Lipids play important roles in biological systems; they store energy, play a structural role in the cell membrane, and are involved in cell growth, signal transduction, and apoptosis. Phospholipids (PLs) in particular have received attention in the medical and lipidomics research fields because of their involvement in human diseases such as diabetes, obesity, atherosclerosis, and many cancers associated with lipid metabolic disorders. Here I review experimental strategies for PL analysis based on nanoflow liquid chromatography-electrospray ionization-tandem mass spectrometry (nLC-ESI-MSn). In particular, discussed are lipid extraction methods, nanoflow LC separation of PLs, effect of ionization modifiers on the ESI of PLs, influence of chain lengths and unsaturation degree of acyl chains of PLs on MS intensity, structural determination of the molecular structure of PLs and their oxidized products, and quantitative profiling of PLs from biological samples such as tissue, urine, and plasma in relation to cancer and coronary artery disease.
쑥갓(Chrsanthemum coronarium L., CC)은 국화과(Compositae)에 속하는 일년생 초본식물로 독특한 향기를 가진 지중해 원산 식물이다. 우리 나라에는 중국을 거쳐 조선초기에 전해졌으며 시기용으로 널리 애용되고 있다. 본 연구는 쑥갓의 메타놀 분획물(CCMM), 헥산분획물(CCMH), 에틸아세테이트 분획물(CCMEA), 부타놀분획물 (CCMB) 및 수층인 CCMA 분획물을 얻고 각각 일정량을 불포화인지질인 L-$\alpha$-dilinoleoylphosphatidylcholine(DLPC) liposome에 가하고 benzoyl peroxide를 가하여 산화시켜 분광광도법에 의하여 산화지수 ( $A_{234nm}$/ $A_{202nm}$)를 측정 비교하였다. 그 결과 쑥갓의 각 분획물 일정량을 가한 경우의 DLPC liposome의 산화지수는 시료를 가하지 않은 경우보다 낮아 높은 항산화력을 나타내었으나 강한 항산화제인 BHT를 가한 경우 보다는 항산화 정도가 낮았다. 그러나 특히 본 연구에서 알려진 결과로는 쑥갓 분획물들의 항산화력이 널리 알려진 항산화제인 $\alpha$-tocopherol을 가한 경우와 그 효과가 비슷하여 식용으로 애용되고 있는 쑥갓의 항산화적 생리활성이 본 연구에서 입증되었으며 이 효과를 기초로하여 식물 속의 항산화성을 이용한 식품의 개발이 기대 된다.
최근 지방 섭추의 증가에 따른 혈관계 질병이 증가 추세에 있다. 이러한 동맥경화 및 고지질의 질병은 지질 단백질(lipoprotein)과 관련하여, LDL 및 산화 LDL의 특성을 중심으로 고찰하였다. 인체의 혈장에 함유된 LDL 함량의 증가는, 동맥경화와 직결되는 것을 의미하며, 이러한 LDL은 매우 hydrophobic한 특성을 가진 550Kd의 단일 polypeptide인 Apo B-100라는 단백질이, 지질성분인 triglyceide, phospholipid 및 cholesterol와 결합되어 있다. 최근 이러한 LDL은 산화(oxidation)되는 경우, 정상적인 LDL-receptor pathway를 따르지 않고, macrophang와 결합하므로서, foarn cell을 형성하여 동백경화가 촉진되는 것으로 알려지고 있다.
The oxidation rate of krill lipids is very slow and no peroxides are accumulated even after long storage. By means of various chromatographic techniques and mass spectrophotometry, the primary antioxidant has been identified as ${\alpha}$-tocopherol. The phospholipid fractions did not show any antioxidative activity but peroxide-decomposing properties of total lipids depended upon the phospholipid contents. The peroxide-decomposing activities of phospholipids were due to the presence of polar materials generated during the storage. The most peroxide-decomposing fractions of oxidized krill lecithin by DEAE-cellulose column chromatography was low-molecule fraction (mean molecular weight: 182) and high-molecule fraction (mean molecular weight: 1942) was the next. The separation of peroxide-decomposing properties from low-molecule fraction was achieved by partitioning between chloroform and methanol/water. The methanol/water fraction showed strong peroxide-decomposing activities and main component of this fraction was assumed hydroxyamine compounds derived from choline.
We have investgated on the monolayer LB film of BASH-DMPC mixture on an ITO for the photoisomerization by light irradiation. We measured electrochemical properties by using cyclic voltammetry with a three-electrode system, An Ag/AgCl reference electrode, a platinum wire counter electrode and LB film-coated ITO working electrode in $NaClO_4$ solution at a variable concentration and monolayer LB films. A measuring range was reduced from initial potential to -1350mV, continuously oxidized to 1650 mV and measured to the initial point. The scan rate were 50, 100, 150 and 200 mV/s. As a results, LB films of 8A5H-DMPC appeared reversible process caused by the reduction-oxidation current from the cyclic voltammogram.
We investigated the electrochemical properties for Langmuir-Blodgett (LB) films mixed with fatty acid (8A5H) and phospholipid (DLPE, DMPC, and DPPA). LB films of 8A5H monolayer and 8A5H-phospholipid mixture were deposited using the Langmuir-Blodgett method on the indium tin oxide(ITO) glass. The electrochemical properties measured using cyclic voltammetry with three-electrode system, an Ag/AgCl reference electrode, a platinum wire counter electrode and LB film-coated ITO working electrode at various concentrations(0.1, 0.5, and 1.0 mol/L) of $NaClO_4$ solution. A measuring range was reduced from initial potential to -1350 mV, continuously oxidized to 1650 mV and measured to the initial point. The scan rate was 50, 100, 150 and 200 mV/s, respectively. As a result, LB films of fatty acid and phospholipid (8A5H/DLPE and DPPA) appeared irreversible process were caused by only the reduction current from the cyclic voltammogram and LB film of 8A5H-DMPC mixture was found to be caused by a reversible oxidation-reduction process.
우리는 순환전압전류법에 의한 LB 필름에 대한 전기화학적 특성을 조사하였다. 인지질 화합물은 ITO glass에 Langmuir-Blodgett법을 사용하여 제막하였다. 0.5, 1.0, 1.5 및 2.0 N $NaClO_4$ 용액에서 3 전극 시스템 (Ag/AgCl 기준전극, 백금선 카운터 전극 및 LB 필름이 코팅된 ITO 작업전극)으로 순환전압전류법을 사용하여 전기화학적 측정을 시도하였다. 측정 범위는 연속적으로 1650 mV로 산화시키고, 초기전위인 -1350 mV로 환원시켰다. 그 결과, 인지질 화합물의 LB 필름은 순환전압전류도표로부터 오직 산화전류로 인한 비가역공정으로 나타났다. LB 필름의 확산계수(D) 효과는 인지질 화합물 양의 증가로 인하여 감소하였다.
본 연구는 불포화 인지질인 DLPC liposome에 도라지(Platycodon grandiflorum A. DC, PG)의 용매별 분획물 일정 량을 가하고, 산화제 benzoyl peroxide를 가한 후 시료의 항산화 작용을 비교 분석하였다. 도라지 용매별 추출물 중 ethylether 분획물인 PGMEE와 ethylacetate 분획물인 PGMEA는 $\alpha$-tocopherol의 경우 보다 훨씬 그 산화지수가 낮아두 분획물에 의한 강한 항산화력을 측정할 수 있었으며, 잘알려진 강력한 항산화제인 BHT(butylated hydroxytoluence)의 경우와 비슷한 항산화 효과를 나타내었다. 한편 PGMEE 분획층에 비타민 C를 일정량을 첨가함으로서 상호 보강 작용에 의한 항산화 상승효과를 본 결과, Vit C를 첨가하지 않았을 때보다 산화지수가 횔씬 낮아졌다. BHT 함유의 DLPC liposome의 경우도 Vit C에 의한 비슷한 추과를 나타내었다. 이상의 결과에 의하여 도라지의 PGMEE 분획층에는 BHT와 비슷한 강한 항산화 효과를 가진 물질의 존재가 분명하다고 사료되며 비타민 C 첨가로 인한 항산화 상승 효과도 본 연구결과에 의해 뚜렷이 알 수 있었다. 이와 같은 연구에 의해 여러 질병들의 원인이 될 뿐만 아니라 세포막 손상을 일으키는 활성 산소 또는 유리기의 생성억제 등 균형된 식생활을 통한 식품 섭취의 중요성이 매우크다고 인식되며 특히 식품으로서 애용되고 있는 도라지의 인지질 세포막에 미치는 항산화 효과가 식품으로서 약이 되는 기전 규명에 기초자료가될 것을 바라는 바이다.
This experiment is carried out to study influence of vitamin $B_6$ on serum lipids of rat fed with oxidized oil by heat. The experimental animals use 35 male Sprague-Dawley rats weighing 100 ${\pm}$ 2g. They are divided into 5 groups and fed to experimental diets which are added to 10%, 15%, 20% oxidized oil by heat in addition to 0.01%, 0.04%, 0.06% vitamin $B_6$. Oxidized oil by heat is prepared from the soybean oil by heating at $180^{\circ}C$ for 50 hours. After feeding for 4 weeks, lipid concentrations of sera are as follows; 1. Body weights are higher in experimental diet groups than control diet group. 2. Liver weights are higher in experimental diet groups than control diet group, but spleen weights are lower in experimental diet groups than control diet group. 3. The contents of serum total cholesterol, free cholesterol, HDL-cholesterol are lower in experimental diet groups than control diet group. 4. The contents of serum triglyceride are significantly higher in experimental diet groups than control diet group. 5. The contents of serum phospholipid are lower in experimental diet groups than control diet group.
We carried out this experiment to observe electrochemical properties for LB films of phospholipid(Dilauroyl-L-${\alpha}$-Phosphayidylcholine) and 4-octyl-4'-(5-carboxypentamethylene-oxy)azobenzene mixture by the cyclic voltammetry. LB films of 8A5H and 8A5H-DLPC(1:1, 2:1) were deposited by using the Langmuir-Blodgett method on the ITO glass. We determined electrochemical measurement by using cyclic voltammetry with a three-electrode system, An Ag/AgCl reference elect rode, a platinum wire counter electrode and LB film-coated ITO working electrode measured in 0.1, 0.5, and 1.0 mol/L $NaClO_{4}$ solution. A measuring range was reduced from initial potential to -1350 mV, continuously oxidized to 1650 mV and measured to the initial point. The scan rate were 50, 100, 150 and 200 mV/s. As a result, LB films of 8A5H 8A5H-DLPC appeared irreversible process caused by only the oxidation current from the cyclic voltammogram.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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