The lectin-binding patterns in the testis of the sexually matured Jindo dog were investigated to study the distribution of glycoconjugates in the seminiferous tubule under light and transmission electron microscopy. Positive reactions to Wheat germ agglutinin(WGA) and Dolichos biflorus agglutinin (DBA) were observed in the Sertoli cell and in the residual body of spermatid with a stronger reaction in the Sertoli cell to the lectins than in the residual body. Strong reactions to Soybean agglutinin(SBA) and Peanut agglutinin(PNA) were observed in the acrosome vesicles of the Golgi- and cap-phase spermatid, while a moderate reaction was observed in the acrosome-phase, maturation-phase spermatid and the residual body. The acrosome area of the spermatid reacted intensively to Griffonia simplicifolia agglutinin( GS-I) when the cell was in the acrosome-phase and maturation-phase, and the same reaction to the GS-I was observed in the residual body. However, the seminiferous tubule did not react to Ulex europeus agglutinin I(UEA-I). The gold-labelling of the Sertoli cells with DBA resulted in positive reactions of the Sertoli cell column and processes when observed under the electron microscopy, while the Golgi-, cap- and acrosome-phase spermatids reacted positively to SBA in the peripheral low-dense area of the acrosome vesicle of spermatid. Based on these results, we concluded that differences in the lectin-binding pattern of the seminiferous tubules were recognized in the Jindo dog compared to other animals.
Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) of muscles extracted with distilled water, saline solution, SDS or Trition X-100 showed simular protein patterns between Hanwoo and Holstein meat, indicating that SDS-PAGE technique may not be useful for the identification between Hanwoo and Holstein meat. Lectine blot analysis of muscle extracted with distilled water demonstrated that Hanwoo and Holstein meat had similar affinities for concanavalin A (Con A), ricinus communis agglutinin (RCA-120), ulex europaeus agglutinin (UEA-1) or peanut agglutinin (PNA) lectins. However, approximately 32.1 kDa component of Hanwoo meat showed high affinity for dolichos biflorus agglutinin (DBA) lectin. On the contrary, high molecular weight components of Holstein meat had the specific affinity for wheat germ agglutinin (WGA) lectin. Hanwoo meat-specific components were observed by lectin staining of heat-denatured meat at 100$^{\circ}C$ for 30 sec. Also, the component of heat-denatured meat at 100$^{\circ}C$ for 30 sec, which was slightly smaller than Hanwoo meat-specific component, was concentrated specifically in Holstein meat.
The mammary gland contains a subpopulation of epithelial cells with large proliferative potentials which are the likely targets for carcinogens. These clonogenic cells can proliferate and differentiate into functional glandular structures. Rat mammary epithelial cells (RMEC) were isolated and characterized in vitro. By flow cytometry of RMEC stained with fluorescein isothiocyanate-peanut agglutinin(PNA) and phycoerythrin anti-Thy-1.1 monoclonal antibody, it was possible to four cell subpopulations from 7-8 week old F344 female rat mammary glands: cells negative to both reagents (B-), PNA-positive cells (PNA+), Thy-1.1-positive cells (Thy-1.1+), and cells positive to both reagents (B+). When single PNA+ cells were isolated and cultured in Matrigel with irradiated (∼50 Gray) 3T3 fibroblast feeder layer, they gave rise to multicellular clonal structures of three types: alveolar, foamy alveolar, and squamous colonies. The developed structures were similar to the mammary glands in vivo. These results suggest that some of PNA+ cells possesses many of the characteristics of multipotent clonogenic stem-like cells.
Objective: This study was carried out to investigate the effects of Hyangsayukgunja-tang extract on indomethacin-induced gastric mucosal lesions of mice. Methods: To evaluate the effects of Hyangsayukgunja-tang extract and Misoprostol, the morphology of gastric mucosa, and the distribution of mucose cells, PNA(Peanut Agglutinin), ICAM(intercellular adhesion molecule), and apoptotic cells were observed. Hyangsayukgunja-tang extract and Misoprostol were intragastric injected to the test groups at hour 72 before and just before indomethacin treatment(HYT-J, HYT-72, M-J, M-72), while the INDO group was injected only with indomethacin and the control group was subcutaneously injected only with saline. Results: The gastric mucosal lesions incresed in the fundus and body of INDO group, but softened in HYT group and M group, the effects were more excellent in the HYT-72, M-72 groups than the HYT-J, M-J groups and in the HYT group than M group. The disappearance of surface and neck mucose cells were shown in INDO group, but softened in HYT group and M group. The mucosal configuration of HYT-72 group was the same as control group. The numerical increase of PNA positive reaction in cytoplasm of perietal cells were appeared in INDO group. The PNA positive reaction in HYT group and Miso-group were shown in surface mucous cells and microvilli of apical surface in chief cells as control group, and were the same as control group in all mucosa of HYT-72 group. The distribution of ICAM positive cells, increased in INDO group, but decreased in M-72 group, and were the same as control group in HYT-72 group. The apoptotic cells, increased noticeably in gastric mucosa of INDO group, decreased in HYT group and M group, and decreased noticeably in HYT-72 group. Conclusions: Hyangsayukgunja-tang extract had excellent effects on indomethacin-induced gastric mucosal lesions.
1. Back ground and purpose An experimental study has done to examine the effect of defense and cure gastric mucasal damage of Mokdan-pijihwang-tang. 2. Methods Mice had intragastric injected with MJ extract before indomethacin treatment which induces homorrhage infarct and erosion artificially. Degree of lipid peroxidation, general morphology, change of mucous cell, the distribution of PNA, ICAM and distribution of apoptotic cell were objected. (Abbreviation) MJ : Mokdanpijihwang-tang, PNA : Peanut Agglutinin, ICAM : Intercellular Adhesion Molecule 3 Results 1) The degree of lipid peroxidation in INDO-group had increased conspicuously than control group. But the degree of lipid peroxidation in MJ-group had decreased than INDO-group and these decline had probability. 2) After indomethacin treatment, hemorrhage infarct and erosion had increased in stomach body. But in MJ-group, the configuration is normal, except the group intragastric injected with MJ extract at hour 24 before indomethacin treatment. 3) Surface mucous cell and neck mucous had disappeared in INDO-group. But in MJ-group tormal distribution had shown like control group except the group intragastric injected with MJ extract at hour 24 before indomethacin treatment. 4) PNA positive reaction had not shown in INDO-group. But medium PNA positive reaction had shown In Mj-group. 5) ICAM positive reacted cell had shown in INDO-group. The decrease of ICAM positive cell were shown than INDO-group. 6) A number of apoptotic cell was distributed in hemorrhagic erosion. A few number of apoptotic cell was distributed in MJ-group except some surface mucous. 4. Conclusion These results suggest that MJ has an effect on cure of gastric mucosal damage.
Ki, Min-Hyo;Paik, Kee-Joo;Lee, Ji-Hyeon;Chung, Hae-Young;Lee, Kyung-Hee;Kim, Kyu-Won;Kim, Nam-Deuk
Archives of Pharmacal Research
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v.21
no.3
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pp.298-304
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1998
Retinoids are applied to not only cancer prevention but also cancer chemotherapy by stimulating differentiation of cells. We studied differentiation inducing effect of all-trans retinoic acid (ATRA) by studying proportion of high dense fractions of stem-like cells and the size of S phase fraction in cell cycle. From mammary organoids obtained from 7- to 8-week old F344 female rat mammary gland, we cultured rat mammary epithelial cells (RMEC) and treated physiological doses of $10^{-6}$, $10^{-7}$, and $10^{-8}$ M ATRA from the first day and then cultured for 4, 7, and 14 days. After that, immunostaining was performed using peanut agglutinin (PNA) and anti-Thy-1.1 monoclonal antibody (Thy-1.1) that can be used as markers of differentiation. We separated four different cell subpopulations by flow cytometry: cells negative to both reagents (B-), PNA-positive cells (PNA+), Thy-1.1-positive cells (Thy-1.1+), and cells positive to both reagents (B+). We observed continuous decreases of high dense fractions of stem-like cells (PNA+ subpopulations) for 14 days and as much decreases as high doses of ATRA, which were thought to be proportional to doses of ATRA. We labeled RMEC with bromodeoxyuridine and investigated cell cycle fractions that went through S phase. We observed a tendency of decrease of S phase fraction with time in culture, which, is thought to be related to continuous decreases of PNA+ subpopulations and inhibitory role of ATRA on cell cycle. These results suggest that physiological doses of ATRA could stimulate differentiation of RMEC and convert stem-like RMEC to differentiated cells in SFM for a relatively long period of 14 days.
This study introduced a chick embryos’ infection model to elucidate the pathogenesis mechanism of Pseudomonas aeruginosa, which causes serious diseases in human after ingestion of P. aeruginosa-contaminated animal originated foods. The embryonic chick model is able to give a rapid and relatively inexpensive method to assess bacterial pathogenicity compared to embryos of other vertebrates. Embryos were infected with P. aeruginosa and elastase-deficient P. aeruginosa. After infection with P. aeruginosa cells, total bacterial cell numbers and gelatinase activities in the embryos were compared. Thereafter, precartilage condensation and chondrogenesis were assessed by peanut agglutinin (PNA) binding on day 3 and by Alcian blue staining for sulfated proteoglycans on day 5, respectively. P. aeruginosa significantly increased in embryos, resulting in abnormal limb development, whereas P. aeruginosa defective in elastase activity partly impaired proliferation. In addition, P. aeruginosa-infected chick embryos significantly stimulated the production of matrix metalloproteinases. Several analyses showed that elevated proteases suppressed the proliferation and survival of chondrogenic cells. The results show that this infection model was a useful assay to determine the virulence mechanism of P. aeruginosa in human after intake of microbiologically contaminated foods.
Objectives : This study was carried out to compare the effects of Eejin-tang, Hyangsaeejin-tang and Naeso-san extracts on indomethacin-induced gastric mucosal lesions in mice. Methods : Experimental mice were divided into six groups. The normal group had no gastro-inflammation. In the control group, gastro-inflammation was elicited by indomethacin. Misoprostol, Eejin-tang, Hyangsaeejin-tang and Naeso-san group were those in which misoprostol, Eejin-tang extract, Hyangsaeejin-tang extract and Naeso-san extract were administered after gastro-inflammation is elicited. This study examined the anti-inflammation effects and distribution of mucus secreting cells, zonula occludin-1 (ZO-1), heat shock protein (HSP) 70, periodic acid-schiff reaction stain (PAS), peanut agglutinin (PNA), cyclooxygenase-1 (COX-1), 5-bromo-2'-deoxyuridine (BrdU), nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells (NF-${\kappa}B$) p65, inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2). Results : 1. The hemorrhagic erosion and damaged mucus secreting cell, the positive reaction HSP70 increased in the control group, but decreased in the Eejin-tang, Hyangsaeejin-tang and Naeso-san groups. 2. The positive reaction of ZO-1, PAS, PNA, COX-1 and BrdU decreased in the control group, but increased in the Eejin-tang, Hyangsaeejin-tang and Naeso-san groups. 3. The positive reaction of NF-${\kappa}B$ p65, iNOS and COX-2 increased in the control group, but decreased in the Eejin-tang, Hyangsaeejin-tang and Naeso-san groups. Conclusions : Among the three extracts, the effects were in the order of Naeso-san, Hyangsaeejin-tang and Eejin-tang group, Naeso-san being the most effective.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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