Peroxidase activities and isozyme patte군 of the pine needles (Pinus densiflora) were examined and compared in the coastal regions of Anmyum-Do(Choongnam, Taean-Gun) and inland regions of Shinchang-Myun(Choongnam, Asan-City). The pine needle peroxidase from Anmyum-Do showed approximately three times higher specfic activity than Shinchang pine needle peroxidase. The pine needle extracts of Anmyun-Do and Shinchang contained three anionic isoperoxidases, named A1, A2 and A3, when subjected to starch gel electrophoresis at pH 7.0. Cjationic isoperoxidases could not be found in both extracts., However, there existed unique isoperoxidase An only from the extracts of Anmyun-Do pine needles under the salinary environment. Moreover, the specific activities of catalase and glucose-6-phosphate dehydrogenase from Anmyun-Do, known for the inducible enzymes under the stress condition, were about 1.8 times higher than those of Shinchang pine needles. However, the specific activities of other enzymes did not show great differences between the two regions. Considering the above results of the higher specific activity of peroxidase and the unique expression of isoperoxidase An, pine needle peroxidase might involve in the defence mechanism against the salinary stress of Anmyun-Do.
솔잎조직과 ferrocene을 각각 효소원 및 매개체로, CSM 고무를 흑연가루 결합재로 사용하여 전류법 과산화수소 정량 효소전극을 제작하고, 그것의 특성을 전기화학적인 방법으로 관찰하였다. 낮은 퍼텐샬 영역(-100 ~ -500 mV)에서 보여준 ln($i(1-e^{nf{\eta}})$) vs. ${\eta}$ 및 Lineweaver-Burk 도시의 좋은 직선성은 신호전류의 생성이 효소의 촉매작용에 의한 것임을 확인하여 주었다. 이 때 얻어진 대칭인자(${\alpha}$, 0.17), 한계전류($i_1$, 1.99 $A/cm^2$), 교환전류밀도($i_0$, $5.86{\times}10^{-5}\;A/cm^2$), 마이클 상수($K_M$, $1.68{\times}10^{-3}$ M) 및 기타 전극 파라메터들은 전극 표면에서 소나무 과산화효소가 정량적으로 성능을 발휘하고 있음을 보여 주었다. 이런 실험적 사실들은 솔잎조직이 상업용 과산화효소를 대치하여 실용 효소전극 제작에 사용될 수 있음을 보여 주었다.
솔잎의 지질저하효과와 항산화능을 알아보기 위하여 콜레스테롤을 급여한 흰쥐에 솔잎분말을 7주간 급여한 후 혈장 및 간장의 지질구성과 간장내 TBARS량 및 glutathione peroxidase의 활성치를 비교, 검토했다. 그 결과, 혈장 총콜레스테롤량은 솔잎분말처리에 의해 하락(P<0.05)하는 경향을 보였으나 HDL콜레스테롤량은 처리군간에 유의한 차이를 나타내지 않았다(P>0.05). 간장내 총 콜레스테롤량은 9.47 mg/g에서 9.85 mg/g의 범위를 유지하였으며, 처리군간에 유의한 차이를 나타내지 않았다(P>0.05). 혈장 TBARS량은 전 처리군에서 23.15 nmol/ml에서 35.38 nmol/ml의 변동범위를 보였으며, 솔잎분말처리에 의해 하락하는 경향을 나타냈다. (P<0.05). 간장내 TBARS량은 콜레스테롤 급여에 의해 증가하였으나(P<0.05), 솔잎분말처리에 의해 하락하는 (P<0.05) 경향을 보여주었다. 간장 glutathione peroxidase의 활성치는 처리군간에 유의한 차이를 나타내지 않았다(P>0.05).
Polyacrylamide gel 전기영동법(電気泳動法)을 이용(利用)하여, 슬래쉬 소나무 (접목묘(接木苗), 20년생(年生))의 화아원기형성기간(花芽原基形成期間) 동안에 자화다량(雌花多量) 개화개체(開花個体)와 소량(少量) 개화개체간(開花個体間)에 정아(頂芽)의 peroxidase 동위효소(同位酵素)의 변화(変化)를 비교(比較)하였다. 정아(頂芽)에서 모두 9개의 band를 관측(観察)할 수 있었으며, 두 개체간(個体間)에 동위효소(同位酵素)의 양적(量的)인 차이(差異)는 미세(溦細)하였으나, 제오(第五) band는 다량(多量) 개화개체(開花個体)에서 대부분(大部分) 발견(発見)되었다. 제오(第五) band의 동위효소(同位酵素)는 자화원기형성(雌花原基形成)에 직접(直接) 관병(関聠)되는 것 같이 생각된다.
Pine needles are known as a traditional medicine and their ingestion has been shown to be beneficial to human beings. Following induction of the neoplastic process in rats by azoxymethane (AOM), we determined the effects of pine needle supplementation on colon carcinogenesis and on antioxidant systems in the blood and liver. Five week old male Fisher 344 rats were injected with AOM (15 mg/kg) once a week for two weeks. After the second injection, 18 rats were randomly assigned into two groups and were fed a casein-based high-fat diet (120 g fat and 1 g cholesterol/kg diet) with or without pine needle powder (10%w/w). After 6 weeks, rats receiving pine needle powder showed a 40% lower incidence of the number of colonic preneoplastic lesions (aberrant crypts) and a 52% lower incidence of aberrant crypt foci (p<0.01). A significantly elevated level of erythrocyte catalase activity was observed in the pine needle supplemented group (17.4$\pm$1.1 vs. 24.5$\pm$1.5, p<0.01). Pine needle supplementation also increased liver glutathione peroxidase activity (7.5$\pm$0.6 vs. 14.6$\pm$0.6, p<0.01). Other antioxidant parameters such as erythrocyte glutathione peroxidase, liver catalase activity, and plasma total antioxidant potential (TRAP), showed no statistical differences between the two groups. Our data demonstrate that pine needle supplementation improves the antioxidant system and suppresses the formation of colonic preneoplastic lesions in AOM-treated rats. This result provides additional insights into the chemo-preventative properties of pine needles.
솔잎분말이 과산화지질을 급여한 횐쥐의 혈장 및 간장지질구성과 항산화능에 미치는 영향을 검토했다. 일일 식이섭취량은 정상군을 비롯한 과산화지질처리군 모두에서 유의한 차이를 나타내지 않았다. 일일체중증가율 및 식이효율은 과산화지질처리군 모두가 정상군보다 높았으나, 대조군과 솔잎처리군 간에는 유의한 차이를 나타내지 않았다. 혈장 총콜레스테롤량은 과산화지질처리에 의해 증가하였으나, 솔잎 처리에 의해 감소되었다. 혈장 HDL-cholesterol량은 솔잎처리군에서 높은 경향을 나타내었다. 혈장 중성지질량은 처리군간에 유의한 차이를 나타내지 않았다. 간장의 총콜레스테를량과 중성지질량은 과산화지질처리군에서 증가하였으나, 솔잎처리에 따른 유의한 차이는 볼 수 없었다. 혈장 및 간장내 TBARS량과 혈장 GOT 및 GPT의 활성치는 과산화지질처리군에서 증가하였으나, 솔잎처리에 의해 감소되었다(p<0.05). 간장 glutathione peroxidase 활성치는 솔잎처리에 의해 증가하는 경향을 보였으나, 대조군과 유의한 차이를 나타내지는 않았다(p>0.05).
Pine(Pinus densiflora Sieb et Zucc.) is one of rhe popular plant drugs which has been used as a medicine in Asia. To investigate the effect of pine needle extract (PNE) on oxygen radicals and their scavenger enzymes in brain membranes of Sprague- Dawley (SD), make SD rats were fed basic diets(control group), and experimental diets (PNE group) with 0.5 and 1.0% of PNE 6 weeks. Mitochondrial hydroxyl radical levels in brain of 0.5%-PNE and 1.0%-PNE groups were significantly inhibited to 30% and 25%, respectively, and microsomal hydrogen peroxide levels in brain of 0.5%-PNE and 1.0%-PNE groups were significantly inhibited to 15% compared with control group. Cytosolic superoxide rdical levels in 1.0%-PNE group were significantly inhibited to 20% compared with control group. Lipid peroxide(LPO) levels in brain mitochondria of 0.5%-PNE and 1.0%-PNE groups were significantly lower(25% and 35%) than that in control group. Mn-superoxide disumtase (SOD) activities in brain of 0.5%-PNE and 1.0%-PNE groups were significantly higher(18% and 12%) than those in control groups, but Cu,Zn-SOD activities in brain of 0.5%-PNE were significantly activated to 15% compared with control group. Glutathione peroxidase(GSHPx) activities in brain of 1.5%-PNE and 1.0% PNE groups were significantly higher(14% and 12%) than those in control group. These results suggest that more beneficial effects such as inhibition of oxygen radicals and lipid peroxide(LPO). and oncreases of scavenger enzymes in brain membranes of SD rats may be effectively modulated by administration of pine needle extract (PNE)
The peroxidase activity was localized cytochemically to get an insight into its precise function in lignin biosynthesis. In this work, cerium chloride ($CeCl_3$) was used as a trapping agent for hydrogen peroxide ($H_2O_2$) generated from peroxidase. Seasonal variation of peroxidase activities in cambial region of Populus, Pinus, and Ginkgo was investigated at subcellular levels. Under transmission electron microscopy, electron dense deposits of cerium perhydroxide formed by reaction with $H_2O_2$ were observed in cambium and its immediate derivatives. The staining with $CeCl_3$ in cambium varied with growth seasons. The strongest $H_2O_2$ accumulation, regardless of tree species, appeared in May. Staining pattern of $CeCl_3$ in the cambium of poplar indicated that the production of peroxidase started in March before the opening of buds and reached the highest in May and then declined in August. Ginkgo and Pinus showed relatively late generation of $H_2O_2$ production when compared with Populus. Although Ginkgo and Pinus are classified into gymnosperms, however, the generation of peroxidase production and its duration was different from each other. Little staining appeared in all the tree samples collected in September before falling the leaves.
본 실험은 알코올 투여한 흰쥐를 대상으로 콩나물, 솔잎, 표고버섯과 오가피 추출물의 알코올 탈수소효소 활성과 항산화 효과를 비교하기 위해 수행되었다. 약 200g 정도의 Sprague-Dawley계 쥐들을 정상군, 알코올 단독투여군, 4가지 식물추출물 투여군으로 나우어서, 각 식물추출물을 알코올을 주입하기 전 8일 동안 200mg/kg b.w. 을 하루에 한번 경구투여하였다. 모든 동물은 알코올을 주입하고 90분 후에 도살시켰다. 콩나물과 솔잎추출물 투여군의 혈중 알코올 농도는 알코올 단독투여군, 표고버섯, 오가피군 보다 유의적으로 낮게 나타났다. 또한 콩나물과 솔잎 추출물 투여군의 알코올 탈수소효소활성은 알코올 단독투여군과 표고버섯, 오가파군보다 유의적인 증가를 보여주었다. Catalase 활성은 식물추출물 투여군이 알코올 단독투여군보다 다소 높게 나타났지만, 유의성 있는 차이는 보이지 않았다. 이러한 결과는 흰쥐에게 일회성으로 알코올을 다량 투여했을 때 알코올 탈수소효소가 catalase보다 우선적으로 알코올 대사에 반응함을 보여준다. 모든 식물추출물 투여군들의 지질과산화와 glutathione peroxidase 활성은 알코올 단독투여군보다 유의적으로 낮게 나타났다. 이 결과는 본 실험에 사용된 식물추출물들이 알코올의 산화에 대한 항산화 효과를 가진다는 것을 보여주며, 특히 콩나물과 솔잎 추출물 투여군이 알코올 탈수소효소의 활성증가오 항산화에 대한 효과가 높음을 보여주었다.
The purpose of this study was to evaluate the protective effect of $PineXol^{(R)}$ on $H_2O_2$-induced cell death in SK-N-MC cells, and in early stage focal ischemia rodent model. SK-N-MC cells were pre-treated with $200{\mu}M$$H_2O_2$ or various concentrations of $PineXol^{(R)}$ (10, 30, and 50 pg/mL) for 24 h, and then exposed to $H_2O_2$ for 3 h. Cell death was assessed by the CCK-8 assay, reactive oxygen species (ROS) assay, and lactate and dehydrogenase (LDH) release assay. Superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), and glutathione peroxidase (GPx) expressions were also analyzed by western blotting. Focal ischemia rodent model was used as the in vivo model, and different concentrations of $PineXol^{(R)}$ (1, 10, and 100 mg/kg) were administered. One week after administration, reduction of infarct volume was analyzed by TTC staining. Cell viability of $H_2O_2$-treated SK-N-MC cells significantly increased by pre-treatment of $PineXol^{(R)}$ (p<0.05). $PineXol^{(R)}$ pre-treatment also induced significant decrease of ROS and LDH expressions. However, $PineXol^{(R)}$ did not affect the infarct volume. These results suggest that $PineXol^{(R)}$ has significant neuroprotective effect in vitro, but statistical significance was not confirmed in the in vivo focal ischemia model.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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