Objective : Broccoli is edible green plant that has a wide variety of health benefits including cancer prevention and cholesterol reduction. However, leaves of broccoli are not eaten and are mostly left as waste. This study was conducted to evaluate the effects of the broccoli leaf extract (BLE) on prostaglandin E2 (PGE2) production related to nuclear factor kappa B (NF-κB) signaling in lipopolysaccharide (LPS)-activated macrophages. Methods : BLE was prepared by extracting dried leaf with ethanol. Cell viability was determined by 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. PGE2 and inflammatory cytokines were detected by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Expression level of each protein was monitored by Western blot analysis. Results : In LPS-activated Raw264.7 cells, PGE2 release into culture medium was dramatically enhanced compared to control cells. However, increased PGE2 was attenuated dose-dependently by treatment with BLE. Inhibition of PGE2 production by BLE was due to the suppression of cyclooxygenase-2 (COX-2) expression determined by Western blot analysis. BLE also inhibited the production of inflammatory cytokines such as interleukin-6 (IL-6) and tumor necrosis factor-alpha (TNF-α). Inhibition at PGE2 and cytokine was mediated from inhibition of nuclear translocation of NF-κB due to the repression of inhibitory kappa B alpha (IκBα) phosphorylation and degradation. Conclusion : This study showed that BLE exerted inhibitory activities against PGE2, which is critical for the initiation and resolution of inflammatory responses, and that inhibition of PGE2 was mediated by suppression of NF-κB signaling. These results suggest that the waste broccoli leaves could be used for controlling inflammation.
본 연구는 RAW 264.7 세포를 이용하여 넓패추출물(Ishige foliacea, I. foliacea)의 피부 항염 효과를 확인하고자 하였다. RAW 264.7 세포에 대한 넓패추출물의 항염증 효과는 세포 생존력 분석, mRNA 발현 및 산화질소(NO)/프로스타글란딘 E2 (PGE2) 생성을 통해 확인하였다. 넓패추출물의 항염증 효과는 IL-1α/IL-1β/IL-6/TNFα mRNA 발현 및 NO/PGE2 생성을 분석하여 규명하였고, 정량적 실시간 중합효소 연쇄반응을 통해 넓패추출물은 iNOS/COX2/IL-1α/IL-1β 및 IL-6의 mRNA 발현을 감소시키는 것을 확인하였다. 또한 PGE2와 NO 생성의 비교를 통해 넓패추출물이 항염증 효과가 있음을 확인하였다. 넓패추출물의 항염 효과를 바탕으로 코스메슈티컬 소재로 활용될 수 있는 가능성을 확인하였다. 넓패추출물의 항염증 메커니즘에 대한 후속 연구를 바탕으로 코스메슈티컬뿐만 아니라 염증과 관련된 약리학적인 메커니즘 발굴에도 도움이 될 것으로 보인다.
Prostaglandins (PGs) and Leukotrienes (LTs) have been implicated in the genesis of pulpal and periapical inflammation. In this study, the relationships among $PGE_2$, 6-keto-PG $F_1{\alpha}$ (a stable metabolite of $PGI_2$) and $LTB_4$ concentrations in inflamed pulp and periapical lesions were discussed. Pulp tissue were obtained in routine endodontic treatment and periapical lesions in periapical surgery after clinical diagnoses were made. These specimens were divided into four groups as normal pulp group (Control group), acute pulpitis group, chronic pulpitis group, and periapical lesion group. Pulp tissue and periapical lesions were stored in liquid nitrogen. The concentration of $PGE_2$, $PGI_2$ and $LTB_4$ were measured with ELISA. The data were analyzed by one-way ANOVA. Significantly higher levels of $PGE_2$, 6-keto-PG $F_1{\alpha}$ a and $LTB_4$ were found in acute pulpitis group than chronic pulpitis group and periapical lesion group(p<0.05). Periapical lesion group showed significantly higher mean concentrations of $PGE_2$ and $LTB_4$ than chronic pulpitis group. In control and chronic pulpitis group, significant higher levels of $PGI_2$ than $PGE_2$ and $LTB_4$ were found. These results suggested that the high levels of $PGE_2$ and $LTB_4$ in periapical lesions may be due to rich endothelium., fibroblast and lymphocyte known as the main producers of $PGE_2$ and $LTB_4$. $PGI_2$ may be thought to one of the most abundant PGs in normal pulp tissue.
염증은 신체 특정 조직의 감염 및 손상에 관한 생체 반응이며, 매개하는 주요 대상은 면역세포이다. 염증은 급성과 만성 염증으로 나뉘며 신체 조직의 감염 및 손상부위의 규모에 따라 구분할 수 있다. 염증의 범위가 크게 발현되거나 급성염증 형태로 진행되지 않을 때 만성 염증으로 진행되며 대표적인 만성 염증 질환인 장 질환(Inflammatory bowel disease)의 일종인 크론병(Crohn's disease)이나 관절질환인 류머티스성 관절염(Rheumatoid arthritis)으로 나타난다. 낮은 수준이기는 하나 비만 역시 염증성 질환으로 분류할 수 있다. 연리초속 식물이 고래에 신장염을 치료하는 민간처방으로 주로 사용됐기에 이에 착안하여 털연리초(Lathyrus palustris)를 이용하여 세포독성과 항염증 활성 효과를 평가하였다. 대식세포인 RAW 264.7 세포에서 염증 유발 인자인 lipopolysaccharide (LPS)로 자극 후 NO와 PGE2 같은 염증 매개 물질들의 억제 효과를 확인하였다. 털연리초 에탄올 추출물을 처리한 후 염증 매개 물질의 저해율(%)을 측정했을 때 NO 및 PGE2 생성을 농도 의존적으로 현저하게 억제하는 농도는 40 ㎍/mL이었으며 특이적으로 PGE2 발현을74% 이상 강력히 억제함을 확인하였다. 따라서 본 연구결과는 털연리초의 에탄올 추출물이 유의성 있는 항염증 효과를 나타내었고 이러한 생리활성 효과는 예방의학적 소재로서의 가능성을 충분히 제시할 수 있기에 염증 질환의 예방 및 비만 억제를 위한 기능성 건강식품의 개발로 이어질 것으로 기대된다. 또한 염증과 관련된 사이토카인 물질인 IL-4, IL-13 및 염증 지표 단백질인 iNOS, COX-2의 억제 메커니즘과 항염증 활성을 나타내는 핵심 성분의 추가적인 연구가 차후 필요할 것으로 판단된다.
선택적 cyclooxygenase (COX)-2 억제제는 기존의 비스테로이드성 소염제의 위장 부작용을 줄일 수 있는 새로운 대체제이다. 하지만, 최근 혈전을 일으켜 심혈관 질환의 위험을 증가시킨다는 보고가 있다. 따라서 본 연구에서는 유효성분인 ursolic acid를 각각 40, 50%로 극대화한 로즈마리 추출물(RE)의 항염증 효과와 이에 따른 심혈관 부작용의 안전성을 확인하였다. RE의 COX 효소 활성 저해 평가 결과 40, 50% RE는 100 ㎍/mL에서 양성 대조군인 celecoxib 및 rofecoxib와 비슷한 COX-2 저해 활성을 보였고, COX-1 저해 활성은 미미하였다. 이후 Lipopoly-saccharide (LPS)를 조건에 따라 처리한 RAW 264.7 세포에 40, 50% RE 1 ㎍/mL를 처리하여 COX-2, COX-1 유전자 발현, 세포 배양액의 prostaglandin E2 (PGE2), thromboxane B2 (TXB2) 농도를 확인하였다. 실험 결과 COX-2 유전자 발현은 40% RE가 LPS를 24시간 후처리한 조건에서 감소하였고, 40, 50% RE는 COX-1 유전자 발현 및 PGE2, TXB2 농도에는 유의한 영향을 주지 않는 것으로 확인되었다. 따라서 RE는 혈전 생성에 관여하는 prostaglandins의 균형에 영향을 주지 않아 심혈관 혈전 생성의 위험성이 적을 것으로 사료된다.
In Guk Park;Sun Hee Jin;Seungchan An;Min Won Ki;Won Seok Park;Hyoung-June Kim;Yongjoo Na;Minsoo Noh
Biomolecules & Therapeutics
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제32권5호
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pp.635-639
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2024
Skin aging results from complex interactions of intrinsic and extrinsic factors, leading to structural and biochemical changes such as wrinkles and dryness. Ultraviolet (UV) irradiation leads to the degradation of hyaluronic acid (HA) in the skin, and the fragmented HA contributes to inflammation. This study revealed that the synergistic combination of carnosine and retinol (ROL) increases HA production in normal human epidermal keratinocytes (NHEKs) by upregulating hyaluronan synthase 2 (HAS2) gene transcription. Simultaneously, the combined treatment of carnosine and ROL significantly attenuates UVB-induced prostaglandin E2 (PGE2) synthesis in NHEKs. A significant correlation exists between the increase of HA synthesis and the inhibition of PGE2 production. This study suggests that combined treatment of carnosine and ROL can improve skin aging phenotypes associated with UVB irradiation.
Xiao, Ailan;Wu, Chuncao;Kuang, Lei;Lu, Weizhong;Zhao, Xin;Kuang, Zhiping;Hao, Na
The Korean Journal of Pain
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제33권4호
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pp.335-343
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2020
Background: Zhongyi paste is a traditional Chinese medicine herbal paste that is externally applied to reduce inflammation and relieve pain. Methods: An acute foot swelling inflammation model in C57BL/6J mice was established by carrageenan-induced pathogenesis. Zhongyi paste raised the pain threshold and also reduced the degree of swelling in mice with carrageenan-induced foot swelling. Results: Analysis indicated that serum tumor necrosis factor-alpha, interleukin-1 beta, and prostaglandin E2 (PGE2) cytokine levels and PGE2 levels in the paw tissue of the mice were decreased by Zhongyi paste treatment. The quantitative polymerase chain reaction and western blot results showed that Zhongyi paste downregulated the mRNA and protein expression of extracellular signal-regulated kinase 1/2 (ERK1/2), and cyclooxygenase-2 (COX-2), and also downregulated the mRNA expression of PGE2. At the same time, the Zhongyi paste exerted a stronger effect as an external drug than that of indomethacin, which is an oral drug, and voltaren, which is an externally applied drug. Conclusions: Our results indicated that Zhongyi paste is a very effective drug to reduce inflammatory swelling of the foot, and its mechanism of action is related to regulation of the ERK1/2-COX-2-PGE2 pathway.
본 연구에서는 갈퀴나물(Vicia amoena) 전초를 이용한 에탄올 추출물의 세포독성과 항염증 활성 효과를 평가하였다. RAW264.7 cell(대식세포)에서 염증 매개 물질인 lipopolysaccharide(LPS)로 염증을 유발시켜 nitric oxide (NO) 및 prostaglandin E2 (PGE2)같은 염증 유발 인자들의 생성 저해효과를 확인하였다. 갈퀴나물 에탄올 추출물의 염증 유발 인자 억제 시 저해효과를 측정하였을 때 nitric oxide 및 prostaglandin E2 생성을 농도 의존적으로 현저하게 저해하는 농도인 40 ㎍/㎖의 농도에서 LPS에 의해 유도된 NO를 36.0 ± 0.5 % 저해하였으며, 특히 PGE2에서는 88.0 ± 0.8 % 만큼 유의성 있는 저해효과를 나타내었다. 따라서 본 연구결과는 갈퀴나물의 에탄올 추출물이 유의성 있는 항염증 효과를 나타내며, 이러한 효능은 예방의학적 가능성을 충분히 가지고 있기에 염증성 질환의 예방을 위한 항염증 소재로의 개발 가능성을 제시할 수 있을 것으로 기대된다. 차후 에탄올 추출물의 보다 다양한 농도 및 유기용매 분획물에서 염증반응을 매개하는 iNOS·COX-2 등 의 다양한 효소의 발현과 Iκ-Bα의 분해 등 염증반응의 신호전달물질의 변화에 대한 추가적인 연구가 필요할 것으로 판단된다.
프로스타글란딘 D2 (PGD2)와 E2 (PGE2)는 COX-2로부터 유래되는 주요 프로스타노이드로서, 슈도모나스에 의한 폐감염이 발생하였을 경우 폐에서 합성되어 슈도모나스 세균감염을 조절할 수 있음을 밝힌바 있음. 본 연구에서는 두 프로스타노이드의 생성 비율을 조절하는 기전을 연구하고자함. 마크로파아지에 의해 PGD2/PGE2 비율이 결정되는 지 조사하기 위해, 마우스의 허파로부터 마크로파아지를 분리하고 LPS로 처리할 경우, COX-2, PGD2합성 효소인 L-PGDS, PGE2의 합성효소인 mPGES-1 등의 발현이 두 프로스타노이드의 생성 비율에 미치는 영향을 조사하였음. 또한 이 효소들의 발현이 일차 허파 마크로파아지에 특이적인지의 여부를 조사하기 위해, 허파 마트로파이지 세포주인 MH-S와 비교 조사하였음. COX-2가 프로스타글린딘 비율에 미치는 영향을 조사하기 위해, COX-2 특이적 siRNA릉 이용하여 COX-2의 발현을 억제하고 L-PGDS, mPGES-1 등의 발현을 조사하였음. 결과에 따르면, 일차 허파 마트로파아지는 MH-S과는 달리 많은 양의 PGE2를 생성하나, 두 세포간 COX-2, L-PGDS, mPGES-1의 발현에는 큰 차이가 없었음. 이는 이들 효소 외에 다른 인자들이 두 프로스타노이드의 비율을 결정하는데 관여함을 제시함. LPS의 처리에 의해 폐염증을 발생시키고 허파에서의 PGD2/PGE2 비율을 조사한 결과, LPS에 의해 폐염증이 발생할 경우 LPS를 처리한 일차 허파 마크로파아지와 유사하게 PGE2의 발현이 PGD2에 비해 상당히 높았음. 결과적으로 본 연구의 결과는, 허파에서의 PGD2/PGE2 비율은, COX-2, L-PGDS, mPGES-1 등 PGD2나 PGE2의 합성에 직접적인 영향을 주는 효소에 의해 결정되지 않으며, 허파마크로파아지의 PGD2/PGE2 비율을 반영할 가능성을 제시함.
Objective : The water extract of Bojungikgi-tang (BTE) composed with Ginseng Radix, Astragali Radix, Angelicae gigantis Radix, Atractylodes Rhizoma alba, Aurantii nobilis Pericarpium, Glycyrrhizae Radix, Cimicifuga Rhizoma, and Bupleuri Radix and it has been traditionally used for chronic diseases or weakness after illness in oriental countries. However, little is known about the effects of aqueous extract of BTE on trimellitic anhydride (TMA)-induced contact hypersensitivity (CHS). Therefore, the aim of this study was to investigate the effects of BTE on TMA-induced CHS in BALB/c mice.Methods : In this study, the extract of BTE was prepared by extracting with distilled water at 100℃ for 2.5 h. The extract was freeze-dried following filtration through 0.45 μm filter. Mice were orally administrated with or without BTE extract of different doses (25-200 ㎎/㎏/day) for 28 days. During the challenge period, mice were externally applied with different doses of BTE extract one time per day 30 min before TMA treatment. I examined the effects of BTE on the serum levels of IgE, IgG1, IgG2a, and IgG2b, nitric oxide (NO) and prostaglandin E2 (PGE2) production in isolated peritoneal macrophages, Th2 cytokine production in isolated spleen cells, ear swelling responses, and the leukocyte infiltration induced by TMA.Results : The orally and externally administration of BTE dose-dependently reduced the serum levels of hapten-specific immunoglobulin E (IgE), IgG1 titer, and PGE2 production as well as ear swelling responses and leukocyte infiltration in TMA-induced BALB/c mice. The levels of NO and PGE2 production from peritoneal macrophages stimulated with TMA-BSA were markedly suppressed by pretreatment with BTE in a concentration dependent manner. Furthermore, the levels of Th2 cytokines (IL-4, IL-5, IL-13) production from spleen cells stimulated with ConA were markedly suppressed by BTE treatment in a concentration dependent manner.Conclusions : These results suggest that BTE treatment suppresses chronic contact hypersensitivity, and it can be assumed that the suppression of ear swelling, serum IgE, NO and PGE2 levels, leukocyte infiltration, and Th2 cytokines in an animal model. Therefore, these properties may contribute to the strong anti-CHS response effect of BTE.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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