For the last couple of decades, the Fenton (-like) systems have been extensively studied for oxidation of organic contaminants in water. Recently, zero-valent iron (ZVI) has received attention as a Fenton catalyst as well as a reducing agent capable of producing reactive oxidants from oxygen. In this study, the ZVI-based Fenton reaction was assessed for the oxidative degradation of phenol using $ZVI/O_2$, $ZVI/H_2O_2$, ZVI/Oxalate/$O_2$ and hv/ZVI/Oxalate/$O_2$ systems. Reaction parameters such as pH and reagent dose (e.g., ZVI, $H_2O_2$, and oxalate) were examined. In the presence of oxalate (ZVI/Oxalate/$O_2$ and hv/ZVI/Oxalate/$O_2$ systems), the degradation of phenol was greatly enhanced at neutral pH values. It was found that ZVI accelerates the Fenton reaction by reducing Fe(III) into Fe(II). The conversion of Fe(III) into Fe(II) by ZVI was more stimulated at acidic pH than at near-neutral pH values.
Rhus verniciflua Stokes (RVS) has been used as a traditional herbal medicine. Several earlier studies indicated that an ethanol extract of RVS has both anti-oxidant and anti-tumor properties, although the mechanism for the activity remains to be elucidated. In this report, we prepared a highly purified ethanol extract from RVS, named REEE-1 ($\underline{R}$hus $\underline{e}$thanol $\underline{e}$luted $\underline{e}$xtract-1), and investigated the mechanism involved in its growth-inhibitory effect on the human B and T lymphoma cell lines, BJAB and Jurkat, respectively. Results from tritium uptake proliferation assays showed that the proliferative capacities of both BJAB and Jurkat cells were strongly suppressed in the presence of REEE-1. This was further confirmed through trypan blue exclusion experiments that revealed a dose-dependent decrease in viable cell numbers after REEE-1 treatment. REEE-1-mediated suppression of cell growth was verified to be apoptotic, based on the increase in DNA fragmentation, low fluorescence intensity in nuclei after propidium iodide staining, and the appearance of DNA laddering. In particular, REEE-1 exerted its anti-oxidant activity through the inhibition of hydroxyl radical-mediated degradation by iron ion chelation rather than direct scavenging of hydroxyl radicals. Furthermore, REEE-1 was revealed to be a potential scavenger of superoxide anions. Collectively, our findings suggest that REEE-1 is a natural anti-oxidant that could be used as a cancer chemo-preventive and therapeutic agent.
Reactive oxygen species (ROS) and nitrogen species (RNS) are implicated in cellular signaling processes and as a cause of oxidative stress. Recent studies indicate that ROS and RNS are important signaling molecules involved in nociceptive transmission. Xanthine oxidase (XO) system is a well-known system for superoxide anions ($O{_2}^{{\cdot}_-}$) generation, and sodium nitroprusside (SNP) is a representative nitric oxide (NO) donor. Patch clamp recording in spinal slices was used to investigate the role of $O{_2}^{{\cdot}_-}$ and NO on substantia gelatinosa (SG) neuronal excitability. Application of xanthine and xanthine oxidase (X/XO) compound induced membrane depolarization. Low concentration SNP ($10{\mu}M$) induced depolarization of the membrane, whereas high concentration SNP (1 mM) evoked membrane hyperpolarization. These responses were significantly decreased by pretreatment with phenyl N-tert-butylnitrone (PBN; nonspecific ROS and RNS scavenger). Addition of thapsigargin to an external calcium free solution for blocking synaptic transmission, led to significantly decreased X/XO-induced responses. Additionally, X/XO and SNP-induced responses were unchanged in the presence of intracellular applied PBN, indicative of the involvement of presynaptic action. Inclusion of GDP-${\beta}$-S or suramin (G protein inhibitors) in the patch pipette decreased SNP-induced responses, whereas it failed to decrease X/XO-induced responses. Pretreatment with n-ethylmaleimide (NEM; thiol-alkylating agent) decreased the effects of SNP, suggesting that these responses were mediated by direct oxidation of channel protein, whereas X/XO-induced responses were unchanged. These data suggested that ROS and RNS play distinct roles in the regulation of the membrane excitability of SG neurons related to the pain transmission.
분자량이 200 또는 400인 poly(ethylene glycol) (PEG 200, PEG 400)을 알칼리 존재하에서 다양한 linking agent (CH$_2$C1$_2$, CH$_2$Br$_2$, CH$_2$I$_2$, Br(CH$_2$)$_3$Br)와 반응시켜 oxyalkylene-linked poly(oxyethylene) 공중합체를 합성하였다. 얻어진 공중합체의 분자량은 alkali/CH$_2$C1$_2$/PEG의 당량비를 달리하여 조절하였으며 PEG 200을 사용하였을 경우 약 500~8500, 그리고 PEG 400을 사용하였을 경우 약 1000~2000정도이었다. 말단의 -OH기 농도 적정에 의한 분자량과 GPC에 의해 얻어진 분자량은 서로 거의 일치하였다. PEG 400으로부터 얻어진 공중합체는 유리전이온도가 약 -75$^{\circ}C$정도였고, 용융온도가 1$0^{\circ}C$정도였으며 결정화도가 0~25% 정도이었다. 또한 PEG 200을 이용하여 합성된 공중합체의 경우는 분자량이 2500이하에서는 완전한 비정형 물질임을 알 수 있었다.
Alpha-lipoic acid is a known hypoglycemic agent that may be useful in the treatment of diabetes. The objective of this study was to investigate the fate of glucose in isolated muscles incubated with lipoic acid by determining its direct effects on specific metabolic and signaling pathways. Soleus muscles from healthy rats were incubated with lipoic acid in the absence or presence of insulin. Glucose transport, glycogen synthesis, glucose oxidation and lipid synthesis were determined and affects on major pathways associated with insulin signaling were evaluated. Glucose transport was not significantly altered by the addition of lipoic acid to the incubation medium. However, lipoic acid decreased glycogen synthesis in comparison to controls. Glucose oxidation was moderately increased while de-novo lipid synthesis from glucose was inhibited. Wortmannin repressed insulin stimulation of glucose incorporation into glycogen, an effect that was augmented by the combined treatment of wortmannin and lipoic acid. Basal and insulin-stimulated serine phosphorylation of Akt was not changed by the addition of lipoic acid to the incubation medium. These data show that in this in vitro model, lipoic acid did not significantly affect glucose uptake but dramatically modified pathways of glucose metabolism within muscle tissue.
The root-knot nematode (Meloidogyne incognita) is an important pathogen in crop cultivation, however, few methods are available to control this parasitic roundworm. In this study, the nematicidal effects of approximately 30 Streptomyces strains isolated from soil samples of Mt. Naejang (Korea) were tested against Meloidogyne incognita, and the culture broth of the strains KRA-24 and KRA-28 exhibited approximately 75% and 85% insecticidal activity, respectively, in in vitro assays. In in vivo pot experiments, these strains reduced the number of nematodes in the soil and the number of egg masses in the roots of red peppers. The two strains also survived in the presence of insecticidal agents (0.1 to 3.0%) such as fosthiazate, ethoprophos and terbufos when they were used in parallel. The mixture of KRA-24 or KRA-28 culture broth and fosthiazate exhibited nematicidal effects that were similar to those observed when KRA-24 or KRA-28 were used alone. Our results clearly suggest that the Streptomyces strains KRA-24 and KRA-28 should be promoted as a biocontrol agent against Meloidogyne incognita.
The promoting effect of hydrogen peroxide ($H_2O_2$) against the cytotoxicity of 1-methyl-4-phenylpyridinium ($MPP^+$) in differentiated PC12 cells was assessed by measuring the effect on the mitochondrial membrane permeability. Treatment of PC12 cells with $MPP^+$ resulted in the nuclear damage, decrease in the mitochondrial transmembrane potential, cytosolic accumulation of cytochrome c, activation of caspase-3, increase in the formation of reactive oxygen species (ROS) and depletion of GSH. Addition of $H_2O_2$ enhanced the $MPP^+-induced$ nuclear damage and cell death. Catalase, Carboxy-PTIO, Mn-TBAP, N-acetylcysteine, cyclosporin A and trifluoperazine inhibited the cytotoxic effect of $MPP^+$ in the presence of $H_2O_2$. Addition of $H_2O_2$ promoted the change in the mitochondrial membrane permeability, ROS formation and decrease in GSH contents due to $MPP^+$ in PC12 cells. The results show that the $H_2O_2$ treatment promotes the cytotoxicity of $MPP^+$ against PC12 cells. $H_2O_2$ may enhance the $MPP^+$-induced viability loss in PC12 cells by promoting the mitochondrial membrane permeability change, release of cytochrome c and subsequent activation of caspase-3, which is associated with the increased formation of ROS and depletion of GSH. The findings suggest that $H_2O_2$ as a promoting agent for the formation of mitochondrial permeability transition may enhance the neuronal cell injury caused by neurotoxins.
Poly-L-lysine (PLL) was reported to suppress mucin release from airway goblet cells during 30 min treatment period. In this study, we investigated whether PLL consistently suppresses mucin release from cultured airway goblet cells during 24 h after 30 min treatment and also specifically suppresses the release of mucin without any effects on the other releasable glycoproteins. Confluent primary hamster tracheal surface epithelial (HTSE) cells were metabolically radiolabeled with $^3H$-glucosamine for 24 h and chased for 30 min in the presence of varying concentrations of PLL to assess the effects on $^3H$-mucin release and on the total elution profile of the treated culture medium. The total mucin content during 24 h after 30 min treatment of PLL was assesed to investigate the consistency of effects. PLL did not affect the release of the other releasable glycoproteins whose molecular weights were less than mucin, and decreased the total mucin content during 24 h after 30 min treatment. We conclude that PLL can specifically suppress mucin release from cultured airway goblet cells and the suppression on mucin release is consistent. This finding suggests that PLL might be used as a specific airway mucin-regulating agent by directly acting on airway mucin-secreting cells.
This study was conducted to evaluate the effects of Glycyrrhizae Radix water extract, known as depigmenting agent, on melanin biosynthesis in the HM3KO human melanoma cells. The inhibitory effect of Glycyrrhizae Radix water extract on melanogenesis was identified by mushroom tyrosinase assay in vitro. To determine whether Glycyrrhizae Radix water extract suppress melanin synthesis in cellular level, HM3KO cells were cultured in the presence of different concentrations of Glycyrrhizae Radix water extract and the effects on cell proliferation, melanin contents and tyrosinase activity were examined after 3 days. Treatment with Glycyrrhizae Radix at various concentrations did not exhibit any change of cell viability, and increased the cell proliferation. And the water extract of Glycyrrhizae Radix inhibited melanin contents and tyrosinase activity in a dose-dependent manner, compared with untreated group. These results suggest that the inhibitory effect of Glycyrrhizae Radix water extract on melanogenesis is due to the suppression of tyrosinase in HM3KO cells.
The purpose of this study was to investigate the effects of Fructus Ligustri Lucidi (FLL) on the process of melanogenesis. Cell viability of B16F10 cells was measured by MTT assay and melanin content was assessed using the method of Hosoi with some modifications. Methanol extract of Fructus Ligustri Lucidi (MFLL) significantly inhibited melanin synthesis in a concentration-dependent manner, and it reduced the activity of tyrosinase, the rate-limiting melanogenic enzyme. Additionally, $\alpha$-melanocyte stimulation hormone ($\alpha$-MSH)-induced hyperpigmentation was down-regulated by MFLL. MFLL was fractionated by organic solvent. In the present study, Hexane extract of Fructus Ligustri Lucidi (HFLL) inhibited tyrosinase activity and melanin production of B16F10 cells in the absence or presence of $\alpha$-MSH. Ethyl acetate, butanol and water layers did not affect tyrosinase activity and melanin production. Meanwhile ethyl acetate, butanol and water layers showed DPPH free radical scavenging activity. These results suggest that extract of FLL could be used as functional biomaterial in developing a skin whitening agent having the antioxidant activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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