Peroxidase activities and isozyme patte군 of the pine needles (Pinus densiflora) were examined and compared in the coastal regions of Anmyum-Do(Choongnam, Taean-Gun) and inland regions of Shinchang-Myun(Choongnam, Asan-City). The pine needle peroxidase from Anmyum-Do showed approximately three times higher specfic activity than Shinchang pine needle peroxidase. The pine needle extracts of Anmyun-Do and Shinchang contained three anionic isoperoxidases, named A1, A2 and A3, when subjected to starch gel electrophoresis at pH 7.0. Cjationic isoperoxidases could not be found in both extracts., However, there existed unique isoperoxidase An only from the extracts of Anmyun-Do pine needles under the salinary environment. Moreover, the specific activities of catalase and glucose-6-phosphate dehydrogenase from Anmyun-Do, known for the inducible enzymes under the stress condition, were about 1.8 times higher than those of Shinchang pine needles. However, the specific activities of other enzymes did not show great differences between the two regions. Considering the above results of the higher specific activity of peroxidase and the unique expression of isoperoxidase An, pine needle peroxidase might involve in the defence mechanism against the salinary stress of Anmyun-Do.
A pine needle-embedded graphite enzyme electrode, of which bonding agent is CSM rubber, was newly designed and its electrochemistry was studied based on the amperometry. It involved a ground green leaves of pine tree as a zymogen together with electrochemical mediator, ferrocene within the paste. The plots of ln($i(1-e^{nf{\eta}})$) vs. ${\eta}$ and Lineweaver-Burk at the low potential (-100 to -500 mV) showed good linearities indicating that the amperometric response is by the catalytic power of pine peroxidase. Electrochemical parameters obtained, symmetry factor (${\alpha}$, 0.17), limiting current ($i_1$, 1.99 $A/cm^2$), exchange current density ($i_0$, $5.86{\times}10^{-5}\;A/cm^2$), Michaelis constant ($K_M$, $1.68{\times}10^{-3}$ M) and many others showed that pine peroxidase discharges the role of catalyst quantitatively on the electrode surface. Those proved that the practical use of pine peroxidase is promising in place of the marketed.
Effects of pine needle on lipid composition and TBARS(thiobarbituric acid reactive substances) were investigated in rat fed high cholesterol. Plasma total cholesterol showed a tendency to decrease in pine needle group(P<0.05), however plasma HDL-cholesterol and liver total cholesterol showed no significantly different(P>0.05). Contents of plasma TBARS ranged from 23.15 nmol/ml to 35.38 nmol/ml and pine needle feeding resulted in a decrease in plasma TBARS(P<0.05). Contents of TBARS in liver showed a tendency to increase in the cholesterol group, however these values were lowered by pine needle feeding(P<0.05). Activity of glutathione peroxidase in liver alues showed no significantly different among treatment groups (P>0.05).
With polyacrylamide gel electrophoresis, peroxidase isoenzyme patterns in the terminal buds of grafted, 20-year-old Pinus elliottii trees were compared between abundant-flowering and poor-flowering trees during the period of female flower bud initiation. A total of nine peroxidase bands were observed in the terminal buds. The total amount of peroxidase enzymes in slash pine buds showed no significant difference between the abundant-flowering and poor-flowering trees. However, the fifth band from the gel front was observed in all the samples of abundant-flowering trees throughout the sampling period (July 8 to September 17), while this band was absent in most of the poor-flowering trees.
Pine needles are known as a traditional medicine and their ingestion has been shown to be beneficial to human beings. Following induction of the neoplastic process in rats by azoxymethane (AOM), we determined the effects of pine needle supplementation on colon carcinogenesis and on antioxidant systems in the blood and liver. Five week old male Fisher 344 rats were injected with AOM (15 mg/kg) once a week for two weeks. After the second injection, 18 rats were randomly assigned into two groups and were fed a casein-based high-fat diet (120 g fat and 1 g cholesterol/kg diet) with or without pine needle powder (10%w/w). After 6 weeks, rats receiving pine needle powder showed a 40% lower incidence of the number of colonic preneoplastic lesions (aberrant crypts) and a 52% lower incidence of aberrant crypt foci (p<0.01). A significantly elevated level of erythrocyte catalase activity was observed in the pine needle supplemented group (17.4$\pm$1.1 vs. 24.5$\pm$1.5, p<0.01). Pine needle supplementation also increased liver glutathione peroxidase activity (7.5$\pm$0.6 vs. 14.6$\pm$0.6, p<0.01). Other antioxidant parameters such as erythrocyte glutathione peroxidase, liver catalase activity, and plasma total antioxidant potential (TRAP), showed no statistical differences between the two groups. Our data demonstrate that pine needle supplementation improves the antioxidant system and suppresses the formation of colonic preneoplastic lesions in AOM-treated rats. This result provides additional insights into the chemo-preventative properties of pine needles.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.32
no.6
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pp.926-930
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2003
Effects of powdered pine needle (Pinus densiflora seib et Zucc) on serum and liver lipid composition and antioxidative capacity were investigated in rat fed high oxidized fat. Sixty male Sprague-Dawley rats weighing 161.25$\pm$2.51 g were blocked into four groups according to body weight and raised seven weeks with basal diet (normal group, I), basal diet and 10% oxidized fat (control group, II), basal diet, 10% oxidized fat and 2% powdered pine needle (2% powdered pine needle group, III) and basal diet, 10% oxidized fat and 3% powdered pine needle (3% powdered pine needle group, IV). Food intake, body weight gain and feed efficiency were not significantly different among oxidized fat diet groups. The level of plasma total cholesterol showed a tendency to decrease, whereas the plasma HDL-cholesterol concentration revealed a tendency to increase in pine needle groups. However plasma triglyceride level showed no significant differences in the treatment groups. Intake of the oxidized fat has increased the levels of liver cholesterol and triglyceride. The powdered pine needle showed a tendency to decrease thiobarbituric acid values in plasma and liver. The pine needle samples have also decreased the plasma GOT and GPT activities, whereas they have increased the liver glutathione peroxidase activity.
Pine(Pinus densiflora Sieb et Zucc.) is one of rhe popular plant drugs which has been used as a medicine in Asia. To investigate the effect of pine needle extract (PNE) on oxygen radicals and their scavenger enzymes in brain membranes of Sprague- Dawley (SD), make SD rats were fed basic diets(control group), and experimental diets (PNE group) with 0.5 and 1.0% of PNE 6 weeks. Mitochondrial hydroxyl radical levels in brain of 0.5%-PNE and 1.0%-PNE groups were significantly inhibited to 30% and 25%, respectively, and microsomal hydrogen peroxide levels in brain of 0.5%-PNE and 1.0%-PNE groups were significantly inhibited to 15% compared with control group. Cytosolic superoxide rdical levels in 1.0%-PNE group were significantly inhibited to 20% compared with control group. Lipid peroxide(LPO) levels in brain mitochondria of 0.5%-PNE and 1.0%-PNE groups were significantly lower(25% and 35%) than that in control group. Mn-superoxide disumtase (SOD) activities in brain of 0.5%-PNE and 1.0%-PNE groups were significantly higher(18% and 12%) than those in control groups, but Cu,Zn-SOD activities in brain of 0.5%-PNE were significantly activated to 15% compared with control group. Glutathione peroxidase(GSHPx) activities in brain of 1.5%-PNE and 1.0% PNE groups were significantly higher(14% and 12%) than those in control group. These results suggest that more beneficial effects such as inhibition of oxygen radicals and lipid peroxide(LPO). and oncreases of scavenger enzymes in brain membranes of SD rats may be effectively modulated by administration of pine needle extract (PNE)
The peroxidase activity was localized cytochemically to get an insight into its precise function in lignin biosynthesis. In this work, cerium chloride ($CeCl_3$) was used as a trapping agent for hydrogen peroxide ($H_2O_2$) generated from peroxidase. Seasonal variation of peroxidase activities in cambial region of Populus, Pinus, and Ginkgo was investigated at subcellular levels. Under transmission electron microscopy, electron dense deposits of cerium perhydroxide formed by reaction with $H_2O_2$ were observed in cambium and its immediate derivatives. The staining with $CeCl_3$ in cambium varied with growth seasons. The strongest $H_2O_2$ accumulation, regardless of tree species, appeared in May. Staining pattern of $CeCl_3$ in the cambium of poplar indicated that the production of peroxidase started in March before the opening of buds and reached the highest in May and then declined in August. Ginkgo and Pinus showed relatively late generation of $H_2O_2$ production when compared with Populus. Although Ginkgo and Pinus are classified into gymnosperms, however, the generation of peroxidase production and its duration was different from each other. Little staining appeared in all the tree samples collected in September before falling the leaves.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.30
no.4
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pp.679-683
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2001
This study was purposed to compare the activity of alcohol dehydrogenase and antioxidative effects of several plant extracts in the alcohol-treated rat liver. Sprague-Dawley rat weighing about 200 g were divided into the following 6 groups : normal, alcohol group and 4 different plant extracts administrated groups(Soybean sprout, Pine needle, Lentinus edodes, acanthopanacis cortex). Each plant extract was administrated orally by 200mg/kg b.w./day for 8 days before the alcohol treatment (5 g of 30% alcohol /kg b.w. by i.p.injection). All rats were sacrificed at 90 min after the alcohol treatment. The alcohol concentrations in serum of Soybean sprout and pine needle group were significantly lower than the Lentinus edodes and Acanthopanacis cortex group. The activity of alcohol dehydrogenase in the hepatic cytosol of Soybean sprout and Pine needle group was also significantly higher than the alcohol and the other groups However, the activity of catalase seemed not to be affected, although the extract groups showed slightly higher activities of catalase than the alcohol group. These results may indicate that the extracts of Soybean sprout and Pine needle were relatvely effective on the alcohol degradation. the activity of blutathione-peroxidase and lipid peroxidaton of all of the extract groups were significantly lower than the activity of alcohol group. These results can suggest that all of the use plant extracts more or less have an antioxidative effect on the alcohol-induced oxidation and especially, extracts of Soybean sprout and Pine needle have an stimulating effect on the alcohol absorption and degradation.
The purpose of this study was to evaluate the protective effect of $PineXol^{(R)}$ on $H_2O_2$-induced cell death in SK-N-MC cells, and in early stage focal ischemia rodent model. SK-N-MC cells were pre-treated with $200{\mu}M$$H_2O_2$ or various concentrations of $PineXol^{(R)}$ (10, 30, and 50 pg/mL) for 24 h, and then exposed to $H_2O_2$ for 3 h. Cell death was assessed by the CCK-8 assay, reactive oxygen species (ROS) assay, and lactate and dehydrogenase (LDH) release assay. Superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), and glutathione peroxidase (GPx) expressions were also analyzed by western blotting. Focal ischemia rodent model was used as the in vivo model, and different concentrations of $PineXol^{(R)}$ (1, 10, and 100 mg/kg) were administered. One week after administration, reduction of infarct volume was analyzed by TTC staining. Cell viability of $H_2O_2$-treated SK-N-MC cells significantly increased by pre-treatment of $PineXol^{(R)}$ (p<0.05). $PineXol^{(R)}$ pre-treatment also induced significant decrease of ROS and LDH expressions. However, $PineXol^{(R)}$ did not affect the infarct volume. These results suggest that $PineXol^{(R)}$ has significant neuroprotective effect in vitro, but statistical significance was not confirmed in the in vivo focal ischemia model.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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