The potato viruses, as possible potato virus X(PVX), potato virus Y(PVY), potato virus S(PVS) are isolated from potato tuber, which collected from eleven areas (Table 1) in Korea. These viruses are isolated by single lesion isolation, Aphid transmission and inoculating methods through the many species of the different plants. The PVX is identified by host range, symptoms, physical properties, serological reaction and electron micrography. The other two viruses are identified by the first two methods mentioned above. The results of the above experiments are as follows. The total value of these viruses infection is 81%. The value of PVX infection is higher than the other two viruses. The properties of PVX are marked as local lesions on Comphrena globosa. The dilution end point is $10^{-6}$, the thermal inactivation point is $70^{\circ}C$ and the size of virus particles is around 13 x 60 $m\mu$.
Potato virus Y (PVY) and potato leafroll virus (PLRV) are among the most damaging potato viruses and prevalent in most potato growing areas. In this study, cryopreservation was used to eradicate PVY and PLRV using two cryogenic methods. Potato shoot tips proliferated in vitro were cryopreserved through droplet-vitrification and encapsulation-vitrification using plant vitrification solution 2 (PVS2; 30% glycerol + 15% dimethyl sulfoxide + 15.0% ethylene glycol + 13.7% sucrose) and modified PVS2. Both cryogenic procedures produced similar rates of survival and regrowth, which were lower than those from shoot tip culture alone. The health status of plantlets regenerated from shoot tip culture alone and cryopreservation was checked by reverse transcription-polymerase chain reaction. The frequency of virus-free plants regenerated directly from highly proliferating shoot tips reached 42.3% and 48.6% for PVY and PLRV, respectively. In comparison, the frequency of PVY and PLRV eradication after cryopreservation was 91.3~99.7% following shoot-tip culture. The highest cryopreserved shoot tip regeneration rate was observed when shoot tips were 1.0~1.5 mm in length, but virus eradication rates were very similar (96.4~99.7%), regardless of shoot tip size. This efficient cryotherapy protocol developed to eliminate viruses can also be used to prepare potato material for safe long-term preservation and the production of virus-free plants.
감자바이러스 S(PVS)의 진단, 동정 및 씨감자의 검정에 이용할 항혈청을 만들기 위하여 이병주로부터 PVS를 순수분리 순화하여 항혈청을 제조하였다. PVS는 지표식물파 전자 현미경으로 순수 분리하여 Nicotiana debneyii에서 증식하여 순화하였다. 순화된 PVS의 순화도는 1.18mg/ml이었으며 이것을 1.5ml씩 7일 간격으로 5회 .토끼에 주사하였으며 마지막 주사후 10일에 채혈하여 항혈청을 분리하였다. 제조된 PVS항혈청의 역가는 미량침강법에 의하여 1/2048로 나타났다.
A program was initiated to transfer potato virus Y vein-necrosis strain resistance from N. africana to N. tabacum The Fl plants between the above species were self-sterile, but all amphidiploid plants from the Fl plants and backcrossed flowers, that is, the N. tabacum flowers crossed with amphidiploid were self-fertile. The parent, amphidiploid plants of Fl, F2 population of the amphidiploid and the backcrossed generation were screened for a resistance of potato virus Y vein-necrosis strain isolated in Korea. The Chi-square values for the F2 population of the amphidiploid and the backcrossed generation fitted 35: 1 and 5 : 1 ratios of resistant to susceptible for the potato virus Y vein-necrosis strain, respectively. Therefore, it was found that the resistance of N. tabacum for the potato virus Y vein-necrosis strain was controlled by a single dominant gene.
To classify the inheritance of resistance to potato virus Y, crosses between susceptible flue-cured tobacco variety NC 95 and resistant variety McNair 30 were conducted. The parents, $F_1$ plants, $F_2$ populations, and haploid plants derived from anthers of $F_1$ plants were screened for a resistance of two potato virus Y strains (PVY-VB and PVY-VN) isolated in Korea. The Chi-square values for the $F_3$ populations and haploids of $F_1$ fitted 1 :3 and 1 :1 ratios of resistant to susceptible for two strains, respectively. Therefore, it was found that the resistance of McNair 30 for the potato virus Y was controlled by a single recessive gene. Moreover the resistance to two strains screened was inherited dependently.
The coat protein mediated resistance to potato virus Y is assessed here in transgenic potato plants (Solanum tuberosum L., cv Claustar). Therefore, the corresponding cDNA from tunisian isolate of the virus was cloned into Agrobacterium tumefaciens binary vector. The transgenic lines were subsequently analysed for the presence and expression of the transgene. The CP cDNA copy number was determined for kanamycin resistant plants. Three selected transgenic lines and their S1 progeny resulting from tuber germination showed a high protection level against the virus. These data appear to support the hypothesis that the virus resistance is mediated by the translated viral coat protein expressed in transgenic potato lines.
Eight potato-producing provinces of Iran were surveyed during the growing seasons of 2004-2006 to detect the presence of Tomato yellow fruit ring virus (TYFRV), a tentative species in the genus Tospovirus. A total of 1,957 potato leaf samples were collected from plants with tospovirus-like symptoms of chlorotic or necrotic spots, chlorosis and necrosis. The samples were tested by enzyme-linked immunosorbent assay using TYFRV-specific antibodies. Among those tested, 498 samples (25.4%) were found to be infected with the virus. The virus was detected in 72.4% of the potato fields in all provinces surveyed. Thirteen potato isolates of TYFRV were selected for further biological and molecular studies. Based on their reactions on Nicotiana tabacum plants, the isolates were separated into two groups, namely L (local infection) and N (systemic infection). The nucleotide sequences of the nucleoprotein (N) genes of the isolates were determined and compared with the homologous sequences in Genbank. No recombination evidence was found in the isolates using different recombination-detecting programs. In the phylogenetic tree, the potato isolates fell into two major groups: IRN-1 and IRN-2 corresponding to the two biologically separated groups. This study shows for the first time the biological and phylogenetic relationships of geographically distant TYFRV isolates from potatoes in the mid-Eurasian country of Iran.
Chung, Bong Nam;Canto, Tomas;Tenllado, Francisco;Choi, Kyung San;Joa, Jae Ho;Ahn, Jeong Joon;Kim, Chun Hwan;Do, Ki Seck
The Plant Pathology Journal
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제32권4호
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pp.321-328
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2016
We examined the effects of temperature on acquisition of Potato virus Y-O (PVY-O), Potato virus A (PVA), and Potato leafroll virus (PLRV) by Myzus persicae by performing transmission tests with aphids that acquired each virus at different temperatures. Infection by PVY-O/PVA and PLRV increased with increasing plant temperature in Nicotiana benthamiana and Physalis floridana, respectively, after being transmitted by aphids that acquired them within a temperature range of $10-20^{\circ}C$. However, infection rates subsequently decreased. Direct qRT-PCR of RNA extracted from a single aphid showed that PLRV infection increased in the $10-20^{\circ}C$ range, but this trend also declined shortly thereafter. We examined the effect of temperature on establishment of virus infection. The greatest number of plants became infected when N. benthamiana was held at $20^{\circ}C$ after inoculation with PVY-O or PVA. The largest number of P. floridana plants became infected with PLRV when the plants were maintained at $25^{\circ}C$. PLRV levels were highest in P. floridana kept at $20-25^{\circ}C$. These results indicate that the optimum temperatures for proliferation of PVY-O/PVA and PLRV differed. Western blot analysis showed that accumulations of PVY-O and PVA coat proteins (CPs) were lower at $10^{\circ}C$ or $15^{\circ}C$ than at $20^{\circ}C$ during early infection. However, accumulation increased over time. At $25^{\circ}C$ or $30^{\circ}C$, the CPs of both viruses accumulated during early infection but disappeared as time passed. Our results suggest that symptom attenuation and reduction of PVY-O and PVA CP accumulation at higher temperatures appear to be attributable to increased RNA silencing.
In vitro elimination of Sweet potato leaf curl virus (SPLCV) from infected sweet potato is difficult due to low number of virus-free plants obtained from meristem tip culture and long growth period required for the virus detection. In this study, efficient production of the SPLCV-free sweet potato by in vitro therapy coupled with a PCR assay for virus detection was investigated. Infected shoots cultured on Murashige and Skoog medium were treated at three different temperatures for 7 weeks followed by meristem tip culture on the medium with or without ribavirin at 50 mg/L. The regenerated plantlets were tested for virus infection by a PCR assay. The results showed that the both heat- and cold-treatments, and addition of the ribavirin did not have significant effect on efficiency of the virus elimination. The meristem size, however, greatly affected the survival rate. Meristems sized over 0.4 mm survived better than smaller ones (0.2-0.3 mm). The PCR assay was approved to be a rapid, sensitive and reliable for the SPLCV detection in regenerated plantlets. Therefore, combination of cultivating meristem tips sized 0.4-0.5 mm on the medium at $22^{\circ}C$ without ribavirin and detection of SPLCV in the regenerated plantlets by the PCR assay was an efficient system for the SPLCV elimination from infected sweet potato.
한국의 중부지역을 중심한 11개 지역으로부터 수집한 자료를 재료로 하여 감자바이러스를 분석한 결과 potato virus X, potato virus Y, potato virus S의 3종류의 감자바이러스 계통이 우리나라에 분포하고 있음을 알았다. 이들의 민합감심 비율은 81%를 나타냈으며 강원도 지방이 가장 적었다. 기중 pvx의 제성질을 조사한 결과 dilution end point는 $10^{-6}$ , thermal inactivation point는 7$0^{\circ}C$를 나타냈다. 입자의 크기는 550~650ml사이였다. 기중 600ml이 80%를 갖는 PVX계통이였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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