The mature wheat embryo is arguably one of the best explants for genetic transformation because of its unlimited availability and lack of growth season restriction. However, an efficient regeneration system using mature wheat embryos (Triticum aestivum L.) is still not available. To identify genes related to the tissue culture response (TCR) of wheat, QTLs for callus induction from mature embryos and callus regeneration were mapped using an RIL population derived from the cross of 'Wangshuibai' with 'Nanda2419', which has a good TCR. By whole genome scanning we identified five, four and four chromosome regions conditioning, respectively, percent embryos forming a callus (PEFC), percent calli regenerating plantlets (PCRP), and number of plantlets per regenerating callus (NPRC). The major QTLs QPefc.nau-2A and QPcrp.nau-2A were mapped to the long arm of chromosome 2A, explaining up to 22.8% and 17.6% of the respective phenotypic variance. Moreover, two major QTLs for NPRC were detected on chromosomes 2D and 5D; these together explained 51.6% of the phenotypic variance. We found that chromosomes 2A, 2D, 5A, 5B and 5D were associated via different intervals with at least two of the three TCR indexes used. Based on this study and other reports, the TCRs of different explant types of wheat may be under the control of shared or tightly linked genes, while different genes or gene combinations may govern the stages from callus induction to plantlet regeneration. The importance of group 2 and 5 chromosomes in controlling the TCRs of Triticeae crops and the likely conservation of the corresponding genes in cereals are discussed.
Seasonal variation in the contents of sugars (fructose, glucose, and sucrose) in the floret, leaf, and stem of broccoli were studied in ten commercial broccoli cultivars. Plants were grown in the spring and fall seasons in 2011. In both seasons, glucose was the major constituent, comprising about 50% of the total sugar content in the floret and leaf tissue of most cultivars, whereas the broccoli stem showed an unusual pattern of accumulation. Sucrose exhibited greater cultivar dependency as well as seasonal variation compared to fructose and glucose in floret and leaf tissues. The floret tissue had a higher total content of sugar in the spring compared to the fall due to an increase in glucose and fructose. However, most of the leaf and stem tissues of broccoli had a higher total sugar content in the fall compared to the spring. Furthermore, stem and leaf tissues possessed a relatively higher total sugar content compared to floret tissue in both seasons. 'Grandeur' broccoli contained a significantly greater amount of total sugar in both floret and leaf tissues in both seasons, whereas 'YuDoRi No.1' broccoli exhibited the highest total content of sugar in stem tissue. At overall, the results showed significant influences of genotype, plant part and growing season on sugar content in broccoli.
A rapid and economical method of simultaneous extraction of DNA and RNA from seaweeds has been developed by the use of lithium chloride. Lithium chloride facilitates the softening of cell walls resulting in a decrease in both compressive and tensile modulus of elasticity. The DNA was characterized by high molecular weight larger than 27 kb and a relative lack of carbohydrate and protein contamination. The DNA and RNA extracted by the method from many seaweeds were of sufficient quality to be used as a template for per amplification with a plant intergenic gene primer set, for RAPD analysis with arbitrary primers, and for differential display with arbitrary primers in the morphologically distinct regions of the matured Porphyra thallus. The cDNA polymorphism indicated that the reproductive tissue types (male, female, patch) had a relatively high degree of similarity; the vegetative tissue types (dividing, non-dividing) also showed a similar pattern with respect to each other. Holdfast tissue had very low similarity with the other tissues, but appeared most similar to vegetative non-dividing tissue type.
To investigate the prevalence of Toxoplasma gondii in pork on the market in Korea, an in-house enzyme-linked immunosorbent assay for tissue fluid (CAU-tf-ELISA) was developed using a soluble extract of T. gondii RH strain tachyzoites. As the standard positive controls, the piglets were experimentally infected with T. gondii: Group A (1,000 cysts-containing bradyzoites), Group B (500 cysts-containing bradyzoites) and Group C ($1.0{\times}10^3$ or $1.0{\times}10^4$ tachyzoites). The CAU-tf-ELISA demonstrated infection intensity-dependent positivity toward tissue fluids with average cut-off value 0.15: 100% for Group A, 93.8% for Group B and 40.6% for Group C. When tissue-specific cut-off values 0.066-0.199 were applied, CAU-tf-ELISA showed 96.7% sensitivity, 100% specificity, 100% positive and 90.0% negative predictive values. When compared with the same tissue fluids, performance of CAU-tf-ELISA was better than that of a commercial ELISA kit. Of the 583 Korea domestic pork samples tested, anti-T. gondii antibodies were detected from 9.1% of whole samples and 37.9% from skirt meat highest among pork parts. In the 386 imported frozen pork samples, 1.8% (skirt meat and shoulder blade) were positive for anti-T. gondii antibodies. In Korea, prevalence of anti-T. gondii antibodies in the pork on retail markets appeared high, suggesting that regulations on pig farming and facilities are necessary to supply safe pork on the tables.
This experiment was carried out to establish micropropagation system in Fritillaria thunbergii Miq. Through the culture of bulblet scales, stems, node-buds and shoot tips with special reference to the effect of physiological age of explant and plant growth regulators on bulblet formation. Number of formed bulblets was significantly increased in node-bud or stem tissue compared to scals segments and on the medium supplemented with kinetin than BA containing medium. Optimum levels of kinetin for bulblet formation from node-bud taken from above 3 cm shoot length and stem segments excised from below 3 cm shoot length were 5.0 mg /L and $1.0{\sim}3.0\;mg$ /L kinetin, respectively. Interesting phenomenon was observed, the direct formation of bulblets from the axilliary bud of cultured explants. Bulblet forming capacity in stem tissue was depended on stem age, young stem had high regeneration ability compared to old stem taken from above 10 cm shoot length. 1.0 mg /L kinetin was optimum concentration for the formation of bulblets from old stem segments. Stem tissue taken from underground growing plant was promoted coampare to shoot tips or bulb scale segments. Optimum concentration of sucrose was $5{\sim}7%$. Summariged above results revealed that effective explant for micropropagation was stem and /or node-bud tissue excised from less than 3 cm plant height compared to those of bulb scale segments which showed high contamination after culture. Maximum multiplication rate of young stem and /or node-bud segment was about 20 times. Kinetin requirement for stimulation of bulblet formation from cultured explant depended on source of explants but favorable levels of kinetin for organogenesis ranged from 1.0 mg /L to 5.0 mg /L.
To understand plant-pathogen interactions, a complete set of hot pepper genes differentially expressed against pathogen attack was isolated. As an initial step, hundreds of differentially expressed cDNAS were isolated from hot pepper leaves showing non-host resistance against bacterial plant pathogens (Xanthomonas campestris pv. glycines and Pseudomonas syringae pv. syringae) using differential display reverse transcription polymerase chain reaction (DDDRT-PCR) technique. Reverse Northern and Northern blot analyses revealed that 50% of those genes were differentially expressed in pepper loaves during non-host resistance response. Among them, independent genes without redundancy were micro-arrayed for further analysis. Random EST sequence database were also generated from various CDNA libraries including pepper tissue specific libraries and leaves showing non-host hypersensitive response against X. campestris pv. glycines. As a primary stage, thousands of cDNA clones were sequenced and EST data were analyzed. These clones are being spotted on glass slide to study the expression profiling. Results of this study may further broaden knowledge on plant-pathogen interactions.
Somatic embryogenesis has become a major tool in the study of plant embryology, as it is possible in culture to manipulate cells of many plant species to produce somatic embryos in a process that is remarkably similar to zygotic embryogenesis. Traditionally, the process has been studied by an examination of the ex vitro factors which influence embryo formation. Later structural, physiological and biochemical approaches have been applied. Host recently, molecular tools are being used. Together, these various approaches are giving valuable information on the process. This article gives an overview of somatic embryogenesis by reviewing information on the morphogenesis, physiology, biochemistry and molecular biology of the process. Topics covered include a brief description of the factors involved in the production of embryogenic cells. Carrot cell suspension is most commonly used, and the development of a high frequency and synchronous system is outlined. At the physiological and biochemical lev-els various topics, including the reactivation of the cell cycle, changes in endogenous growth regulators, amino acid, polyamine, DNA, RNA and protein metabolism, and embryogenic factors in conditioned medium are all discussed. Lastly, recent information on genes and molecular markers of the embryogenic process are outlined. Somatic embryogenesis, the best example of totipotency in plant cells, is not only an important tool in studies in basic biology, but is potentially of equal significance in the micropropagation of economically important plants.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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