Randomly amplified polymorphic DNAs were employed to study the genetic variation and gene introgression in potato dihaploids (2n=24) which were generated after interspecific pollination of tetraploid cultivars (2n=4X=48, Solanum tuberosum cv Irish Cobbler, Superior and Dejima) by haploid inducer clones (2n=2X=24, Solanum phureja 1.22, Hes-5 and Hes-6). Genetic variation and DNA marker segregation among dihaploids were observed. Most dihaploids contain S. tuberosum specific RAPD markers but haploid inducer-specific RAPD markers were also found in some dihaploids. Of six different arbitrary 10-mer oligonucletide primers which showed polymorphism betwen tetraploid cultivars and haploid inducers used, three generated amplification products which seemed to be derived from the S. phureja parent. Our results indicate that chromosomes of dihaploids may not be pure S. tuberosum and the dihaploids may not be produced by parthenogenesis.
The objective of the present study was to analyze genetic variation and characteristics in rainbow trout(Oncorhynchus mykiss) using amplified fragment length polymorphism(AFLP) method as molecular genetic technique, to evaluate the usefulness of AFLP as genetic markers, and to compared the efficiency of agarose and polyacrylamide sequencing gels. The amplified products were performed by agarose and sequencing gel electrophoresis to detect AFLP band patterns, respectively. Using 9 primer combinations, total of 141 AFLP bands were produced, 108 bands(82.4%) of which were polymorphic in agarose gels. In sequencing gels, total of 288 bands were generated, and 220 bands (76.4%) were polymorphic. The level of bandsharing(BS) ranged from 0.18 to 0.32 for the 9 primer combinations tested, with a mean of 0.24. Consequently, AFLP markers of these rainbow trout could be used as genetic information such as species identification, genetic relationship or analysis of genome structure, and selection aids for genetic improvement of economically importment traits in fish species.
In this study, two pepper varieties, PRH1 (powdery mildew resistance line) and Saengryeg (powdery mildew resistance line), were resequenced using next generation sequencing technology in order to develop InDel markers. The genome-wide discovery of InDel variation was performed by comparing the whole-genome resequencing data of two pepper varieties to the Capsicum annuum cv. CM334 reference genome. A total of 334,236 and 318,256 InDels were identified in PRH1 and Saengryeg, respectively. The greatest number of homozygous InDels were discovered on chromosome 1 in PRH1 (24,954) and on chromosome 10 (29,552) in Saengryeg. Among these homozygous InDels, 19,094 and 4,885 InDels were distributed in the genic regions of PRH1 and Saengryeg, respectively, and 198,570 and 183,468 InDels were distributed in the intergenic regions. We have identified 197,821 polymorphic InDels between PRH1 and Saengryeg. A total of 11,697 primers sets were generated, resulting in the discovery of four polymorphic InDel markers. These new markers will be utilized in order to identify disease resistance genotypes in breeding populations. Therefore, our results will make a one-step advancement in whole genome resequencing and add genetic resource datasets in pepper breeding research.
The genetic variations in three major river populations viz. the Halda, the Jamuna and the Padma of the Indian major carp, Catla catla were analyzed by Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) markers. Four decamer primers were used for amplifying DNA of 10 individuals from each population. The proportion of polymorphic loci and the gene diversity estimates were 59.4 and 0.20 for the Halda, 37.5 and 0.14 for the Jamuna and 46.9 and 0.16 for the Padma populations respectively indicating the existence of a relatively high level of genetic variation in the Halda river population. The inter-population similarity indices, gene flow and genetic distance values indicated that the Jamuna-Padma population pair of catla was genetically closer than the Halda-Jamuna and the Halda-Padma population pairs in compliance with the geographical distances among them. The coefficient of gene differentiation ($G_{ST}$=0.13) reflects some degree of genetic differentiation among three populations of catla studied. The data suggest that the RAPD technique could be used to discriminate different river populations of catla.
The objective of this study was to develop a linkage map of soybean under the genetic background of Korean soybean. A set of 89 F/sub 5/ lines was developed from a cross between 'Pureunkong', which was released for soy-bean sprout, and 'Jinpumkong 2', which had no beany taste in seed due to lack of lipoxygenase 1, 2, and 3. A linkage map was constructed for this population with a set of 113 genetic markers including 7 restriction fragment length polymorphism (RFLP) markers, 79 randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) markers, 24 simple sequence repeat(SSR) markers, and 3 morphological markers. The map defined approximately 807.4 cM of the soybean genome comprising 25 linkage groups with 98 polymorphic markers. Fifteen markers remained unlinked. Seventeen linkage groups identified here could be assigned to the respective 13 linkage groups in the USDA soybean genetic map. RFLP and SSR markers segregated at only single genetic loci. Fourteen of the 25 linkage groups contained at least one SSR marker locus. Map positions of most of the SSR loci and their linkages with RFLP markers were consistent with previous reports of the USDA soybean linkage groups. For RAPD, banding patterns of 13 decamer primers showed independent segregations at two or more marker loci for each primer. Only the segregation at op Y07 locus was expressed with codominant manner among all RAPD loci. As the soybean genetic map in our study is more updated, molecular approaches of agronomically important genes would be useful to improve Korean soybean improvement.
Through a screening and selection approach method, decamer random markers were used in a technique called random amplified polymorphic DNA (RAPD) assay with 252 genomic DNAs isolated from four major Haimen chicken populations: Rugao (62), Jiangchun (62), Wan-Nan (63) and Cshiqishi (65). A total of 3-score decamer random primers (S241-S260, S1081-S1100 and S1341-S1360) were employed in the preliminary RAPD-polymerase chain reaction (RAPD-PCR) assay with 50 random template DNA samples from all the populations. Four (6.67%) of the primers that produced obvious polymorphic patterns, interpretable and reproducible bands were selected and used with both the individual DNAs from each population and with pooled DNA samples of the four populations in subsequent analyses. The selected primers produced a total of 131 fragments with molecular size ranging from 835 to 4,972 base pairs (bp) when used with the individual DNAs; 105 (80.15%) of these fragments were polymorphic. With the pooled DNAs, 47 stable and characteristic bands with molecular size ranging from 840 to 4,983 bp, of which 23 (48.94%) polymorphic, were also generated. The band-sharing coefficient (BSC) calculated for the individuals in the population and among populations of bulked samples was between 0.8247 (Rugao) and 0.9500 (Cshiqishi); for pairwise populations, it was between 0.7273 (Rugao vs. Wan-Nan) and 0.9367 (Jiangchun vs. Cshiqishi) chicken populations. Using the BSC for individual and pairwise populations, the Nei's standard genetic distances between the chicken populations were determined and ranged from 0.0043 (Jiangchun vs. Cshiqishi) to 0.1375 (Rugao vs. Cshiqishi). The reconstructed dendrogram linked the Jiangchun and Cshiqishi chickens as closely related populations, followed by Wan-Nan, while the Rugao was the most genetically distant among the populations.
탄저균의 분자적 다양성 분석은 다양한 DNA표지의 부족으로 쉬운 일이 아니어서, 본 연구에서는 random amplified polymorphic DNA (RAPD)-PCR을 이용하여 Bacillus 속으로부터 탄저균을 구별할 수 있는 새로운 DNA 표지를 개발하고자 하였다. RAPD-PCR을 이용한 분석은 다양한 Bacillus 종으로부터 탄저균을 동정할 수 있었으며, 아울러 Bacillus 종 사이에서 확실한 유전적인 변이를 확인할 수 있었다. 이러한 분석은 간단, 신속하고, 그리고 정확하게 탄저균을 진단하는데 활용할 수 있다고 본다.
This study was conducted to establish an individual identification system comprising of 19 microsatellite markers located on different bovine autosomes. The markers were typed on 257 animals from five cattle breeds. In total, 112 alleles were detected from the genotyping of 19 microsatellite markers. The average heterozygosities ranged from 0.292 to 0.824 and the polymorphic information content (PIC) ranged from 0.274 to 0.817 in Hanwoo. We found that there were differences in allele frequencies in Hanwoo when compared with other cattle breeds. The calculated cumulative power of discrimination (CPD) was 99.999% when nine microsatellite loci were used for analysis in the individual identification system. Also the matching probability, the probability that two unrelated animals would show the same genotypes, was estimated to be $0.44{\times}10^{-9}$. Therefore, the nine markers used in this study will be used for individual identification in two million Hanwoo individuals.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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