The pWHM220 cosmid with a 24-kb insert cloned from Streptomyces albus ATCC 21838 induces the biosynthesis of a polysther antibiotic similar to salinomycin in Streptomyces invidans. We have analyzed this region by DNA sequencing as well as Southern blot hybridization with type I and type II polyketide synthase (PKS) probes. Surprisingly, we found another set of type II SKS genes only 10-kb from the original PKS genes, salABCDE. The DNA sequence revealed two complete open reading frames (ORFs) named salB2 and salC2, and one partial ORF that does not resemble any known DNA or deduced protein sequence. The salC2 should code for chain length determining factor while the deduced amino acid sequence encoded by salB2 exhibits high similarity to .betha.-ketoacyl synthase from different PKS gene clusters. The highest identity was found for .betha.-keetoacyl synthases from S. argillaceus (MtmP. 59.1% identity), the mithramycin producer and from S. venezuelae ISP5230 (JadA, 52.3% identity), the jadomycin producer. The SalC2 protein clearly resembles its counterparts in order aromatic PKS gene clusters that are believed to influence the length of the polyketide chain. The highest identities observed were to that of S. argillaceus (MtmK, 62.3%) and S. venezuelae ISP 5230 (JadB, 55.1%) proteins, Moreover, the deduced amino acid sequences of the salB2 and salC2 products were 29.0% identical.
A partial characteristics and pathogenicity of Aeromonas salmonicida strain isolated from diseased cultured eel were studied. On the biochemicial characteristics of the isolate strain was classified into atypical Aeromonas salmonicida : the characteristics of the isolate strain differed from those of the subspecies of Achromogenes, masoucida and salmonicida. It strain was named atypical Aeromonas salmonicida EL-1 and it grew at optimal pH 7.5 and l% Nacl. In the pathogenicity test, at one to two days post infection, the motality of artificially infected eels with $1{\times}10^8$ and $1.0{\times}10^7$ cfu/fish group was 100%, and at three days pos-infection, in the $1.0{\times}10^6$ /cfu /fish infected group, the epizootic haemorrhagic ulcer was developed, and haemorragic red sports were formed around abdomen and fins and its died (40%). Total cell protein peptide bands of the A. salmonicida EL-1 were presented betweeon 11.8~102 Kd in molecular weight by the electrophoretic analysis and appeared 28 bands in all. Drug sensitivity of atypical A. salmonicida EL-1 strain was sensitivity to chlorampenicol, gentamicin, kanamycin, streptomycin and sulfamethoxazole /trimethoprim and intermidiate to ampiclin and neomycin resistant to cephalotin, erythromycin, lincomycin and tetracycline.
Shi, F.H.;Fang, L.;Meng, Q.X.;Wu, H.;Du, J.P.;Xie, X.X.;Ren, L.P.;Zhou, Z.M.;Zhou, B.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제27권10호
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pp.1443-1451
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2014
Increasing cost and scarcity of maize has stimulated the use of alternative feed sources (AFS) in the diets of cattle. In this study, we investigated the effects of partial or total replacement of maize on nutrient digestibility, growth performance, blood metabolites, and economics in Limousin crossbred feedlot cattle. Forty-five $Limousin{\times}Luxi$ crossbred bulls were randomly assigned to the three treatment groups, orthodox diet (OD; 45.0% maize), partial replacement diet (PRD; 15% maize, 67% AFS), total replacement diet (TRD; 0% maize, 100% AFS). The growth feeding trial lasted for 98 days. Dry matter intake (DMI) and average daily gain (ADG) were recorded. The digestion trial was carried out after the end of the growth trial. Total faeces and feed samples were measured daily. Digestibilities of dry matter (DM) and organic matter (OM), crude protein (CP), neutral detergent fiber (NDF) and acid detergent fiber (ADF) were calculated. After the feeding trial, blood metabolites were measured in 12 animals from each group. Initial and final body weights did not differ significantly among treatment groups (p>0.05). The ADG and DMI were 1.72 and 8.66, 1.60 and 9.10, and 1.40 and 9.11 kg/d for OD, PRD, and TRD, respectively. The PRD and TRD exhibited lower ADG (p<0.01) and higher DMI (p<0.01) than OD. The DMI (%body weight) was comparable between groups (p>0.5). Feed efficiency of PRD and TRD were lower than OD (p<0.01). The DM digestibility decreased with reduced level of maize (p = 0.10), OM digestibility was higher in OD (p<0.05), and CP, NDF and ADF digestibilities were similar for all groups (p>0.05). Blood urea nitrogen (mg/dL) in PRD and TRD was higher than OD (p<0.01), while other blood parameters did not differ significantly. Feed costs ($/head/d) were 1.49, 0.98, and 0.72 for OD, PRD, and TRD, respectively (p<0.01). Feed costs per kg gain ($) were significantly lower for PRD (0.63) and TRD (0.54) than OD (0.89; p<0.01). Overall profit ($/head) and daily profit ($/head/d) did not differ significantly between treatments (p>0.05), although TRD showed the highest economic benefits overall (p<0.01). While a traditional diet maximized the growth rate, partial or total replacement of dietary maize with AFS proved economically feasible due to their lower costs and comparable nutrient digestibilities of DM, CP, NDF, and ADF. Partial replacement may prove economically competitive in the current situation of China.
A gene, ClCDA, encoding chitin deacetylase from Colletotrichum lindemuthianum, was optimized according to the codon usage bias of Pichia pastoris and synthesized in vitro by overlap extension PCR. It was secretorily expressed in P. pastoris GS115 using the constitutive expression vector pHMB905A. The expression level reached the highest with 110 mg/l culture supernatant after 72 h of methanol induction, which comprised 77.27 U/mg chitin deacetylase activity. SDS-PAGE, mass spectrometry, and deglycosylation assays demonstrated that partial recombinant protein was glycosylated with an apparent molecular mass of 33 kDa. The amino acid sequences of recombinant proteins were confirmed by mass spectrometry.
While attempting to develop low salt, low fat and high fibre chicken nuggets, the effect of partial (40%) common salt substitution and incorporation of chickpea hull flour (CHF) at three different levels viz., 5, 7.5 and 10% (Treatments) in pre-standardized low fat chicken nuggets (Control) were observed. Common salt replacement with salt substitute blend led to a significant decrease in pH, emulsion stability, moisture, ash, hardness, cohesiveness, gumminess and chewiness values while incorporation of CHF in low salt, low fat products resulted in decreased emulsion stability, cooking yield, moisture, protein, ash, color values, however dietary fibre and textural properties were increased (p<0.01). Lipid profile revealed a decrease in total cholesterol and glycolipid contents with the incorporation of CHF (p<0.01). All the sensory attributes except appearance and flavor, remained unaffected with salt replacement, while addition of CHF resulted in lower sensory scores (p<0.01). Among low salt, low fat chicken nuggets with CHF, incorporation CHF at 5% level was found optimum having sensory ratings close to very good. Thus most acceptable low salt, low fat and high fibre chicken nuggets could be developed by a salt replacement blend and addition of 5% CHF.
This study was carried out to evaluate the use of fermented skipjack tuna viscera (FSTV) as an alternative for fish meal in juvenile olive flounder (Paralichthys olivaceus) diets. Lactobacillus bulgaricus was used as a starter for fermentation of skipjack tuna viscera. Four isonitrogenous (49% crude protein) and isocaloric (4 kcal/g DM) diets were formulated to contain graded levels (0, 5, 10, and 15%) of FSTV. Each experimental diet was fed three replicate groups (40 fish per tank) of juvenile flounder (average weight, $3.3\pm0.2$ g) for 5 weeks. At the end of feeding experiment, inclusion of FSTV up to 15% in diets did not affect survival rate (%) and weight gain of fish. Feed efficiency, protein efficiency ratio, protein and lipid retentions of fish fed the diet containing 10% FSTV were higher than those of fish fed the control diet (P<0.05). The values of fish fed the diet containing 15% FSTV were not different from those of fish fed other diets. Whole body lipid content of fish fed the diet containing 10% FSTV was higher than that of fish fed the diet containing 15% FSTV and control diet. The present results indicate that fermented skipjack tuna viscera could partially replace fish meal in juvenile flounder feed, and the inclusion of 10% FSTV may be efficient in improving the feed utilization of fish.
Sclerotinia sclerotiorum fungus has three endoxylanases induced by wheat bran. In the first part, a partial xylanase sequence gene (90 bp) was isolated by PCR corresponding to catalytic domains (${\beta}5$ and ${\beta}6$ strands of this protein). The high homology of this sequence with xylanase of Botryotinia fuckeliana has permitted in the second part to amplify the XYN1 gene. Sequence analysis of DNA and cDNA revealed an ORF of 746 bp interrupted by a 65 bp intron, thus encoding a predicted protein of 226 amino acids. The mature enzyme (20.06 kDa), is coded by 188 amino acid (pI 9.26). XYN1 belongs to G/11 glycosyl hydrolases family with a conserved catalytic domain containing $E_{86}$ and $E_{178}$ residues. Bioinformatics analysis revealed that there was no Asn-X-Ser/Thr motif required for N-linked glycosylation in the deduced sequence however, five O-glycosylation sites could intervene in the different folding of xylanses isoforms and in their secretary pathway.
Bacillus subtilis의 세포내 이눌라아제가 부분정제되고 그의 작용 모드와 일반적 특성이 조사되었다. 이 효소는 gel filtration에 의하여 분자량을 추정하였을 때 49,000이었고, 등진점은 5.2 이었다. 기질에 대한 친화성의 지표인 Km값은 설탕에 대해서는 10mM, 라피노오스에 대해서는 18mM 이었다. 이 효소는 산성쪽에서는 불안정한 단백질로서 pH6.6에서 최대 활성을 보였으며 최적온도는 10분간 반응시켰을 때 50'C였다. 이 효소의 작용모든는 이눌린같은 구조를 가지는 과당 중합체를 과당 끝부분으로부터 하나씩 잘라가는 exo-cleavage 형이었다.
In Exp. 1, a total of 36 pigs (6.55$\pm$0.10 kg average initial body weight and 21 d average age) were used in a 14 d growth study to determine the effects of replacing spray-dried plasma protein (SDPP) with spray-dried egg protein containing specific egg yolk antibody (SDEP) on growth performance and nutrient digestibility in weaned pigs. The pigs were blocked by weight and assigned to treatments based on sex. There were three pigs per pen and four pens per treatment. Dietary treatments were 0, 3, or 6% SDEP and contained 6, 3, or 0% SDPP, respectively. Through the entire experimental period, average daily gain (ADG), average daily feed intake (ADFI), and gain/feed tended to decrease as the concentration of SDEP increased in the diets. However, there were no significant differences among the treatments (p>0.05). As the addition of SDEP in the diets increased, apparent digestibilities of dry matter (DM) and nitrogen (N) were decreased without significant (p>0.05). For Exp. 2, 36 pigs (2.63$\pm$0.04 kg average initial body weight and 10 d average age) were used in a 14 d growth study to determine the effects of antibiotic replacement with SDEP on growth performance and nutrient digestibility in early-weaned pigs. The pigs were blocked by weight and assigned to treatments based on sex. There were three pigs per pen and four pens per treatment. Dietary treatments included 1) ANTIBIOTIC (corn-dried whey-soybean meal based diet+0.08% antibiotics, 4 mg of tiamuline hydrogen fumarate; 10 mg of sulfadimidine per kg of complete diet), 2) SDEP0.1 (corndried whey-SBM based diet+0.1% SDEP), and 3) SDEP0.2 (corn-dried whey-SBM based diet+0.2% SDEP). ADG and gain/feed of pigs fed the SDEP0.2 diet were higher than for pigs fed the ANTIBIOTIC diet without significant (p>0.05). Pigs fed the diet with SDEP0.2 tended to have increased apparent digestibilities of DM and N compared to pigs fed the ANTIBIOTIC diet without significant (p>0.05). In conclusion, the dietary SDEP seemed to be partial replacing the SDPP portion of high nutrient dense diet for weaned pigs. Also, dietary SDEP seemed to be approximately 0.2% or more when the pigs fed the antibiotic-free diet for early-weaned pigs.
A novel inhibitory protein against blood coagulation factor Va (FVa) was purified from muscle protein of granulated ark (Tegillarca granosa, order Arcoida, marine bivalvia) by consecutive FPLC method using anion exchange and gel permeation chromatography. In the results of ESI-QTOF tandem mass analysis and database research, it was revealed that the purified T. granosa anticoagulant protein (TGAP) has 7.7 kDa of molecular mass and its partial sequence, HTHLQRAPHPNALGYHGK, has a high identity (64%) with serine/threonine kinase derived from Rhodopirellula baltica (order Planctomycetales, marine bacteria). TGAP could potently prolong thrombin time (TT), corresponding to inhibition of thrombin (FIIa) formation. Specific factor inhibitory assay showed that TGAP inhibits FVa among the major components of prothrombinase complex. In vitro assay for direct-binding affinity using surface plasmon resonance (SPR) spectrometer indicated that TGAP could be directly bound with FVa. In addition, the binding affinity of FVa to FII was decreased by addition of TGAP in dose-dependant manner ($IC_{50}$ value = 77.9 nM). These results illustrated that TGAP might interact with a heavy chain of FVa ($FVa_H$) bound to FII in prothrombin complex. The present study elucidated that non-cytotoxic T. granosa anticoagulant protein (TGAP) bound to FVa can prolong blood coagulation time by inhibiting conversion of FII to FIIa in blood coagulation cascade. In addition, TGAP did not significantly (P < 0.05) show fibrinolytic activity and cytotoxicity on venous endothelial cell line (ECV 304).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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