Alginate and alginate-derived oligomannuronate enhanced penicillin production in shake flask and fermentor cultures of Penicillium chrysogenum Wis 54-1255 (containing a single copy of the penicillin gene cluster) and in the high producter strain P. chrysogenum AS-P-99 (containing multiple copies of the penicillin gene cluster). Alginate was not used as a single carbon source by P. chryogenum. The stimulatory effect on penicillin production was observed in a defined medium and, to a lower extent, in a complex production medium containing corn steep liquor. Alginate-supplemented cells showed higher transcript levels of the three penicillin biosynthetic genes, pcbAB, pcbC, and penDE, than cells grown in the absence of alginate. The promoters of the pcbAB, pcbC, and penDE genes were coupled to the reporter lacZ gene and introduced as monocopy constructions in P. chrysogenum Wis 54-1225 npe10 by targeted integration in the pyrG locus; the reporter ${\beta}$-galactosidase activity expressed from the three promoters was stimulated by alginate added to the culture medium of the transformants. These results indicate that the stimulation of penicillin production by alginate was derived from an increase in the transcriptional activity of the penicillin biosynthesis genes. The induction by alginate of the transcription of the three penicillin biosynthetic genes is good example of the coordinated induction of secondary metabolism genes by elicitors of plant (or microbial) origin.
Class Ⅲ chitin synthases in filamentous fungi are important for hyphal growth and differentiation of several filamentous fungi. A genomic clone containing the full gene encoding Chs4, a class Ⅲ chitin synthase in Penicillium chrysogenum, was cloned by PCR screening and colony hybridization from the genomic library. Nucleotide sequence analysis and transcript mapping of chs4 revealed an open reading frame (ORF) that consisted of 5 exons and 4 introns and encoded a putative protein of 915 amino acids. Nucleotide sequence analysis of the 5′flanking region of the ORF revealed a potential TATA box and several binding sites for transcription activators. The putative transcription initiation site at -716 position was identified by primer extension and the expression of the chs4 during the vegetative growth was confirmed by Northern blot analysis. Amino acid sequence analysis of the Chs4 revealed at least 5 transmembrane helices and several sites for past-transnational modifications. Comparison of the amino acid sequence of Chs4 with those of other fungi showed a close relationship between P chrysogenum and genus Aspergillus.
Pemicillum chrysogenum의 건전균(PC)과 바이러스감염균(PCV)을 사용하여 cellulase의 존재여부와 그 활성 정도를 알아보기 위해 밀기울에 배양하여 효소액으로 만들어 균의 생장에 따른 배양액의 최적 pH와 최적 배양일 및 Na-CMC 기질액을 이용하여 효소액의 활성에 미치는 최적 pH, 온도, 및 효소농도를 알아보고자 본 실험에 착수하여 다음과 같은 결과를 얻었기에 이에 보고하는 바이다. 1) PC외 PCV균의 생장에 따른 배양액의 최적 pH는 균주 접종전 배지와 작은 pH6.4로 나타났다. 2) 최적 배양일은 최적 pH를 나타낸 배양6일이 가장 높은 활성을 나타냈고, PCV는 PC의 50%의 활성이었다. 3) PC균 배양 효소액이 기질과 반응시 효소활성이 가장 높은 최적 pH는 pH5.0으로 나타났고, PCV 균 배양 효소액에서는 pH 6.0으로 나타났다. 4) PC와 PCV균 배양효소액 모두 기질과 반응시 효소 활성이 가장 높은 최적 온도는 $50^{\circ}C$로나타났다. 이상의 결과에서 cellulase의 활성도는 PC건전균이 PCV감입균보다 높은 활성을 나타낸 것을 알 수 있었다.
자외선, $methyl-bis(\beta-chloroethyl)$ amine 등과같은 물리적 및 화학적인 mutagenic agents를 처리함으로써 페니실린을 생산하는 많은 mutants를 분리하고 그 균주들의 페니실린 생산율을 측정하여 우수한 페니실린 생산균주의 개발을 위한 연구가 진행되었다.(중략)
시판 유통 중인 건조 인삼류(백삼 24점, 홍삼 26점) 포장 제품을 수집하여 곰팡이 발생 조사를 수행하였다. 백삼과 홍삼은 각각 50%와 46%의 시료에서 곰팡이가 검출되었고 검출 시료의 평균 곰팡이 오염도는 각각 0.5와 0.2 log10 CFU/g이었다. 백삼에서는 Penicillium polonicum, P. chrysogenum, Rhizopus microsporus가 각각 18.2%로 우점하였으나 홍삼은 Aspergillus spp.이 87.6%로 우점하였으며 이 중 A. chevalieri가 50.0%로 가장 높았다. 이 중 독성 종으로 알려진 P. polonicum, P. chrysogenum, P. melanoconidium, A. chevalieri 균주의 citrinin 독소 생성 가능성을 분석한 결과, 13 균주 모두 독소 유전자가 검출되지 않았다. 이 결과는 조사한 시료의 곰팡이독소 오염 위험은 매우 낮지만, 건조 인삼류에 곰팡이 오염이 가능함을 보여준다.
Celluloytic microorgnasims were isolated form the various sources and four of them were identified as Trichoderma roningi, Aspergillus niger, Penicillium chrysogenum, and Streptomyces sp. The induction of extracellular5 cellulase of these species in the liquid culture media containing carboxymethylcellulose (CMC) or Avicel as inducer showed that CMC was a better effective inducer for the production of CMCase(Cx cellulase component) as well as Avicelase(C$_{1}$ cellulase component) than Avicel. It is believed that certain hydrolysis products of cellulose(CMC) could serve as an inducer for an enzyme synthesis. In T. roningi, Asp. niger, and Strptomyces sp., the optimum temperature of CNCase on CMC-culture medium was 50.deg. but temperature around 40.deg.C was found to be optimum for the activities of CMCase prepared from P.ehrysogenum. The optimum temperature for Avicelase activitiles on Avicel-culture media of T. roningi and P. chrysogenum was $40{\circ}C$ whereas temperature $50{\circ}C$ was found to be optimum for Avicelase from A.niger and Streptomyces sp. The optimal activities of these CNCase and Avicelase prepared from. T. ronigi, Pen.chrysogenum and Streptomyces sp. were found similarly to be at pH's around 5.4 and 6.0 while pH 4.8 was optimum for the activities of CMCase and Avicelase from A.niger, indicating that A.niger in acidic media would yield an enzyme of high activity.
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-1
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pp.85-87
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2003
$\beta$-Lactams are historically and clinically representative antibiotics used for therapeutic purposes. In early days, penicillin (penam antibiotic) and cephalosporin (cephem antibiotic) were found in culture broth of two different filamentous fungi, Penicillium chrysogenum and Acremonium chrysogenum. Since 1970, a variety of $\beta$-lactam structures have been discovered from bacterial cultures including Streptomyces species, which are known as cephamycin, cephabacin (cephem antibiotics), clavulanic acid (oxopenam antibiotic), thienamycin (carbapenem antibiotic), and sulfazecin (monobactam antibiotic). (omitted)
A total of twenty-nine species and one species variety belonging to 12 genera was isolated from 30 samples of molasses on 1% glucose(10 genera, 22 species and 1 variety) and 50% sucrose(7, 21 and 1) Czapek's agar at $25^{\circ}C$ media. Aspergillus, Mucor, Mycosphaerella and Penicillium were the most common genera on the two types of media. From the above genera, the most prevalent species were: Aspergillus flavus, A. fumigatus, A. niger, Mycosphaerella tassiana, Penicillium chrysogenum, P. oxalicum and P. purpurogenum. Also, some species were only isolated on 50% sucrose such as Eurotium amstelodami, E. chevalieri, E. repens, Humicola fuscoatra, Penicillium aurantiogriseum and P. puberulum. About 65 fungal isolates isolated from 50% sucrose agar were tested for their ability to produce invertase enzyme in liquid medium and 93.8% of the isolates could produce this enzyme. From the positive isolates, 32 showed high invertase activity, 21 had moderate activity and the remaining 8 isolates were of weak activity. Sixty isolates of Aspergillus, Emericella, Eurotium, Mycosphaerella and Penicillium from the preceding study were screened for the presence of their respective mycotoxins. Larva of brine shrimp(Artema sauna L.) were used for toxicity test of the fungal crude extracts. Three isolates out of 60 tested were toxic. Using thin-layer chromatographic technique, 5 different known mycotoxin were detected aflatoxins : B1, B2, G1, G2 and citrinin.
Beef luncheon meat is one of the most popular meals in several countries in the world including Egypt. Thirty one fungal species and 3 species varieties were recovered from 30 samples of beef luncheon meat collected from different supermarkets in Qena. Alternaria, Aspergillus, Emericella, Mucor, Mycosphaerella, Penicillium and Rhizopus were the most common genera on the two types of media. From the above genera, the most prevalent species were Alternaria alternate, Aspergillus flavus, A. fumigatus, A. niger, A. terreus, Emericella nidulans, Mucor racemosus, Mycosphaerella tassiana, Penicillium chrysogenum and Rhizopus stolonifer. Screening of fungi for their abilities to produce lipase enzyme showed that, ten isolates represented 32.26% of total isolates appeared high lipase production, while sixteen isolates (51.61%) were moderate and 5 isolates (16.13%) were low producers. Aspergillus niger, Fusarium oxysporum and Nectria haematococca produced the highest amount of lipase enzyme, so these fungi were used in further studies. The incorporation of five food preservatives (Disodium phosphate, sodium benzoate, citric acid, potassium sorbate and sodium citrate) individually in the culture medium of lipase production exhibited an inhibitive effect on the mycelial growth and enzyme production by Aspergillus niger, Fusarium oxysporum and Nectria haematococca.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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