An efficient protocol for cryopreservation of madder hairy root cultures has been developed using droplet-vitrification. In previous study, combining loading solution C4 (35% PVS3) and vitrification solution B5 (80% PVS3) was the most effective method. In this study, we tried three types of vitrification solution, B5, A3 (90% PVS2, on ice), and A5 (70% PVS2, on ice). Combining loading solution C4 and vitrification solution A5 (on ice) showed the best regeneration rate in this study. Histological changes of the cells within the hairy root of madder were also observed in different steps. The cells from the hairy roots of the control treatment were full and intact with different size of vacuoles and obvious cell nucleus having a dark nucleolus. After the stage of preparing for cryopreservation (after preculturing, loading, followed by dehydration solution A5 or B5), intercellular spaces had become distinct, and within cells, the cytoplasms had become denser and week plasmolyses had appeared. The cell plasmolyses were much more apparent and we measured the degree of plasmolysis by calculating, the area of cell/the area of cytoplasm. The value of plasmolysis degree was the highest in the combination of preculture, loading solution C4, and dehydration solution A5, 1.97. Because the highest regeneration rates appeared in the treatment of A5 for 20 min, we could assume that the optimal degree of plasmolysis for cryopreservation might be around 1.97. The changes in cell structure during cryopreservation might be a useful basis for the development of a proper long-term preservation method for madder germplasms.
Chong Hoe Park;Dae Hyun Shin;Sock Sung Yun;Moo Soon Park;Hong Lee
Journal of the Korean Chemical Society
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v.30
no.3
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pp.289-295
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1986
Spectroscopic studies have been carried out on the metachromatic behavior of methylene blue(MB) and acridine orange(AO) in the presence of polyvinylsulfate(PVS) and polystyrenesulfonate(PSS) The characteristic changes of meta-band with the change of P/D value are discussed in terms of stacking theory. It has been found that the stacking effect in the PVS-dye system is stronger than that in the PSS-dye system and that MB shows stronger stacking effect than AO. A stacking model and dimension of bound dyes on the surface of polymer chain is proposed on the basis of the previously suggested model of dimer found in the aqueous solution of planar aromatic dyes. The proposed model is found to be reasonable in accordance with the experimental results obtained by various workers.
This study investigated the effects of cryopreserving Chrysanthemum morifolium cv. 'White ND' shoot tips for eliminating viroids. As a result, smaller shoot tips (2-3 LP, 1mm) showed a better survival and regrowth than larger shoot tips (4-5 LP, 1.5mm). The most effective vitrification solution for survival and regrowth was PVS3, which induced a high survival rate after 60 minutes of incubation. For a high efficiency, the best pre-treatment condition for vitrification was incubation in 88 mM sucrose for 24 h, 0.3M sucrose for 16 h, 0.5 M sucrose for 6 h, and 0.7 M sucrose for 3 h, in a descending order. The ploidy levels were the same in the mother plants and following cryopreservation, which confirmed the absence of any gene mutation.
Park Jun-Hong;Pham Tuan-Anh;Lee Jae-Jong;Kim Dong-Pyo
Polymer(Korea)
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v.30
no.5
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pp.407-411
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2006
The SiC-based ceramic nanopatterns were prepared by placing polydimethylsiloxane (PDMS) mold from DVD master on the spincoated polyvinylsilaeane (PVS) or allylhydridopolycaybosilane (AHPCS) as ceramic precursors to fabricate line pattern via UV-nanoimprint lithography (UV-NIL), and subsequent pyrolysis at $800^{\circ}C$ in nitrogen atmosphere. As the dimensional change of polymeric and ceramic patterns was comparatively investigated by AFM and SEM, the shrinkage in height was 38.5% for PVS derived pattern and 24.1% for AHPCS derived pattern while the shrinkage in width was 18.8% for PVS and 16.7% for AHPCS. It indicates that higher ceramic yield of the ceramic precursor resulted in less shrinkage, and the strong adhesion between the substrate and the pattern caused anisotropic shrinkage. This preliminary work suggests that NIL is a promissing route for fabricating ceramic MEMS devices, with the development on the shrinkage control.
This study was conducted to investigate effects of cryopreservation by vitrification on the seed germination rate and growth and physiological properties of seedlings of Maackia amurensis. Cryopreservation significantly decreased the germination rate of seeds of M. amurensis, but the reduction of germination rate was mitigated by the treatment of cryoprotectant (plant vitrification solution, PVS2) before plugging into liquid nitrogen and fast thawing rate after cryopreservation. Long-term PVS2 exposure decreased seed germination rate, whereas cryopreservation time didn't have influence on seed germination rate. In addition, growth and physiological properties of seedlings were not affected by PVS2 exposing time and cryopreservation time. Therefore cryopreservation could be widely used as a technique of long-term ex situ conservation without any damage and deterioration of cells or tissues of the forest seeds. However, in order to increase the effect of cryopreservation, we have to develope the lower toxic cryoprotectant and suitable techniques to the structural or chemical properties of a variety of seeds.
The addition of poly(styrenesulfonate) (PSS) to $Ru(bpy)_3^{2+}$ solutions shifted the emission peak by 3 nm to red, and increased emission intensity by 1.8 times. By contrast, poly(vinylsulfonate) (PVS) had little effect on the fluorescence spectrum. The effects of PSS on the spectral properties of $Ru(bpy)_3^{2+}$, were attributed to the presence of a hydrophobic phenyl group in PSS, which interact with $Ru(bpy)_3^{2+}$ by, at least in part, hydrophobic effect. The binding constant of $Ru(bpy)_3^{2+}$ to PSS in 0.1 M NaCl was $6{\times}10^4\;M^{-1}$, and this value was about $10^3$ times higher than those of methyl viologen ($MV^{2+}$) and $Cu^{2+}$. The Stern-Volmer constants of emission quenching of $Ru(bpy)_3^{2+}$ by $MV^{2+}$ and $Cu^{2+}$ in 0.1 M NaCl solutions were 426 and 40 $M^{-1}$, which correspond to second order rate constants($k_q$) of $1.1{\times}10^9\;and\; 1.0{\times}10^8\;M^{-1}s^{-1}$, respectively. The presence of PSS enhanced $K_{SV's}\;by\;{\sim}50$ times, whereas PVS increased the values only 1-4 times. The large enhancing effect of PSS, despite of lower charge density than PVS, was explained in terms of longer life-time of photoexcited $Ru(bpy)_3^{2+}$ bound to PSS and strong association of $Ru(bpy)_3^{2+}$ to PSS due to a specific interaction involving hydrophobic effect. The variation of $K_{SV's}$ on the concentrations of PVS and PSS were also investigated for $Ru(bpy)_3^{2+}-MV^{2+}\;and \;Ru(bpy)_3^{2+}-Cu^{2+}$ photoredox systems.
Viral diseases have been a major limiting factor threating sustainable potato (Solanum tuberosum L.) production in Pakistan. Surveys were conducted to serologically quantify the incidence of RNA viruses infecting potato; Potato virus X (PVX), Potato virus Y (PVY), Potato virus S (PVS), Potato virus A (PVA), Potato virus M (PVM) and Potato leaf roll virus (PLRV) in two major potato cultivars (Desiree and Cardinal). The results suggest the prevalence of multiple viruses in all surveyed areas with PVY, PVS and PVX dominantly widespread with infection levels of up to 50% in some regions. Co-infections were detected with the highest incidence (15.5%) for PVX and PVS. Additionally the data showed a positive correlation between co-infecting viruses with significant increase in absorbance value (virus titre) for at least one of the virus in an infected plant and suggested a synergistic interaction. To test this hypothesis, glasshouse grown potato plants were challenged with multiple viruses and analyzed for systemic infections and symptomology studies. The results obtained conclude that multiple viral infections dramatically increase disease epidemics as compared to single infection and an effective resistance strategy in targeting multiple RNA viruses is required to save potato crop.
Shin, Youn Ho;Kim, Ki Eun;Kwon, Hae Sik;Yoo, Byung Won;Choi, Jae Young
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.50
no.9
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pp.919-924
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2007
Pulmonary venous stenosis may be congenital or acquired. Regardless of its origin, the prognosis for patients affected with PVS remains poor. There have been many attempts to palliate PVS with little success. This report describes two patients with PVS which became evident after repair of total anomalous pulmonary venous connection. Intravascular stents were successfully implanted, but progressive restenoses in the stents occurred and eventually both of the patients died. The pertinent literature is reviewed.
tRNA and 7SL RNA based antisense vehicles were prepared by inserting conserved anti-viral and anti-viroid domains. Anti-PVS coat protein leader sequence (ACPL) and antistructural antihairpin domain of PSTVd (AHII) were inserted in tRNA cassette; anti- zing finger domain of PVS, AHII and anti hop latent viroid ribozyme were inserted in 7SL RNA gene isolated from A. thaliana. These constructs were shown to be transcribed both, in in vitro and in in vivo conditions. However, it followed from our work that closely linked position of PoIII reference genes and PoIIII antisense genes within T-DNA lead to the impairment of RNA expression in transgenic plants. To assay in vivo transcription of antisense genes, hairy root potato cultures were established using h. tumefaciens A4-24 bearing both, Ri plasmid and PoIII-promoterless plant expression vectors with antisense RNA genes. Expression of antisense RNA in transgenic potato tissues was proven by specific RT-PCR reactions.
Somatic embryos do not survive at exposure to liquid nitrogen temperatures without cryoprotective treatments. A simplified technique which simultaneously induces and cryoprotects embryogenic calli using plant vitrification solution 2 (PVS2) followed by dehydration was developed for the cryopreservation of Soap berry genetic resources. Vitrification is a way of removing the moisture in vegetation through PVS2. The PVS2 vitrification solution consisted of 30% glycerol (w/v), 15% ethylene glycol (w/v), 15% Dimethylsulfoxide (w/v) in B5 medium containing 0.4M sucrose. Two tests were done. The one was to eliminate moisture at $0^{\circ}C$ and the other at $25^{\circ}C$. In both cases the best results came out at a vitrification time of $10{\sim}20$ minutes. It was also found that the survival rate was higher at $0^{\circ}C$ than at $25^{\circ}C$. In particular, the survival rate reached more than 80%. Water-damaged embryos turned brown and stoped growth, but energetic embryos took on a milky hue and show a very vigorous growth rate. Successful cryopreservation of somatic embryos of soapberry can be used to establish in vitro genebanks for long-term conservation of Soapberry genetic resources to complement field genebanks and other in vitro methods already being used.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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