In order to screen microorganisms producing phopholipase D (PLD) had high transphosphatidylation activity, about 1,000 Actinomycetes strains were isolated from the 63 soil samples, collected over 6 local area in Korea. When the hydrolytic activity in the supernatant was determined, 131 strains produced PLD more than 0.3 U/ml. Among 131 culture broths tested, 23 ones had transphosphatidylation activity higher than 20% and finally one strain (Actinomycetes KF 923), which had highest hydrolytic and transphophadylation activity, was selected. Actinomycetes KF923 showed the highest hydrolytic activity (13 U/ml) and phosphatidylation activity (95%) after 48 h fermentation using the P medium (yeast extract 1%, peptone 1%, glucose 1.5%, glycerol 1%, $CaCo_3$ 0.4%, pH 7.2). PLD was purified from the culture broth of Actinomycetes KF923 and the specific activity of purified PLD was 567 U/mg. The molecular weight of PLD was about 55 kD and the optimum pH and temperature were 6.0 and $60^{\circ}C$, respectively. The stability of PLD toward pH and temperature were high around pH 8.0 and below $40^{\circ}C$. Special metal ions were not necessary to the PLD activity.
Proceedings of the Korean Institute of Electrical and Electronic Material Engineers Conference
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2010.06a
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pp.211-211
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2010
본 논문에서는 ZnO 박막을 휘어지기 쉬운 PES(polyethersulfone) 기판위에 PLD(pusled laser deposition)법을 사용하여 다양한 조건에서 성장시켰다. 성장된 ZnO 박막의 표면 형상과 광특성을 SEM과 PL을 사용하여 측정하였고, 레이저 밀도 0.3 J/$cm^2$, 기판 온도 $200^{\circ}C$에서 가장 좋은 광특성을 보였다.
In this paper, we design the pattern generator circuits using PLDs(Programmable Logic Devices). The pattern generator is the circuit which generates the test pattern signal for the inspection of logical defects of semiconductor products. The proposed circuits are designed by the PLD design tool(MAX+ II of ALTERA). Also the designed circuits are simulated for the verification of the designed ones. The simulation results have a good performance.
Microsomal phospholipase D (PLD) in rat brain was solubilized employing 0.2 % taurodeoxycholate in high ionic strength. Phopholipase D activity was determined by measuring product phophatidic acid (PA) using isotope-labelled dipalmitoylphophatidylcholine as a substrate. The solubilized PLD showed an optimal pH of 6.5 and the highest activity at 30$^{\circ}C.$ These properties were similar to those of microsomal PLD before solubilization. The stimulatory effect of oleic acid was observed at the concentration of 4 mM. When effects of metal ions on PLD activity were examined, alkaline earth metals such as $Mg^{2+},\; Ca^{2+},\; Sr^{2+}, \;Ba^{2+}$ promoted the PA production but $Cu^{2+},\; Cd^{2+},\; Al^{3+},\; Ni^{2+},\; V^{5+}$ showed inhibitory effects.
To investigate whether phospholipase D (PLD, EC 3.1.4.4) plays a role in adaptive response of post-harvest fruit to environment, a PLD gene was firstly cloned from grape berry (Vitis Vinifera L. cv. Chardonnay) using RT-PCR and 3'- and 5'-RACE. The deduced amino acid sequence (809 residues) showed 84.7% identity with that of PLD from Ricinus communis. The secondary structures of this protein showed the characteristic C2 domain and two active sites of a phospholipid-metabolizing enzyme. The PLD activity and its expression in response to heat acclimation were then assayed. The results indicated PLD was significantly activated at enzyme activity, as well as accumulation of PLD mRNA and synthesis of new PLD protein during the early of heat acclimation, primary suggesting that the grape berry PLD may be involved in the heat response in post-harvest grape berry. This work offers an important basis for further investigating the mechanism of post-harvest fruit adaptation to environmental stresses.
Kim, Shi-Yeon;Min, Kyoung-Jin;Joe, Eun-Hye;Min, Do-Sik
Proceedings of the Korean Society of Plant Biotechnology Conference
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2004.10a
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pp.74-79
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2004
Little is known about the effect of epigallocatechin-3 gallate (ESCG), a major constituent of green tea, on the expression of cyclooxygenase (COX)-2. Here, we studied the role of phospholipase D (PLD) isozymes in EGCG-induced COX-2 expression. Stimulation of human astrocytoma cells (U87) with EGCG induced formation of phosphatidylbutanol, a specific product of PLD activity, and synthesis of COX-2protein and its product, prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$). Pretreatment of cells with 1-butanol, but not 3-butanol, suppressed EGCG-induced COX-2 expression and $PGE_2$ synthesis. Furthermore, evidence that PLD was involved in EGCG-induced COX-2 expression w3s provided by the observations that COX-2 expression was stimulated by over-expression of PLD1 or PLD2 isozymes and treatment with phosphatidic acid(PA), and that prevention of PA dephosphorylation by 1-propranolol significantly potentiated COX-2expression Induced by EGCG. EGCG induced activation of p38 mitogen-activated protein kinase (p38MAPK), and specific Inhibition of p38 MAPK dramatically abolished EGCG-Induced PLD activation, COX-2 expression, and $PGE_2$ formation. Moreover, protein kinase C (PKC) inhibition suppressed EGCG-induced p38 MAPK activation, COX-2 expression, and $PGE_2$ accumulation. The same pathways as those obtained in the astrocytoma cells were active in primary rat astrocytes, suggesting the relevance of the findings. Collectively, our results demonstrate for the first time that PLD isozymes mediate EGCG-induced COX-2 expression through PKC and p38 in immortalized astroglial line and normal astrocyte cells.
Journal of the Korean Institute of Electrical and Electronic Material Engineers
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v.25
no.12
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pp.979-983
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2012
We proposed the ZnO thin film for a SAW filter by PLD and RF sputtering method. ZnO thin films was pre-deposited on a sapphire substrate as a seed layer by PLD method and then deposited on seed layer by RF sputtering. The surface characteristics of ZnO thin film were investigated by XRD, SEM and AFM. The minimum surface roughness was 1.92 nm and FWHM of rocking curve was $0.92^{\circ}$. We demonstrated the SAW filter with bandwidth of approximately 0.97 MHz and the center frequency of 18.72 MHz using the proposed ZnO thin film.
A substrate specificity of cabbage phospholipase D (PLD) was studied using the synthetic phospholipids having different head groups. The phospholipids were synthesized from phosphatidylcholine and appropriate bases by transphosphatidylation of PLD. The bases used were ethanolamine, serine, ethanol and γ-hydroxybutyric acid. The phosphatidic acid, the product of PLD, was separated in TLC and measured densitometrically. The kinetic parameters were estimated for each substrate and the effects of pH, SDS, Ca2+ and other metal ions were examined. Vmax values found were 3.75, 2.36, 5.59, 1.63, 2.30 nmol/min/μg protein for phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, phosphatidylserine, phosphatidylethanol, and phosphatidylburytic acid, respectively. These results indicate a broad specificity of cabbage PLD toward phospholipids with different head groups. Particularly phosphatidylserine was most easily hydrolyzed by PLD and its activity did not depend on Ca2+.
Effects of exogenous glycerophospholipids on oleate-dependent phospholipase D (PLD) activity were studied in lymphocytic mouse leukemia L1210 cells and in solubilized microsomal phospholipase D of rat brain. Among the phospholipids tested phosphatidic acid had the most stimulatory effects on both PLD activities up to about 3 folds. Lysophosphatidic acid also showed promoting effect on microsomal PLD activity but much less on L1210 cells compared to that of phosphatidic acid. While phosphatidylethanolamine increased PLD activity slightly, phosphatidylinositides were nearly ineffective in the tested sources. The stimulatory effect of phosphatidic acid observed can be utilized to improve the in vitro assay system for oleate-dependent PLD in mammalian sources.
Journal of the Korea Society of Computer and Information
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v.24
no.9
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pp.21-27
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2019
In this paper, we propose a deep auto-encoder-based pipe leak detection (PLD) technique from time-series acoustic data collected by microphone sensor nodes. The key idea of the proposed technique is to learn representative features of the leak-free state using leak-free time-series acoustic data and the deep auto-encoder. The proposed technique can be used to create a PLD model that detects leaks in the pipeline in an unsupervised learning manner. This means that we only use leak-free data without labeling while training the deep auto-encoder. In addition, when compared to the previous supervised learning-based PLD method that uses image features, this technique does not require complex preprocessing of time-series acoustic data owing to the unsupervised feature extraction scheme. The experimental results show that the proposed PLD method using the deep auto-encoder can provide reliable PLD accuracy even considering unsupervised learning-based feature extraction.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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