• 제목/요약/키워드: Preparative separation

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Avantor® ACE® UltraCore HPLC/UHPLC 칼럼 가이드 (Avantor® ACE® UltraCore HPLC and UHPLC Columns)

  • Peter Bridge;Ian Phillips;Gemma Lo;Cassandra Rusher
    • FOCUS: LIFE SCIENCE
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    • 제1호
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    • pp.4.1-4.15
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    • 2024
  • The Avantor® ACE® UltraCore series encompasses High Performance Liquid Chromatography (HPLC) and Ultra High Performance Liquid Chromatography (UHPLC) columns designed to deliver high throughput and high-efficiency ultra-fast separations. Utilizing ultra-inert solid-core silica particles with monodisperse particle distribution, these columns combine the high efficiency of UHPLC with the operability of HPLC instrumentation, yielding lower backpressure and high-resolution separations suitable for a broad spectrum of analytes. The Avantor® ACE® UltraCore range includes three primary product types: • UltraCore BIO: Designed for large biomolecules (≥5 kDa), these columns offer exceptional performance in separating biologically derived compounds. • UltraCore: Ideal for standard small organic molecules, providing rapid separations for both synthetic and natural mixtures. • UltraCore Super: Equipped with encapsulated bonding technology for small organic molecules in extreme pH conditions, optimal for high pH buffer requirements. The Avantor® ACE® UltraCore columns present a versatile and high-efficiency solution for chromatographic separation needs, accommodating a wide range of molecular sizes and providing enhanced resolution and reduced analysis time. Their adaptability to both HPLC and UHPLC systems, combined with the advantages of solid-core technology, makes them an invaluable tool in analytical and preparative chromatography.

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이온교환 칼럼 크로마토그래피를 이용한 난백에서 Lysozyme의 연속추출 (Continuous Separation of Lysozyme from Egg White by Ion Exchange Column Chromatography)

  • 박성준;김현석;김현위;안태회;박기문;최춘언
    • 한국식품과학회지
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    • 제22권6호
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    • pp.711-715
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    • 1990
  • 식품 및 의약품 원료로 이용되고 있는 Iysozyme을 난백으로부터 이온교환 크로마토그래프를 이용하여 연속추출하였다. 사용된 수지는 지금까지 수율, 순도, 작동용이성에서 가장 효과적이라고 밝혀져 있는 Duolite C-464 양이온교환수지를 선택하여 $Na^+$형으로 $pH\;7.9{\pm}0.1$로 평형화하여 사용하였다. 조제용 자동 Liquid Chromatography(LC) system(column size ; i.d. 50 mm, bed volumn ; 1020 ml)에서 수지 평형화, 난백접촉, rinse, lysozyme용출 순으로 cycle을 연속적으로 반복하면서 시행하고 그 재현성을 관찰하기 위해 각 cycle별 rinse끝점과 용출끝점의 UV level을 비교하였다. 그 결과 rinse끝점은 19 cycle까지 30% 이하를 유지하였다. 용출 끝점은 17 cycle까지는 30% 이하에서 비교적 안정하였으나 18 cycle 이후 부터는 50% 이상으로 용출능력이 현저하게 감소하였다. 또한, 회수율 비교에서 17cycle까지는 90% 이상을 유지하다가 18cycle에서는 72%, 19 cycle에서는 65%로 격감하였다. 본 추출 정제 lysozyme은 전기영동상 단일 band로 나타났고, densitometer로 측정한 순도는 99% 이상이었다.

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생강으로부터 6-Gingerol의 분리 및 항산화 활성 (Separation of 6-Gingerol from Ginger [Zingiber officinale Roscoe] and Antioxidative Activity)

  • 이봉수;고명석;김현종;곽인섭;김동호;정봉우
    • KSBB Journal
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    • 제21권6호
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    • pp.484-488
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    • 2006
  • 이상의 실험결과를 종합해보면 6-gingerol의 최적추출조건은 $30^{\circ}C$에서 80% 에탄올을 이용하여 추출함이 바람직하다고 여겨진다. 또한 용매만을 이용해서 추출하는 것보다 초음파를 도입하여 추출하는 것이 7% 정도 높은 결과를 얻는 것을 확인할 수 있었다. 6-gingerol의 경우 분취크로마토그래피를 이용했을 때 비교적 높은 순도의 gingerol을 얻을 수 있었으며, F9 분획에서 $0.53\;mg/m{\ell}$의 6-gingerol를 얻었다. 6-gingerol의 항산화 활성은 아스코르브산의 95% 정도로 매우 높게 나타났다. 또한 항산화 활성을 나타내는 다른 물질이 포함되어 있다는 것을 확인할 수 있었다.

한국인삼(韓國人蔘)의 Saponin에 관(關)한 연구(硏究) [제1보(第一報)] - Saponin fraction별(別) 정량방법(定量方法)에 관(關)하여 - (Saponins of Korean Ginseng Panax ginseng C.A. Meyer [Part I] - Determination of Saponins Fractions -)

  • 조성환;조한옥;김재욱
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제19권4호
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    • pp.233-242
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    • 1976
  • 인삼중(人蔘中)에 함유된 dammarane glycoside들을 glycoside 수준(水準)에서 fraction별(別)로 정량(定量)하는 방법(方法)으로 2차원(次元) TLC법(法)에 의해 분리(分離)된 glycoside를 용출(溶出)하여 Vanillin-$H_2SO_4$ 발색법(發色法)으로 정량(定量)하는 방법(方法)을 검토하는 동시에, 1차원(次元) TLC법(法)으로 SAPONIN FRACTION을 분해(分解)하고 이것을 thinchrograph TFG-10 및 digital densitorol DMU-33c에 걸어 각(各) fraction별(別)로 saponin을 정량(定量)하였다. 1. 2차원(次元) TLC를 병용(竝用)한 Vanillin-$H_2SO_4$ 비색법(比色法)은 각(各) fraction의 정리(定離)는 용이하였으나, 각(各) spot를 동정(同定)하기가 어려웠다. 2. Thinchrograph를 이용하여 saponin를 정량(定量)하는 경우, 비교적 감도(感度)가 높은 ginsenoside의 peak를 얻을 수 있었으나, 동일(同一)한 정량조건(定量條件)에서 표품(標品)과의 대조실험(對照實驗)이 병행(竝行)해야 하므로 표품(標品)의 입수가 어려워, 각(各) peak에 해당하는 saponin동정(同定)이 불가능하였다. 3. Densitometer의 경우 thinchrograph보다 그 감도는 떨어지나, 사용법이 간편하고, 쉽게 각(各) fraction을 동정(同定)할 수 있어 TLC에서 분리(分離)가 좋은 용매를 사용한다면 비교적 정확도가 높은 정량치를 얻을 수 있을 것이다.

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가시오가피(Acanthopanax senticosus)의 석유에테르 추출물 중 polyacetylene계 물질의 동정 (Identification of the Polyacetylenes extracted from Acanthopanax Senticosus by Petroleum Ether)

  • 양효진;김은미;장규섭
    • 농업과학연구
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    • 제35권1호
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    • pp.11-17
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    • 2008
  • 가시오가피를 실온에서 petroleum ether로 추출한 polyacetylene의 동정하기 위하여 TLC, HPLC, UV spectrum, IR, NMR로 수행하였다. TLC에 전개시킨 결과, polyacetylene 표준품과 동일한 band가 fraction 5에서 확인되었으며, HPLC에서 fraction 5를 분리시킨 결과 retention time이 4.40, 5.36, 6.40분이었다. 이를 UV spectrum에서 확인한 결과, 6.40분의 peak(compound 3)에서 polyacetylenes의 파장인 231.0nm, 239.0nm, 257.0nm을 나타내었다. IR spetrum에서 triple bond $2256cm^{-1}$과 double bond $1654cm^{-1}$의 전형적인 peak를 나타내었으며, $^{13}C$-NMR(400MHz, $CDCl_3$)에서 polyacetylenes 전형적인 64.0, 71.2, 74.2, 80.2ppm은 2개의 triple bond에 의한 peak와 121.89, 133.0ppm에서 internal double bond로 결합된 2개의 peak를 확인 할 수 있었다.

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황금(Scutellaria baicalensis) 유효분획물 제조의 합리적이고 효율적인 접근방법 (Rational and efficient approach to the preparation of the active fractions of Scutellaria baicalensis)

  • 김두영;김원준;김정희;오세량;류형원
    • Journal of Applied Biological Chemistry
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    • 제62권1호
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    • pp.31-38
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    • 2019
  • Scutellaria baicalensis Georgi (Scutellariae Radix)는 이뇨제, 고지혈증, 항박테리아, 항알레르기, 항염증제 및 항암제와 같은 건강보조식 및 전통 생약으로도 널리 사용되어 왔다. 본 연구에서 복잡한 S. baicalensis 추출물에서 지표 물질 또는 유효화합물들을 분리하는 것은 신원 확인 및 생리활성 평가를 위한 필수적인 단계다. 8개의 성분들로 구성된 타겟 분획물을 두개의 gradient elution를 사용하여 고성능 액체 크로마토 그래피에서 분석하였다. 중압 액체크로마토그래피 및 개방형칼럼으로 분취를 시뮬레이션함으로 예비실험에서 충분히 분리가 되도록 용리 조건을 결정할 수 있었다. 최적 분취방법으로 확보된 표준유효분획물로부터 8개의 지표성분들이 포함된 것을 확인하였다. 또한, 분획물은 UPLC-QTof-MS 비교 분석으로 MS, UV, HRESIMS 결과를 확인할 수 있었다. 따라서, 스케일 업 실험법은 S. baicalensis 추출물에 성공적으로 적용될 수 있었다.

Large scale Gravitational SPLITT Fractionation (GSF)에서의 시료 throughput에 관한 연구 (Investigation on sample throughput of large scale splitter-less gravitational SPLITT fractionation (GSF))

  • 최효재;김운중;음철헌;이승호
    • 분석과학
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    • 제26권1호
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    • pp.34-41
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    • 2013
  • SPLITT Fractionation (SF)는 콜로이드 입자 및 거대분자들을 둘 혹은 그 이상의 부분(fraction)으로 분획하는 기술이다. SF에서는 시료를 지속적으로 주입하므로 대용량 분획이 가능하다. 일반적으로, SF에서는 얇은 리본모양의 채널을 이용하는데, 채널의 입구와 출구부분에는 각각 flow stream splitter가 설치되어 있어서 채널의 입구와 출구가 위 아래로 두 개씩 존재한다. SF에는 두 가지 작동방법이 있는데, 하나는 conventional mode 이고 다른 하나는 전액 공급 모드(full feed mode, FFD)이다. FFD 모드에서의 분리도는 conventional mode 에 비해 떨어지지만, FFD 모드에는 몇 가지 독특한 장점이 있다. FFD 모드에서는 용매의 주입이 필요하지 않으므로 채널의 디자인 이나 작동이 더 간단하다. 따라서 입구 쪽에 flow stream splitter를 필요로 하지 않으며, 시료와 용매를 주입하기 위하여 두 개의 펌프가 필요한 conventional 모드와는 달리 한 개의 펌프만으로 작동이 가능하다. 또한 용매의 주입이 없으므로 시료가 희석되지 않는다. 이는 환경시료와 같이 콜로이드의 농도가 낮은 시료를 분획하고자 하는 경우 유리하다. 농도가 낮은 환경시료의 분획을 위해서는 종종 농축이 필요하다. 본 연구에서는 입구에는 물론 출구에도 splitter를 사용하지 않는 새로운 대용량 FFD 모드 SF 장치를 만들었다. Splitter가 없으므로 장치를 대형화 할 수 있어서 시료처리량(throughput, TP)을 크게 증가시킬 수 있었다. 산업용 폴리우레탄(polyurethane, PU) 라텍스 입자들을 이용하여 새로운 SF 장치를 테스트하였으며, 폴리아크릴레이트(polyacrylate, PA) 입자를 대상으로 새로운 SF 장치의 TP를 확인하기 위하여 유속 및 $d_c$에 따르는 TP의 변화를 조사하였다.

대용량 splitter less full-feed depletion SPLITT 분획법 (Large scale FFD-SF)에서의 분획효율(FE)및 시료처리량(TP)의 최적화 (Optimization of fractionation efficiency (FE) and throughput (TP) in a large scale splitter less full-feed depletion SPLITT fractionation (Large scale FFD-SF))

  • 음철헌;노아람;최재영;유영석;김운중;이승호
    • 분석과학
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    • 제28권6호
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    • pp.453-459
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    • 2015
  • Split-flow thin cell fractionation (SPLITT fractionation, SF)은 밀도와 입자 크기에 따라 입자성 물질이나 거대분자를 연속적으로 분리 및 분획하는 기술이다. SF 모드 중 full-feed depletion mode (FFD)는 오직 한 개의 주입 구를 가지고 있으며, outlet에만 flow stream splitter가 존재한다. SPLITT은 두 가지의 중요 인자가 있다. 하나는 시간에 따라 통과되는 시료의 양 (throughput, TP)과 또 다른 하나는 이론에 의해 예측된 크기를 가지는 입자들의 수 퍼센트로 정의하는 분획효율 (fractionation efficiency, FE)이다.. 기존 FFD 모드에서는 splitter가 outlet에 존재하여, 채널 규모를 확장시키는 데 제한이 있어 시료 처리량의 한계가 있다. 따라서 splitter를 제거하고 채널규모를 증가하여 시료 처리량을 대폭 증가시킬 수 있는 대규모 중력장 FFD-SF 채널을 사용하였다. 따라서 이 논문에서는 대용량 중력장 FFD-SF의 TP와 FE 최적화를 위하여 시료농도와 유속변화로 실험을 진행하였다. 이 실험에서는 두 개의 다른 입자 분포 (3~7 µm, 2~30 µm) 를 가지는 Polyurethane (PU) latex beads가 사용되었다. 시료의 농도는 0.2~0.8% (wt/vol)을 사용하였으며, 채널의 유속은 70~160 mL/min을 사용하였다. 분획된 입자는 광학 현미경으로 확인하여 직접 크기 관찰을 하였으며 시료 회수율 (recovery)은 수집된 입자를 0.1 µm 맴브레인 필터로 거른 후 무게측정으로 실험하였다. 본 연구를 통해 fraction-a의 분획효율 (FE)은 이론에 따라 정확히 맞춰준다면 언제든 좋은 수치를 얻을 수 있다는 것이 확인되었고, 시료의 입자크기가 커서 채널에 쌓일 경우, 시료 회수율을 높이기 위해서는 이동상을 더 흘려주는 방법을 사용하면 효과적인 것을 확인하였다. 또한 효율적인 TP로 실험을 진행하기 위해서는 최소한 0.4% 농도는 사용해야 효율적인 분획이 이뤄진다는 것을 확인하였다.

꾸지뽕나무 열매에서 추출한 수용성 다당류의 구조분석 (Structure Analysis of Water-soluble Polysaccharides Extracted from The Unripe Fruit of Cudrania tricuspidata)

  • 김석주;이경태;유원재;이성숙;김용식
    • Journal of the Korean Wood Science and Technology
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    • 제42권6호
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    • pp.740-746
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    • 2014
  • 꾸지뽕나무 미숙과를 50% 발효주정으로 추출하고, 농축한 추출용액을 n-hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol로 순차적으로 분액하여 수용성 조추출물을 얻었다. 수용성 조추출물을 분취용 겔 투과 크로마토그래피(Gel Permeation Chromatography, GPC)를 실시하여 다당류(F1)를 분리하였다. F1을 가수분해하여 단당 성분 분석을 실시한 결과 glucose, galactose, arabinose, xylose 등 4가지로 구성되어 있었으며, 그 조성비는 6.1 : 1.8 : 3.1 : 1.0이었다. F1에 acetyl 기의 치환여부와 uronic acid의 존재 유무를 확인하기 위해 FT-IR로 측정하고 염산 가수분해 한 다음 HPLC 분석을 실시한 결과, 두 가지 모두 없는 것으로 분석되었다. 결합 위치 확인을 위해 permethylation, 산 가수분해, 환원, silylation을 순차적으로 실시하여 얻은 partially methylated alditol silylate (PMAS)들을 GC-MS 분석을 실시한 결과, 1,5-di-O-trimethylsilyl-2,3,4-tri-O-methyl xylose, 1,5-di-O-trimethylsily-2,3,4-tri-O-methyl arabinose, 1,4,5-tri-O-trimethylsily-2,3-di-O-methy arabinose, 1,3,5-tri-O-trimethylsily-2,4,6-tri-O-methyl glucose, 1,4,5-tri-O-trimethylsily-2,3,6-tri-O-methyl galactose, 1,4,5-tri-O-trimethylsily-2,3,6-tri-O-methyl glucose, 1,3,5,6-tetra-O-trimethylsily-2,4-di-O-methyl galactose, 1,3,5,6-tetra-O-trimethylsily-2,4-di-O-methyl glucose로 구성되어 있었고 그 조성비는 1.1 : 1.0 : 4.9 : 7.5 : 3.0 : 3.1 : 1.4 : 1.5였다.

Hyphenated-HPLC 기술을 활용한 홍화씨의 항산화 성분 분석 (The Rapid Detection of Antioxidants from Safflower Seeds (Carthamus tinctorius L.) Using Hyphenated-HPLC Techniques)

  • 김수진;김상민;강석우;엄병헌
    • 한국식품과학회지
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    • 제42권4호
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    • pp.414-419
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    • 2010
  • 본 연구에서는 세 종류의 hyphenated-HPLC 기술을 활용하여 홍화씨로부터 3종의 항산화 화합물의 구조를 규명하였다. 우선 온라인 항산화 분석 장치를 통하여 홍화씨 추출물로부터 ABTS 라디칼 소거활성을 가지는 성분을 검색 및 항산화 정량을 수행한 후, 단일 물질로 분리되고, 항산화 활성을 가지는 세 가지 화합물에 대해서 구조 규명을 시도하였다. 우선 LC-NMR을 이용하여 stop-flow mode에서 이들 세 가지 화합물에 대해 $^1H$-NMR spectrum데이터를 얻은 결과 각 화합물은 8'-hydroxyarctigenin-4'-O-$\beta$-D-glucoside, N-(p-coumaroyl) serotonin, N-feruloylserotonin으로 확인되었다. 그리고 LC-ESI-MS를 활용하여 각 화합물에 대한 분자량에 대한 정보를 얻어 LC-NMR에서 규명된 화합물이 정확함을 다시 한 번 확인할 수 있었다. 본 연구에서는 기존의 탐색방법인 여러 크로마토그래피 방법이나 preparative HPLC 등을 이용하여 활성물질을 분리하고 off-line NMR, MS 등을 활용하여 구조를 규명하는 방법에 비하여, hyphenated-HPLC 방법을 활용하여 혼합물 상태인 추출물을 분리하지 않고 신속하게 단일 성분의 구조를 규명하고, 또한 각각의 성분에 대한 항산화도를 측정할 수 있다는 장점이 있음을 증명하였다. 이는 천연물 또는 식품 분야의 연구에 있어 추출물의 항산화 성분을 분석하고 그 구조를 신속 간편하게 확인할 수 있으므로 항산화 성분 탐색 및 변이 연구에 매우 유용하리라 생각된다.