Single cells obtained from suspension culture of mature embryo-derived callus in wheat(Triticum aestivum L. cv Jang Kwang) were cultured to regenrated into the plantlet. Cell clusters and embryogenic calluses were efficiently developed from when the single cells clutured on the MS medium supplemented with 10${\mu}{\textrm}{m}$ 2,4-D. Upon transfer to hormone-free MS medium containing 10 mg/I AgNO3, embryogenic calluses gave rise to shoots, probably through somatic embryogenesis.
This study was carried out to determine the effects of plant growth regulators on cell culture and organogenesis from Sicyos angulatus L. using explants of leaves, stems and cotyledons. Optimal callus induction for S. angulatus was obtained on MS medium with 0.1mg/$\ell$ BA and 2.0mg/$\ell$ 2,4 -D from cotyledons, 0.1mg/$\ell$ BA and 5.0mg/$\ell$ NAA from leaves explants, Optimal media for subculture and growth of S. angulatus callus were 1/2 MS medium with 0.1mg/$\ell$ BA and 1.0mg/$\ell$ 2,4 -D for solid culture, and 0.1mg/$\ell$ 2,4-D for suspension culture. Many adventitious roots with some shoots were formed were formed from leaf and cotyledon explants of S. angulatus during callus induction with optimal combinations of plants growth regulators.
In vitro culture of panicle has been the method to accumulate starch and protein in immature grains by providing nutrients after florets crossed between remote genotypes artificially. Grain filling means embryo development and sucrose translocation from photosynthetic source, and starch manufacture in endosperm. The concentrations of sucrose used to culture immature rice panicle were 5, 10, 15, 20% and glutamine was 20 mM. When immature rice panicles at 5 days after flowering were cultured in distilled water with different concentrations of sucrose, glutamine 20 mM and MS medium with different concentrations of sucrose, glutamine 20 mM for 30 days the later was effective on grain filling. The optimal concentration of sucrose on grain filling in vitro culture of rice panicle was 10% and the weight of grain cultured was 10.14 mg that was corresponded to 57% of intact plant. In the method of treating plant growth regulators, the culture of immature rice panicle adding in MS medium with Kinetin, IAA, $\textrm{GA}_3$ were effective on grain filling than the culturing of immature rice panicle after submerging in solutions of Kinetin, IAA, $\textrm{GA}_3$ for 1day. When immature rice panicle was cultured in MS medium with sucrose 10% and Kinetin 46.47 $\mu$M it was effective on grain filling, respectively. The weight of grain cultured was 13.1mg that was corresponded to 75% of intact and germination rate was 51 %. When immature rice panicles were cultured in medium with different concentrations combined with Kinetin 4.65, 46.47, 464.7 $\mu\textrm{M}$, IAA 5.71, 57.08, 570.80 $\mu\textrm{M}$ for 30 days and in medium with IAA 5.71, 57.08, 570.80 $\mu\textrm{M}$ for 15 days after culturing in medium with Kinetin 4.65, 46.47, 464.70 $\mu\textrm{M}$ for 15 days the effect on grain filling was similar.
Twenty two rhizobacteria were isolated from the roots and rhizosphere of radish, carnation, potato and tomato. There isolates produced a fluorescent pigment in King's B medium and identified as Pseudomonas spp. These isolates colonized roots and rhizosphere of the host plants. In the study of cultural characteristics of the bacteria, the pH of the culture broth was changed from neutral (7.0) to alkali (8.8∼9.41) and the numbers of cells were increased from 106 to 108 after 40 hr of incubation in basal standard succinate medium. The salicylic acid production identified by pink color reaction were observed in 7 bacteria. Out of these 7 salicylic acid producing bacteria, only 2 strains of bacteria such as Pseudomonas fluorescens RS006, and Pseudomonas sp. EN401 were confirmed as salicylic acid producers by optical density measurement. Therefore, for screening of salicylic acid producing bacteria from the roots and rhizosphere, color reaction of the culture medium should be done in the first step, and then optical density measurement of culture extract should be made for the confirmation of salicylic acid production.
In this study, we established a novel somatic embryogenesis and plant regeneration system through cell suspension culture of white dandelion (Taraxacum coreanum NAKAI.). Embryogenic calli could be initiated from leaf and root explants of sterile seedlings on solid Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 1.0 mg/L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) after 3-week cultures. To proliferate embryogenic calli rapidly, cell suspension culture was performed with transferred to liquid MS medium with various combinations of plant growth regulators (PGRs) including 2,4-D, ${\alpha}$-naphthalene acetic acid (NAA), indole-3-acetic acid (IAA), $N^6$-benzylamino purine (BAP), thidiazuron (TDZ), and kinetin. During suspension cultures, embryogenic calli not only greatly proliferated, but shoot organogenesis also simultaneously occurred from the surface of somatic embryos. Among them, TDZ at lower concentration, 0.1 mg/L produced the highest efficiency of somatic embryo formation and shoot organogenesis. Rooting of embryogenic calli with adventitious shoots was done on solid MS medium containing 0.1 mg/L NAA and 0.3% activated carbon. Nearly 80% of embryogenic calli with shoot organogenesis could be rooted normal. Well-rooted plantlets were transferred into pots under a greenhouse condition, and plants derived from this system appeared phenotypically normal.
사과나무 교배잡종 (P.16 $\times$ M. prunifolia)의 자엽과 배축 조직을 배양하여 신초의 재분화에 미치는 2,4-D, NAA 키네틴, BA, thidiazuron의 처리효과를 조사하였다. 자엽조직은 1.0 mg/L+ NAA +2.0 mg/L BA 처리구에서, 배축조직은 0.5 mg/L NAA+0.5mg/L BA처리구에서 가장 많은 수의 신초가 분화하였으며, BA 무첨가구에서는 신초의 재분화가 전혀 이루어지지 않았다. 자엽조직보다는 배축조직을 배양하는 것이 더 효과적이었으며 특히, 배축의 상위부분을 치상하였을때 신초 재분화가 더 양호하였다. 재분화된 신초를 1/2 MS에 1.0mg/L NAA를 첨가한 발근배지에 계대배양한 결과 발근이 양호하였으며 정상적인 식물체로 생장하였다.
This experiment was carried out to investigate the effects of plant growth regulators on the organogenesis from the tissue culture of Arabidopsis thaliana stem, and the origin of the callus development. When the stem segments were cultured on medium with 2mg/L IAA or NAA, adventitious roots and trichomes were differentiated after 11 days of culture. Callus vigorously formed on medium with 2/L2,4 after 7 days of culture, but adventitious roots and trichomes were not differentiated from callus after 10 days of culture. This results suggesting that picloram is very effective auxin for the callus formation and organogenesis. Callus weakly formed on 0.05mg/L kinetin, and formed on combination of auxins(2mg/L) with 0.05mg/L kinetin. But the effect of combination of auxins and kinetin the callus formation was less than 2,4-D or picloram alone. A histological examination of callus formed on picloram showed that phloram showed that phloem parenchyma cells were divided and enlarged after 2 days of culture. Cortex parenchyma cells were divided and meristematic nodules were developed from these cells after 4 days of culture. Finally, callus formed on outside of cortex and epidermis by division of meristematic nodules after 7 days of culture.
To evaluate the efficiency of anther floating culture according to the maturing group, the varietal difference and classification of fifty varieties was conducted in N6 liquid medium containing 1mg $l^{-1}$ NAA, 0.25 mg $l^{-1}$ kinetin. The efficiency of callus induction was widely ranged from 0 to 113.4%, but the mean callus induction was not significantly different among maturing groups. The efficiency of anther floating culture showed the highest variation in early-maturing group among three maturing groups. The varieties with the best callus induction were Sambaegbyeo and Jinbuolbyeo, while the recalcitrant variety was Obongbyeo in early-maturing group. The efficiency of plant regeneration showed the highest trends in late-maturing group among three maturing groups. The fifty varieties were classified into three groups (distance=0.78) by cluster analysis based on the callus formation and plant regeneration. Group including only two varieties, Shinunbongbyeo and Sambaegbyeo had the excellent androgenic efficiency, and the medium efficiency of Group was included thirty-six varieties. Whereas twelve varieties, including three Tongil varieties were fell into the bad efficiency of Group. Especially, Tongil varieties containing Japonica rice, Obongbyeo were the recalcitrant genotypes for the anther floating culture.
Xanthoceras sorbifolium Bunge (yellowhorn) is a woody tree in the soapberry family, Sapindaceae, native to northern China. This species has been identified as a major woody bioenergy plant for bio-diesel production because of high oil content in seed. But the flowers do not bear fruit well while the many flowers blooming. This study was performed to regenerate in vitro plantlet using adventitious shoot formation. To establish the protocol of plant regeneration, adventitious shoots formation rate in the culture of cotyledon of immature zygotic embryos was 68.6% in 1/2 MS medium with 0.5 mg l-1 BA and 3% sucrose (w/v). In the culture of cotyledons of mature zygotic embryos, induction of adventitious shoots was needed to contain high sucrose in pre-culture medium and the frequency of shoot induction was 64.4%. Multiple shoots were induced in 0.5 mg l-1 TDZ, and rooting of shoot was induced 4.0 mg l-1 IBA. Flow cytometry analysis revealed that all the regenerated plantlets were diploid.
Micropropagation and adventitious root production via the culture of Polygonatum odoratum were performed. Stem segments of seedlings of Polygonatum odoratum were the most efficient explants for adventitious shoot formation compared to leaf and root segments. Exogenous cytokinin treatment was required for adventitious shoot formation. Among the cytokinin (BA, Kinetin and Zeatin) tested, BA was most effective for shoot formation from stem segments. Auxin (NAA or IBA) in combination with cytokinin significantly enhanced adventitious shoot formation. Twenty five percent of explants produced adventitious shoots on medium with 2.0 mg/L BAP alone, while 83% of explants produced adventitious shoots on medium with the combination of 2.0 mg/L BAP and 0.1 mg/L IBA. Rooting of adventitious shoots was achieved after transferring to 112 MS medium supplemented with 0.1 mg/L IBA and 0.5 mg/L zeatin. When stem segments were cultured on MS medium with various kinds of auxin (IBA, NAA and 2,4-D), adventitious roots were formed from callus. frequency of adventitious root formation was highest in 2,4-D than NAA and IBA. When roots were in clusters together with parental stem segments, growth of roots actively occurred in hormone-free MS liquid medium. The above results represent that possible application for the mass production of roots and plantlets through in vitro culture system of Polygonatum odoratum.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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