Polyamine 함량이 증가된 형질전환 식물체들은 $H_2O_2$ 처리에 의해서 야기된 산화적스트레스에 대해 야생형 식물체보다 조직 손상이 월등히 낮았으며 백화와 괴사되는 정도도 훨씬 낮았으며 chlorophyll 양의 손실도 비교적 적은 편이었다. 또한 고염분 스트레스를 처리하면서 야생형보다 비교적 높게 유지되었으며 4달 정도까지 생장이 지속되었지만 야생형 식물체에서는 생장이 거의 정지되어 식물체가 고사하였다. 그 외에 ABA를 처리하여 노화를 유도한 경우 야생형에서 훨씬 빠르게 노화가 일어났으며 형질전환 식물체 잎에서는 노화가 트게 지연되었다. 또한 pH3.0의 potassium phosphate를 처리한 경우에도 야생형의 잎보다 형질전환 식물체 잎에서 갈변등의 세포 손상이 크게 지연되었다. 곰팡이 감염에서도 높은 저항성을 보였으며 항산화효소임 GST와 CAT 유전자 발현이 증가하였다. Ethylene 발현 저해 식물체에서도 스트레스를 처리한 후 ethylene 생합성 효소의 발현이 억제되면서 스트레스 저항성을 나타내었다. 따라서 이러한 스트레스에 의하여 유도되는 노화의 지연현상이 야생형 식물체보다 형질전환 식물체 잎에서 두드러지게 나타나는데 그 기작은 mpolyamine이 이러한 스트레스를 완화시키는데 작용하였기 때문이라고 생각된다.
돼지감자의 가공과정 중 갈변에 관여하는 polyphenol oxidase를 부분 정제하고 이의 특성을 조사하였다. 인산완충액으로 추출된 조효소가 ammonium sulfate에 의한 침전과 Sephadex G-100에 의한 gel filtration으로 48배 정제되었다 이 효소는 catechol을 기실로 하였을 때 최적 활성 pH가 6.5이었으며 $K_{m}$값은 3mM, 열불활성 화는 1차반응을 보였고, 이때 Z값은 $7.6^{\circ}C$, 활성화에너지($E_{a}$)는 72.6kcal/mole이었다. 이 효소를 인산완충액에 저장하였을 때 $4^{\circ}C$에서는 일주일 이상 안정하였으나 $25^{\circ}C$에서는 활성이 급격히 소실되었다. 이 효소는 monophenol에는 반응하지 않고 diphenol의 기질에만 친화력을 나타내었으며, 그 중 chlorogenic acid와 가장 잘 반응하였다. 그리고 1 mM의 L-cystein(HCl)와 L-hydrosulfite, L-ascorbic acid에 의해서 완전히 저해되었다.
The objective of the present investigation was to study pharmacokinetics of promethazine in Korean healthy subjects using a validated HPLC method. The HPLC analysis was performed on a Capcell Pak CN column with a mixture of acetonitrile-0.02M potassium dihydrogen phosphate (42:58, v/v, pH 6.0) and the analyte was quantified with UV detection at 251 nm. The calibration curve of the drug was linear over the range of 1-40ng/mL in human serum and the limit of quantification (LOQ) was 1 ng/mL. This analytical method was validated and shown to be specific, accurate, precise and reproducible. This method was applied to pharmacokinetic study of promethazine in Korean healthy volunteers following an oral administration of two 25 mg Himazin tablets (50 mg promethazine ${\cdot}$HCI) after overnight fasting. Serum samples were collected at given intervals over a 36-hour period (12 points) and pharmacokinetic parameters were determined from serum concentration-time profile using WinNonlin program. The estimated $AUC_{0__\infty}$, $AUC_{0_\infty}$, $C_{max}$, $T_{max}$ and $t_{1/2}$ of promethazine obtained from Korean healthy subjects were 103.84 ${\pm}$84.30 ng${\cdot}$hr/mL, 87.94${\pm}$81.02 ng${\cdot}$hr/mL, 13.43${\pm}$10.92 ng/mL, 2.00${\pm}$1.16 hr and 5.88${\pm}$3.47 hr, respectively.
두물차의 수량은 관행시비 (4회 분시)에 비해 완효성 비료 9월, 3월 분시 2회 와 3월 1회 분시는 수량차가 없었으나 9월 1회 분시는 감수되었다. 관행시비에 비해 완효성비료 2회 분시가 총 질소, 총 아미노산은 많았고, tannin과 caffeine 함량은 적은 경향이었으며 엽록소, 비타민 C, 유리당 함량과 감칠맛 주성분인 theanine 함량은 차이가 없었다. 형상, 향, 맛 등 제다품질은 완효성 비료 2회 분시가 1회 분시나 관행 시비 (4회 분시)에 비해 우수하였다. 그러나 완효성 비료처리는 토양비료성분 중 질소, 인산, 칼리의 효율성을 향상시켜 차잎 수량 및 품질을 증가시킨다고 생각된다.
The lipoxygenase was purified 35 fold to homogeneity from the Korean red potato by an ammonium sulfate precipitation and DEAE-cellulose column chromatography. The simple purification method is useful for the preparation of pure lipoxygenase. The molecular weight of the enzyme was estimated to be 38,000 by SDS-polyacrylamide gel electrophoreses and Sepharose 6B column chromatography. The purified enzyme with 2 M $(NH_4)_2SO_4$ in a potassium phosphate buffer, pH 7.0, was very stable for 5 months at $-20^{\circ}C$. Because the purified lipoxygenase is very stable, it could be useful for the screening of a lipoxygenase inhibitor. The optimal pH and temperature for lipoxygenase purified from the red potato were found to be pH 9.0. and $30^{\circ}C$, respectively. The Km and Vmax values for linoleic acid of the lipoxygenase purified from the red potato were $48\;{\mu}M$ and $0.03\;{\mu}M$ per minute per milligram of protein, respectively. The enzyme was insensitive to the metal chelating agents tested (2 mM KCN, 1 and 10mM EDTA, and 1 mM $NaN_3$), but was inhibited by several divalent cations, such as $Cu^{++}$, $Co^{++}$ and $Ni^{++}$. The essential amino acids that were involved in the catalytic mechanism of the 5-lipoxygenase from the Korean red potato were determined by chemical modification studies. The catalytic activity of lipoxygenase from the red potato was seriously reduced after treatment with a diethylpyrocarbonate (DEPC) modifying histidine residue and Woodward's reagent (WRK) modifying aspartic/glutamic acid. The inactivation reaction of DEPC (WRK) processed in the form of pseudo-first-order kinetics. The double-logarithmic plot of the observed pseudo-first-order rate constant against the modifier concentration yielded a reaction order 2, indicating that two histidine residues (carboxylic acids) were essential for the lipoxygenase activity from the red potato. The linoleic acid protected the enzyme against inactivation by DEPC(WRK), revealing that histidine and carboxylic amino acids residues were present at the substrate binding site of the enzyme molecules.
전분박을 첨가한 왕겨및 볏짚의 산당화액을 이용하여 효모생육조건을 검토하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 왕겨와 볏짚에 전분박을 첨가하여 당화시킴으로써 당화액의 당농도가 각각 9.12%, 7.98%까지 증가되었다. 2. 산당화액을 중화할 때 사용한 중화제로서는 CaCO$_3$, Ca(OH)$_2$, NH$_4$OH순으로 효모생육이 좋았다. 3. 당화액을 기질로 하여 무기영양요구성을 검토한 결과 (NH$_4$)$_2$SO$_4$0.3%, $K_2$HPO$_4$0.4%, MgSO$_4$ㆍ7$H_2O$0.02%, NaCl 0.02%, CaCl$_2$0.02%를 가하였을 때 효모의 생육도가 가장 좋았다. 4. 전분박을 첨가한 왕겨와 볏짚의 당화액을 기질로 하여 효모를 배양하였을 때 48시간 이내에 각각 91.2% 90.8%의 당을 소화하였고 당에 대한 수율은 각각 46.5 %, 45.4%이었다.
Dietary peptides have recently received attention regarding their beneficial effects on nutrient metabolism since the caseinphosphoptides obtained from casein hydrolysate are generally believed to enhance the intestinal absorption of Ca. The two experiments were conducted to investigate the effects of various hydrolyzed fractions of gluten on Ca bioavailability. The gluten hydrolysate of dietary components was produced by enzymatic hydrolysis of gluten whereas gluten hydrolysate supernationt and its precipiate resulted from centrifugation. In experiment I, the rats were for 4 weeks fed the 4 kinds of diets containing same amount of nitrogen and calories and diffeing only in the forms of nitrogen sources. The diets were gluten (G), gluten hydrolysat(GH), gluten hydrolysate supernatant(GHS) and gluten hydrolysate precipitatie(GHP). Determination was made for the body weight gain, serum Ca concentration, Ca solubility in small intestinal contents, bone weight, length and stength, bone ash and Ca content, and Ca balance, respectively. No significant difference was noticed as regards growth, serum Ca, and bone dimension and Ca content among rat groups. More significant increase was observed with regard to Ca absorption and intestinal solubility in the rats receiving the GH or GHS diet which containe crude gluten peptides, than in those subjected to G or GHP diet. In experiment II, in vitro determination for Ca solubility was made to ascertain the mechanism responsible for the effects of gluten peptides on Ca absorption. The 10mM Ca in potassium phosphate buffer solution(pH 7.0) incubated for 3 hours at 37$^{\circ}C$ by the GHS fraction, was observed to be capable of increasing the Ca solubility at 5-25mg/ml concentration of gluten peptides. These observations suggest that the gluten peptides from gluten hydrolysate may enhance the Ca absorption efficiency by increasing the solubility of Ca in small intestine.
토양에서 분리 동정된 Aspergillus niger KU K-04에 의한 glucose oxidase 생산을 최대화하기 위하여 효소생산에 미치는 배양조건 및 영양원에 대하여 연구하였던 바 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 효소생성을 위한 최적배양온도, 배지pH 및 배양시간은 각각 28~34$^{\circ}C$, 7.0~8.0 및 40 시간이었다. 2. 탄소원으로서는 포도당이 가장 양호하였으며 최적농도는 15% (w/v)이었다. 3. (NH$_4$)$_4$SO$_4$가 질색원으로서 가장 좋은 효소활성을 나타냈으며 효소생산을 위한 최적농도는 0.02%이었다. 4. 무기염으로서는 MgSO$_4$. 7$H_2O$ 및 KH$_2$PO$_4$를 각각 0.05%와 0.02%를 첨가했을 때 효소생산이 증가되었다.
4-Aminopyridine (AP) is a potassium channel blocker used in the treatment of neurological disorders such as multiple sclerosis and Alzheimer disease. AP‘s window of therapeutic effect appears to correlate with its plasma halflife (3.5 hours). It demonstrates pH-dependent solubility because of a weakly basic drug. In addition, the resulting release from conventional matrix tablets decreases with increasing pH-milieu of the gastrointestinal tract. The aim of this study is to design sustained release matrix tablet containing AP, overcoming this problem. $Eudragit^{\circledR}$ L 100 (EuL) and sodium alginate were used in an effort to achieve pH independent drug release. The effect of sodium alginate and EuL on drug release from matrix tablet was investigated. The drug release behavior from the different tablets was analyzed by $t_{20%},\;t_{40%},\;t_{60%}$, The exponential diffusion coefficient n, kinetic constant K were calculated according to the Korsmeyer-Peppas equation. The drug release from matrix tablets prepared with sodium alginate was decreased with increasing the content of sodium alginate in pH 7.4 while there is no significant difference in pH 1.2. The exponent n values were determined to be approximately 0.5 and 0.8 respectively, in both pH 1.2 and 7.4. These values indicate diffusion-based anomalous mechanism and erosion-based anomalous mechanism, respectively. The drug release from sodium alginate matrix tablets prepared with solid dispersion of EuL containing drug showed a slow drug release in an acidic medium and a more fast drug release in phosphate medium, compared with sodium alginate matrix tablets prepared with physical mixture. These results may be attributed to the gel forming ability of sodium alginate and pH dependent solubility of EuL. Therefore, sustained-release AP matrix tablets using sodium alginate and EuL were successfully prepared.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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