 찾고자 한 것이었다. 연구방법: 1994년부터 2004년까지 44호 기관에 보관되어 있는 자료들을 근거로 연도별 [배아의 생성 및 이용에 관한 해당연도 현황], [연도별 잔여배아의 냉동보관과 해당연도 해동현황], [냉동배아의 해동 및 이용에 관한 해당연도 현황], [냉동배아의 제공 및 인수에 관한 해당연도 현황], [해당연도 냉동배아폐기대장], [냉동배아의 관리 및 이용에 관한 해당연도총괄대장]을 도안하고 작성하였다. 결 과: 1994년부터 2004년까지 연도별 [44호 배아의 생성 및 이용에 관한 해당연도 현황], [44호 연도별 잔여배아의 냉동보관과 해당연도 해동현황], [44호 냉동배아의 해동 및 이용에 관한 해당연도 현황], [44호 냉동배아의 제공 및 인수에 관한 해당연도 현황], [44호 해당연도 냉동배아폐기대장], [44호 냉동배아의 관리 및 이용에 관한 해당연도 총괄대장]을 구축하였던 바 해당항목들이 상호일치하고 있었다. 결 론: 본 연구에서 얻어진 결과들은 연도별 [해당기관 해당연도 잔여배아보관실적대장]과 [해당기관 해당연도 잔여배아제공실적대장]을 작성하는 기초자료로서 뿐만 아니라 [배아생성의료기관에 보관해야 할 참고문서]로도 충분하다고 사료된다.
Garole is a prolific, rare, less known and small size Indian sheep breed found in low and humid Sunderban region of West Bengal. Although information on stored Garole ram liquid semen upto 24 h is available, but there is a need to further investigate the short-term and long-term preservability of Garole ram semen for extensive utilization of this valuable germplasm by artificial insemination. The aim of the present study was to apply computer-assisted sperm analysis technique for assessing the motion characteristics of Garole ram semen stored (i) in liquid state at refrigeration temperature for short-term preservation upto 48 h and (ii) in frozen state at $-196^{\circ}C$ for long-term preservation after packaging in mini straws. Short-term preservation had a significant effect on motility (p<0.01) as the motility progressively decreased from 90.1% at 0 h to 85.5% and 73.2% after 24 and 48 h of storage, respectively. Although the decline in rapid moving sperms was also significant (p<0.01) on storage but the decrease was more pronounced at 48 h as compared to 24 h of storage period. Storage of chilled semen had also a significant effect on % linearity (p<0.05), % straightness (p<0.01), sperm velocities (p<0.01), amplitude of lateral head displacement (p<0.01) and beat frequency (pO.Ol) of spermatozoa. The replication had a significant effect for all the variables except average path and straight line velocity. However, the interactions of short-term storage and replication were non-significant for most of the variables except % of medium moving sperms, sperm velocities and beat frequency. On long-term preservation of Garole ram spermatozoa under controlled conditions the mean post-thaw recovery of 70.4 and 71.4% motile spermatozoa was achieved having 48.8 and 48.9% of rapidly motile spermatozoa, respectively in both the replicates. The effect of replication on cryopreservation was significant (p<0.05) on amplitude of lateral head displacement and beat frequency, but there was no significant effect on motility, rapidly motile spermatozoa, linearity, straightness and sperm velocities of frozen-thawed spermatozoa. It can be concluded from these results that an average 70% motility can be achieved on storage of Garole ram semen in chilled liquid state upto 48 h or in liquid nitrogen after freezing under controlled conditions in straws. However, further studies are required to evaluate the fertility of short-term and long-term preserved Garole ram semen for extensive use of this prolific sheep breed.
The ovarian follicles develop initially from primordial follicles. The majority of ovarian primordial follicles are maintained quiescently as a reserve for the reproductive life span. Only a few of them are activated and develop to an advanced follicular stage. The maintenance of dormancy and activation of primordial follicles are controlled by coordinated actions of a suppressor/activator with close communications with somatic cells and intra-oocyte signaling pathways. Many growth factors and signaling pathways have been identified and the transforming growth factor-beta superfamily plays important roles in early folliculogenesis. However, the mechanism of maintaining the dormancy and survival of primordial follicles has remained unknown for decades. Recently, since the first finding that all primordial follicles are activated prematurely in mice deficient forkhead box O3a, phosphatidylinositol 3 kinase/phosphatase and tensin homolog (PTEN) signaling pathway was reported to be important in the regulation of dormancy and initial follicular activation. With these informations on early folliculogenesis, clinical application can be expected such as in vitro maturation of immature oocytes or in vitro activation of follicles by PTEN inhibitor in cryopreserved ovarian cortical tissues for fertility preservation.
목적: 유리화 동결액의 조성조절과 냉각속도 증진을 통한 동결보호제의 농도를 낮추는 전략을 통해 세포에 미치는 독성을 감소시켜 유리화 동결 및 융해 후 생쥐 배아의 생존율 및 발생률을 증진시키고, 궁극적으로 배아의 유리화 동결법을 개선하고자 하였다. 연구방법: 생쥐 배아와 포배기를 그리드를 이용한 유리화 동결법을 이용하여 동결/융해하였다. 동결액 내 ethylene glycol와 dimethylsulphoxide (DMSO)의 농도와 당의 농도를 조절하여 생쥐 배아의 융해 후 생존율과 발생률을 관찰하였고, 냉각속도의 증가와 동결억제제의 농도와의 상관관계를 포배기의 융해 후 생존율과 발생률에 따라 비교하였다. 또한 융해 후 배아를 대리모에 이식하여 산자를 생산함으로 냉각속도의 효율성을 알아보았다. 결과: EG를 단독으로 사용한 동결보존액 보다는 DMSO와 혼합된 동결보존액의 사용이 보다 유리하다는 결과를 얻을 수 있었다. 슬러시 질소에 의한 냉각속도의 증가가 동결보존의 대상의 상해를 줄여 유리화 동결의 효율성을 증진시키는 것으로 생각된다. 결론: 혼합된 동결보호제를 사용하였을 때 생쥐 배아의 유리화 동결 후 생존과 발생률이 증진되었다. 슬러시 질소를 이용한 유리화 동결의 도입은 냉각속도의 증가를 통해 기존 유리화 동결방법의 효율을 증진시켜 생존율과 융해후 발생률, 임신율 증진에 기여하였다. 또한 냉각속도의 증진은 유리화 동결의 필수요건인 고농도의 동결억제제에 대한 노출을 감소시킬 수 있었다. 이러한 노력은 생식력의 보전을 위한 유리화 동결법의 효율 향상에 기여할 것이다.
Verit, Fatma Ferda;Cetin, Orkun;Keskin, Seda;Akyol, Hurkan;Zebitay, Ali Galip
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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제46권1호
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pp.30-35
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2019
Objective: Bilateral uterine artery ligation (UAL) is a fertility-preserving procedure used in women experiencing postpartum hemorrhage (PPH). However, the long-term effects of this procedure on ovarian function remain unclear. The aim of this study was to investigate whether bilateral UAL compromised ovarian reserve and ovarian blood supply. Methods: This prospective study included 49 women aged between 21 and 36 years who had undergone a cesarean section for obstetric indications. Of these, 25 underwent uterine bilateral UAL to control intractable atonic PPH. The control group consisted of 24 women who had not undergone bilateral UAL. Standard clinical parameters, the results of color Doppler screening, and ovarian reserve markers were assessed in all participants at 6 months after surgery. The clinical parameters included age, parity, cycle history, body mass index, and previous medication and/or surgery. Color Doppler screening findings included the pulsatility index (PI) and resistance index (RI) for both the uterine and ovarian arteries. The ovarian reserve markers included day 3 follicle-stimulating hormone (FSH) levels, antral follicle count, and $anti-M\ddot{u}llerian$ hormone (AMH) levels. Results: There were no significant differences in the ovarian reserve markers of day 3 FSH levels, antral follicle count, and AMH levels between the study and control groups (p> 0.05 for all). In addition, no significant differences were observed in the PI and RI indices of the uterine and ovarian arteries (p> 0.05 for all). Conclusion: In this study, we showed that bilateral UAL had no negative effects on ovarian reserve or ovarian blood supply, so this treatment should be used as a fertility preservation technique to avoid hysterectomy in patients experiencing PPH.
Onco-testicular sperm extraction is used to preserve fertility in patients with bilateral testicular tumors and azoospermia. We report the case of a testicular tumor in the solitary testis of a patient who had previously undergone successful contralateral orchiectomy and whose sperm was preserved by onco-testicular sperm extraction. A 35-year-old patient presented with swelling of his right scrotum that had lasted for 1 month. His medical history included a contralateral orchiectomy during childhood. Ultrasonography revealed a mosaic echoic area in his scrotum, suggesting a testicular tumor. The lesion was palpated within the normal testicular tissue along its edge and semen analysis showed azoospermia. Radical inguinal orchiectomy and onco-testicular sperm extraction were performed simultaneously. Motile spermatozoa were extracted from normal seminiferous tubules under microscopy and were frozen. Eventual intracytoplasmic sperm injection using the frozen spermatozoa is planned. Onco-testicular sperm extraction is an important fertility preservation method in patients with bilateral testicular tumors or a history of a previous contralateral orchiectomy.
The objective of this study was to establish an in vitro culture system for ovarian preantral follicles of B6D2F1. First, we optimized the in vitro preantral-follicle culture by culture duration, follicle stimulating hormone (FSH) type, and activin A concentration. Duration of in vitro culture for 9, 11, and 13 days was sufficient for the normal development of preantral follicles to antral follicles. Formation of cumulus cell-oocyte complex (COC) was induced by treatment with human chorionic gonadotropin (hCG; 2.5 IU/mL) and epidermal growth factor (EGF; 5 ng/mL). In addition, metaphase II (MII) oocytes formed during this in vitro culture of preantral follicles. In vitro preantralfollicle culture for 9 days showed higher rates of growth and maturation, thus yielding a greater number of antral follicles, and there were significant differences (p < 0.05) in the number of MII oocytes (that formed from these preantral follicles via differentiation) between the 9-day culture and 11-day or 13-day culture. The follicles cultured for 9 days contained a tightly packed well-defined COC, whereas in follicles cultured for 11 days, the COC was not well defined (spreading was observed in the culture dish); the follicles cultured for 13 days disintegrated and released the oocyte. Second, we compared the growth of the preantral follicles in vitro in the presence of various FSH types. There were no significant differences in the growth and maturation rates and in differentiation into MII oocytes during in vitro culture between preantral follicles supplemented with FSH from Merck and those supplemented with FSH from Sigma. To increase the efficiency of MII oocyte formation, the preantral follicles were cultured at different activin A concentrations (0 to 200 ng/mL). The control follicles, which were not treated with activin A, showed the highest rate of differentiation into antral follicles and into MII oocytes among all the groups (0 to 200 ng/mL). Therefore, activin A (50 to 200 ng/mL) had a negative effect on oocyte maturation. Thus, in this study, we propose an in vitro system of preantral-follicle culture that can serve as a therapeutic strategy for fertility preservation of human oocytes for assisted reproductive medicine, for conservation of endangered species, and for creation of superior breeds.
The study was performed to investigate the effects of gaseous imission of sulfur dioxide and hydrogen fluoride on the growth of rice plant under stressed field conditions. The plants were cultivated in normal paddy fields where are 88 industrial plants operating with 285 smoke stacks emitting pollutants. There has been a number of reported studies (1, 3, 11, 19, 20) which deal with rice plant damages by air pollution under a simulated exposure experimental condition. Furthermore, these experiments were conducted to examine effects of a single pollutant on the plant. Furthermore, these experiments were conducted to examine effects of a single pollutant on the plant. In korea, however, there is no study reported in literature with respect to the in-situ dose-response relationship between rice pant reduction in yields and air pollution. This study is specifically dealt with multiple effects of sulfur dioxde and hydrogen fluoride on various plant growth indicators such as leaf damage, culm height, weight of grain, panicles per hill, spikelets per panicle and percent fertility.It appears that there is a good correlation between ambient concentrations of sulfur oxides and sulfur contents found in leaves with an average correlation coefficient of 0.868 within a 1% significance level. It is interesting to note that a better multiple correlation was found between percent leaf damage and sulfur and fluoride contentd found in leaf with a significance of 1% level. The yearly correlation coefficient ranges from 0.963 to 0.987 with an average being 0.971. It is, therefore, believed that a percent leaf damage may serve as a single indicator of pollutional damages to rice plant cultivating in fields. Regarding other factors to the diminution of rice plant growth in polluted atmosphere, it appears that a significant correlation to culm length and dry weight of grain with a 1% significance level whereas T/R ratio has a good correlation with lead damage within 5% significance level. An evaluation of data observed has demonstrated that both panicles per hill and percent fertility are significantly affected by air pollutants. As expected, hydrogen fluoride has more effects than sulfur oxide. It is, however, interesting to note that spikelets per panicles has slightly been affected while no indication of effects on 1000-grain-weight has been observed. This may lead to a conclusion that a reduction in yield of rice under polluted field conditions may have more been caused by the diminution of panicles per hill and percent fertility rather than by the diminution of spikelets per panicle and grain weight.
Kim, Min Kyung;Kong, Hyun Sun;Youm, Hye Won;Jee, Byung Chul
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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제44권1호
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pp.8-14
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2017
Objective: The aim of this study was to analyze the effect of supplementing vitrification and warming solutions with two types of antifreeze proteins (AFPs) and the combination thereof on the follicular integrity of vitrified-warmed mouse ovaries. Methods: Ovaries (n=154) were obtained from 5-week-old BDF1 female mice (n=77) and vitrified using ethylene glycol and dimethyl sulfoxide with the supplementation of 10 mg/mL of Flavobacterium frigoris ice-binding protein (FfIBP), 10 mg/mL of type III AFP, or the combination thereof. Ovarian sections were examined by light microscopy after hematoxylin and eosin staining, and follicular intactness was assessed as a whole and according to the type of follicle. Apoptosis within the follicles as a whole was detected by a terminal deoxynucleotidyl transferase deoxyuridine triphosphate nick-end labeling assay. Results: The proportion of overall intact follicles was significantly higher in the type III AFP-supplemented group (60.5%) and the combination group (62.9%) than in the non-supplemented controls (43.8%, p<0.05 for each). The proportion of intact primordial follicles was significantly higher in the FfIBP-supplemented (90.0%), type III AFP-supplemented (92.3%), and combination (89.7%) groups than in the non-supplemented control group (46.2%, p<0.05 for each). The proportions of non-apoptotic follicles were similar across the four groups. Conclusion: Supplementation of the vitrification and warming solutions with FfIBP, type III AFP, or the combination thereof was equally beneficial for the preservation of primordial follicles in vitrified mouse ovaries.
Bhakat, M.;Mohanty, T.K.;Raina, V.S.;Gupta, A.K.;Pankaj, P.K.;Mahapatra, R.K.;Sarkar, M.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제24권10호
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pp.1348-1357
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2011
The objective of this study was to compare the effect of Butylated Hydroxy Toluene (BHT), Pentoxifylline (PTX) and ${\alpha}$-tocopherol (Vit E) on semen quality parameters of Karan Fries bulls. The fortification of extender by various semen additives improves motility as well as fertility of spermatozoa. Split samples of 24 ejaculates of four Karan Fries bulls were extended in extender with or without various additives such as BHT, PTX and Vit E, and performance was evaluated at an interval of 0, 24, 48 and 72 h at refrigerated temperature (4-$7^{\circ}C$). Results of the present study revealed that addition of BHT, PTX and Vit E in extender improved sperm cell function, such as motility, viability, HOST, and acrosome integrity, as compared to the control during liquid storage up to 48 h of preservation at refrigerated temperature. There was no significant (p<0.05) difference between any of the additives up to 48 h of preservation. Overall, the results showed a significant (p<0.05) deterioration in motility after each storage interval. The results showed a significant deterioration in the acrosome integrity and plasma membrane integrity up to 48 h; subsequently, there was not much degradation of both the semen quality parameters. There was a significant increase in spermatozoal tail and total abnormality after each storage interval at refrigerator temperature (4 to $7^{\circ}C$); however, the head and mid-piece abnormalities were almost unaffected. Tail and total abnormality were least in extender fortified with BHT, PTX and Vit E at different hours of incubation as compared to the control. The addition of 1.5 mM BHT, 3.6 mM PTX and 1 mg/ml Vit E in the semen extender has more beneficial effect in terms of semen quality and preservability of spermatozoa.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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