Epidermal growth factor (EGF) is known to play key roles in skin regeneration and wound-healing. Here, we demonstrate that Pep2-YAC, a tripeptide covering residues 29-31 in the B loop of EGF, promotes the proliferation of HaCaT keratinocytes with activity comparable to EGF. The treatment of HaCaT cells with Pep2-YAC induced phosphorylation, internalization, and degradation of EGFR and organization of signaling complexes, which consist of Grb2, Gab1, SHP2, and PI3K. In addition, it stimulated the phosphorylation of ERK1/2 at Thr 202/Tyr 204 and of Akt1 at Ser 473 and the nuclear translocation of EGFR, STAT3, c-Jun, and c-Fos. These results suggest that Pep2-YAC may be useful as a therapeutic agent for skin regeneration and wound-healing as an EGFR agonist.
Marine organisms are sources of many bioactive compounds, such as essential fatty acids, essential amino acids, vitamins, and minerals, making them useful candidates for the production of safe bioactive substances. They also synthesize glutamic acid, which can be used to produce γ-aminobutyric acid (GABA), the major inhibitory neurotransmitter in the central nervous system (CNS), via fermentation with Lactobacillus brevis BJ-20. This study investigated the degree to which fermented sea tangle (FST) inhibits enzymes such as acetylcholine esterase (AChE) and prolyl endopeptidase (PEP) and affects memory of normal mice using the T-maze test. FST inhibited more than 90% of AChE at 1 mg/mL and 50% of PEP at 8 mg/mL. Oral FST (100 mg/kg) significantly improved performance of normal mice on the T-maze. Therefore, sea tangle fermented with L. brevis BJ20 effectively contributes to memory improvement and might be a useful functional food ingredient.
Many proteins with poor transduction efficiency were reported to be delivered to cells by fusion with protein transduction domains (PTDs). In this study, we investigated the effect of levosulpiride on the transduction of PEP-1 ribosomal protein S3 (PEP-1-rpS3), and examined its influence on the stimulation of the therapeutic properties of PEP-1-rpS3. PEP-1-rpS3 transduction into HaCaT human keratinocytes and mouse skin was stimulated by levosulpiride in a manner that did not directly affect the cell viability. Following 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA)-induced inflammation in mice, levosulpiride alone was ineffective in reducing TPA-induced edema and in inhibiting the elevated productions of inflammatory mediators and cytokines, such as cyclooxygenase-2, inducible nitric oxide synthase, interleukin-6 and -1${\beta}$, and tumor necrosis factor-${\alpha}$. Anti-inflammatory activity by PEP-1-rpS3 + levosulpiride was significantly more potent than by PEP-1-rpS3 alone. These results suggest that levosulpiride may be useful for enhancing the therapeutic effect of PEP-1-rpS3 against various inflammatory diseases.
Min Jae Kim;Tae Jin Kim;Yun Ji Kang;Ji Yeon Yoo;Jeong Hwan Kim
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.33
no.2
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pp.211-218
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2023
A cryptic plasmid (pTH32) was characterized from Tetragenococcus halophilus 32, an isolate from jeotgal, Korean traditional fermented seafood. pTH32 is 3,198 bp in size with G+C content of 35.84%, and contains 4 open reading frames (ORFs). orf1 and orf2 are 456 bp and 273 bp in size, respectively, and their translation products showed 65.16% and 69.35% similarities with RepB family plasmid replication initiators, respectively, suggesting the rolling-circle replication (RCR) mode of pTH32. orf3 and orf4 encodes putative hypothetical protein of 186 and 76 amino acids, respectively. A novel Tetragenococcus-Escherichia coli shuttle vector, pMJ32E (7.3 kb, Emr), was constructed by ligation of pTH32 with pBluescript II KS(+) and an erythromycin resistance gene (ErmC). pMJ32E successfully replicated in Enterococcus faecalis 29212 and T. halophilus 31 but not in other LAB species. A pepA gene, encoding aminopeptidase A (PepA) from T. halophilus CY54, was successfully expressed in T. halophilus 31 using pMJ32E. The transformant (TF) showed higher PepA activity (49.8 U/mg protein) than T. halophilus 31 cell (control). When T. halophilus 31 TF was subculturd in MRS broth without antibiotic at 48 h intervals, 53.8% of cells retained pMJ32E after 96 h, and only 2.4% of cells retained pMJ32E after 14 days, supporting the RCR mode of pTH32. pMJ32E could be useful for the genetic engineering of Tetragenococcus and Enterococcus species.
Sim Dea Sik;Rho Sam Woong;Lee Jin Woo;Lee Eun A;Cho Chong Woon;Bae Hyun Su;Shin Min Kyu;Hong Moo Chang
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.17
no.3
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pp.684-692
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2003
The herbal extract(YMT_02) is a modified extracts from Yukmijihwang-tang(YMJ) to promote memory-enhancing. The YMJ extracts has been widely used as replenishing yin and tonifying the kidneys herbal medicine for hundred years ia Asian countries. The purpose of this study is to: 1) quantitatively evaluate the memory-enhancing effect of YMT_02 by passive avoidance test, 2) statistical evaluation of candidate gene expression (pentraxin. PEP-19, transthyretin) in rat hippocampus. The hippocampi of YMT_02 and control group were dissected and mRNA was further purified. After synthesizing cDNA using oligo-dT primer, the cDNA were applied to Real Time PCR. The results were as follows : 1) passive avoidance test showed enhancing memory retentin by YMT_02 treatment, 2) expression of pentraxin, that accelerate degenerating of neuronal cell, was significantly decreased, 3) the mRNA of genes that has been known to be associated with protecting neuronal cell degeneration, such as PEP-19 and transthyretin, were significantly increased upon YMT_02 treatment. From above results, the administration of YMT_02 which tonify the function of Kidneys could enhance the ability of memory and learning. In addition, the administration of YMT_02 enhance memory retention through modulating particular gene (pentraxin, PEP-19, transthyretin) expressions in hippocampu.
Objective: This study was conducted to investigate the effects of dietary multi-strain probiotic (MSP) (Bacillus coagulans Unique IS2 + Bacillus subtillis UBBS14 + Saccharomyces boulardii Unique 28) on performance, gut morphology and expression of nutrient transporter related genes in broiler chickens. Methods: A total of 256 (4×8×8) day-old CARIBRO Vishal commercial broiler chicks of uniform body weight were randomly distributed into four treatments with 8 replicates each and having eight chicks in each replicate. Four dietary treatments were T1 (negative control-basal diet), T2 (positive control-antibiotic bacitracin methylene disalicylate at 20 mg/kg diet), T3 (MSP at 107 colony-forming unit [CFU]/g feed), and T4 (MSP at 108 CFU/g feed). Results: During 3 to 6 weeks and 0 to 6 weeks, the body weight gain increased significantly (p<0.05) in T3 and T4 groups. The feed intake significantly (p<0.05) reduced from T1 to T3 during 0 to 3 weeks and the feed conversion ratio also significantly (p<0.05) improved in T3 and T4 during 0 to 6 weeks. The humoral and cell mediated immune response and the weight of immune organs were also significantly (p<0.05) improved in T3 and T4. However, significant (p<0.05) dietary effects were observed on intestinal histo-morphometry of ileum in T3 followed by T4 and T2. At 14 d post hatch, the relative gene expression of glucose transporter (GLUT5), sodium-dependent glucose transporter (SGLT1) and peptide transporter (PepT1) showed a significant (p<0.05) up-regulating pattern in T2, T3, and T4. Whereas, at 21 d post hatch, the gene expression of SGLT1 and PepT1 was significantly (p<0.05) downregulated in MSP supplemented treatments T3 and T4. Conclusion: The supplementation of MSP at 107 CFU/g diet showed significant effects with improved performance, immune response, gut morphology and expression of nutrient transporter genes. Thus, the MSP could be a suitable alternative to antibiotic growth promoters in chicken diets.
Park, Ji-Eun;Yi, Hoon-Bok;Kim, Chang-Gi;Jeong, Soon-Chun;Yoon, Won-Kee;Park, Kee-Woong;Lee, Bum-Kyu;Kim, Hwan-Mook
Korean journal of applied entomology
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v.46
no.3
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pp.343-348
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2007
To assess the environmental risks of transgenic chili pepper with PepEST gene on non-target organisms before it exposes to the agro-ecosystem environments, we conducted the three sets of green peach aphids (Myzus persicas S.) life table experiment under laboratory conditions (Temp. $25^{\circ}C$, R.H. 50-70%, Photoperiod L16 : D8) in series during 2005-2006. We measured the net reproductive rate ($R_0)^*$, the intrinsic rate of increase ($r_m$), the mean generation time ($T_c$), $fecundity^*$, life span, and reproduction period between non-transgenic chili peppers and transgenic chili peppers, respectively. The life span of green peach aphids from three sets was 31, 27, 25 days, and the period of life span was similar to the general average length of green peach aphids, 25-29 days. Although the first reproduction of transgenic pepper was similar to the non transgenic pepper (P>0.05), the fecundity and the net reproductive rate ($R_o$) by using Jackknife method of transgenic pepper were lower than those of non transgenic pepper (P<0.05). Conclusively, we observed the adverse effect from our results but we should execute further experiments to confirm the results at the fields with the similar way.
One hundred and seventy crude drugs were screened for prolyl endopeptidase (PEP) inhibitors. Among them, 80% methanolic extract of 18 medicinal plants such as Polygonum cuspi data, Sanguisorba officinalis, Eugenia caryophyllata, Rubus coreanus, Cinnamomum cassia (Cassiae Cortex and Cinammomi Ramulus), Rheum palmatum, Ulmus pumila, Sorbus commixta, Areca catechu, Uncaria sinensis, Terminalia chebula, Caesalpinia sappan, Nelumbo nucifera, Machilus thunbergii, Paeonia moutan, Elscholtzia patrini and Cynomorium coccineum inhibited more than 70% of PEP activity at a concentration of 40 ppm. The active principles of P. moutan, M. thunbergii, T chebula, A. catechu, S. commixta, R. palmatum, R. coreanus, E. caryophyllata and P. cuspidata were transferred into organic solvents, which showed more than 75% inhibition at 5 ppm.
Allergic rhinitis (AR), one of the most common inflammatory diseases, is caused by immunoglobulin E (IgE)-mediated reactions against inhaled allergens. AR involves mucosal inflammation driven by type 2 helper T (Th2) cells. Previously, it was shown that the Streptococcus pneumoniae pep27 mutant (Δpep27) could prevent and treat allergic asthma by reducing Th2 responses. However, the underlying mechanism of Δpep27 immunization in AR remains undetermined. Here, we investigated the role of Δpep27 immunization in the development and progression of AR and elucidated potential mechanisms. In an ovalbumin (OVA)-induced AR mice model, Δpep27 alleviated allergic symptoms (frequency of sneezing and rubbing) and reduced TLR2 and TLR4 expression, Th2 cytokines, and eosinophil infiltration in the nasal mucosa. Mechanistically, Δpep27 reduced the activation of the NLRP3 inflammasome in the nasal mucosa by down-regulating the Toll-like receptor signaling pathway. In conclusion, Δpep27 seems to alleviate TLR signaling and NLRP3 inflammasome activation to subsequently prevent AR.
The herbal extract (YMT_02) is a modified herbal extracts from Yukmijihwangtang (YMJ) to promote memory-enhancing. The YMJ extracts has been widely used as an anti-aging herbal medicine for hundred years in Asian countries. The purpose of this study is to; 1) quantitatively evaluate the memory-enhancing effect of YMT_02 by hehavior task, 2) identify candidate genes responsible for enhancing memory by cDNA microarray and 3) assess the anti-oxidant effect of YMT_02 on PC12 cell. Memory retention abilities are addressed by passive avoidance task with Sprague-Dawley (SD) male rat. Before the training session, the rats are subdivided into four groups and administrated with YMT_02, Ginkgo biloba, Soya lecithin and normal saline for 10 days. The retention test was performed. 24 hours after the training session. The retention time of the YMT_02 group was significantly (p<0.05) delayed $({\sim}100%)$, whereas Ginkgo biloba and Soya lecithin treatment delayed 20% and 10% respectively. The hippocampi of YMT_02 and control group were dissected and mRNA was further purified. After synthesizing cDNA using oligo-dT primer, the cDNA were applied and mRNA was further purified. After synthesizing cDNA using oligo-dT primer, the cDNA were applied to Incyte rat GEMTM 2 cDNA microarray. The microarray results show that prealbumin(transthyretin), phosphotidy lethanolamine N-methyltransferase, and PEP-19 are expressed abundantly in the YMT_02 treated group. Especially, PEP-19 is a neuron-specific protein, which inhibits apoptotic processes in neuronal cell. On the other hand, transcripts of RAB15, glutamate receptor subunit 2 and CDK 108 are abundant in control group. Besides, neuronal genes involved in neuronal death or neurodegeneration such as neuronal-pentraxin and spectrin are abundantly expressed in control group. Additionally, the YMT_02 shows an anti oxidative effect in the PC12 cell. The list of differentially expressed genes may implicate further insight on the action and mechanism behind the memory-enhancing effect of herbal extracts YMT_02, for example, anti-apoptotic, anti-oxidative, and neuroprotective effects.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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