Optimal cultural conditions were investigated for the maximal productivity of nucleoside oxidase and peroxidase from Flavobacterium meningosepticum. Sucrose and Polypepton were the best as a carbon source and a nitrogen source. Fe$^{2+}$, Fe$^{3+}$ and Cu$^{2+}$ increased the activities of the two enzymes and were essential in medium containing peptone as a nitrogen source. Nucleoside derivatives such as 2'-deoxyguanosine, 2'-deoxyadenosine, N$^{6}$ -methyladenosine and 1-methyladenosine were effective for the production of the two enzymes. Especially, the addition of N$^{6}$ -methyladenosine and 1-methyladenosine decreased cell growth, but increased the two enzyme activities. High level of oxygen also was an essential factor for formation and/or induction of these enzymes. From the summary of this study about optimal medium and environmental conditions, nucleoside oxidase was biosynthesized in proportion to peroxidase. These results suggested that the role of peroxidase should be degradation of H$_{2}$O$_{2}$ generated by nucleoside oxidase in the cell of Flavobacterium meningosepticum.
The Polyvinyl alcohol (PVA) oxidase is a key enzyme involved in degradation of PVA with PVA hydrolase. The PVA oxidase has been purified to homogeneity from the culture broth of PVA grown Pseudomonas cepacia G5Y strain by ammonium sulfate precipitation, DEAE-cellulose column chromatography, and Sephadex G-150 gel filtration. The molecular weight of the purified enzyme was estimated about 60, 000 daltons by SDS-polyacrylamid gel electrophoresis. The enzyme is most active at 45$\circ$C and at pH 8.5, and is stable below 55$\circ$C and between pH 6 and 9. The enzyme activity was strongly inhibited by Ag$^{2+}$ and Hg$^{2+}$.
Xanthine Oxidase is an enzyme, which oxidizes hypoxanthine to xanthine, and xanthine to uric acid. It is widely distributed throughout various organs including the liver, gut, lungs, kidney, heart, brain and plasma. It is involved in gout pathogenesis. Hence, in the present study, Hologram based Quantitative Structure Activity Relationship Study was performed on a series of Xanthine Oxidase antagonist named 2-(indol-5-yl) thiazole derivatives. The best HQSAR model was obtained using Atoms, Bonds, Connection, Hydrogen, Chirality and Donor Acceptor as fragment distinction parameter using hologram length 71 and 4 components with fragment size of minimum 2 and maximum 5. Significant cross-validated correlation coefficient ($q^2$= 0.563) and non cross-validated correlation coefficients ($r^2$= 0.967) were obtained. The model was then used to evaluate the six external test compounds and its $r^2{_{pred}}$ was found to be 0.798. Contribution map show that presence of propyl ring in indole thiazole makes big contributions for improving the biological activities of the compounds. We hope that our HQSAR model and analysis will be helpful for future design of xanthine oxidase antagonists.
Xanthine Oxidase is an enzyme, which oxidizes hypoxanthine to xanthine, and xanthine to uric acid. It is widely distributed throughout various organs including the liver, gut, lungs, kidney, heart, brain and plasma. It is involved in gout pathogenesis. Hence, in the present study, topomer based Comparative Molecular Field Analysis (topomer CoMFA) was performed on a series of Xanthine oxidase antagonist named 2-(indol-5-yl) thiazole derivatives. The best topomer CoMFA model was obtained with significant cross-validated correlation coefficient ($q^2$ = 0.572) and non cross-validated correlation coefficients ($r^2$ = 0.937). The model was evaluated with six external test compounds and its $r^2{_{pred}}$ was found to be 0.553. The steric and electrostatic contribution map show that presence of bulky and electropositive group in indole thiazole ring is necessary for improving the biological activities of the compounds. The generated topomer CoMFA model could be helpful for future design of novel and structurally related xanthine oxidase antagonists.
The crude alkaloidal fraction of the root of Cynanchum caudatum Max.(Asclepiadaceae) was tested for the effects on the activities of free radical generating enzymes and the formation of lipid peroxide. Aldehyde oxidase was strongly inhibited to about 90% of the activity by treating 1.0 mg/ml of alkaloidal fraction, corresponding to competitive inhibition. Moreover, the formation of lipid peroxide which causes damage of cell membrane was reduced in proportion to the increasing alkaloid concentration. However, xanthine oxidase of which structure and function are similar to those of aldehyde oxidase was not inhibited by the alkaloidal fraction.
A dose, 1g/kg of ethanol produced experimental hyperuricemia in mouse. Ginseng saponins were tested for their ability to alter the hepatic xanthine oxidase activity and the blood level of uric acid in the ethanol-treated mouse. Intraperitoneal injection of ginseng saponin 4mg/kg markedly decreased the xanthine oxidase activity in the ethanol-treated mouse liver. It was also observed that ginseng saponin reduced the blood concentration of uric acid in experimentally induced hyperuricemia by alcohol treatment. In vitro, it was found that a low concentration of ginseng saponin in the reaction mixture incresed the hepatic xanthine oxidase activity, while a high concentration inhibited both enzyme preparations of normal and ethanol treated mice. In contrast with the xanthine oxidase, uricase activity was not influenced by ginseng saponin as well as in vivo. These results suggest there is a possibility that ginseng saponin may have some therapeutic effect on gout and other hyperuricemia syndrome.
Ferricytochrome c was artificially made to receive the aqueous electrons evolved through the influence of illuminated chloroplast. This ferricytochrome c, which was bombarded by electrons, was reduced to ferrocytochrome c by making sure that a certain cytochrome is reduced. This may require an electronic attack that is created by the chloroplast inside the plant cell. The possibility of reversing the oxidation of ferrocytochrome c by cytochrome oxidase was examined using a contrived redox system composed of cytochrome oxidase, ferricytochrome c and chloroplast with illumination. We recognized that the oxidase is unserviceable for the reversibleness in spite of the existence of chloroplast.
This study was designed to observe the effect of tohiene pretreatment on leukocyte variation in whole blood and the oxygen free radical generating, scavenging enzyme activities in neutrophil of bacteria infected rats. Toluene was administered 7 times intraperitoneally at levels of 9.45 mM/kg body weight to the rats and then infected with S. aureus $2\times10^7$ cfu/ml. The toluene treated-rats showed the significantly decreased numbers of lymphocyte and monocytes, but the similiar numbers of neutrophils with the control. Furthermore the increased neutrophils in blood of bacteria infected rats were reduced by the toluene pretreatment. Concomitantly the increased activities of xanthine oxidase and superoxide dismutase in neutrophil of bacteria infected rats were also decreased by the toluene pretreatment. On the other hand, injection of benzaldehyde to rats also led to similiar results in the count of leukocytes, xanthine oxidase and superoxide dismutase activities of neutrophil with those of toluene treated rats. These data suggest that toluene and its intermediate metabolite, benzaldehyde influence on the phagocytosis and defence mechanism of neutrophil.
Using RT-PCR, a cDNA encoding tomato (Lycopersicon esculentum) ACC oxidase has partially been cloned, sequenced and identified. The nucleotide suquence of the clone was in the coding region and shared about 80% of homology iwht the other ACC oxidase genes of tomato, and 70∼84% with those of other plants such as Oryza sativa, Nicotiana tabacum and Helianthus annuus. In the wounded tomato leaves, this nucleotide transcripts were accumulated rapidly and declined slowly thereafter. These results suggested that the predicted clone might be another member of tomato ACC oxidase gene family.
The roots of Cynanhum caudatum (Asclepiadaceae) have been used in folk medicine in Japan and China for the prevention and treatment of various geriatric diseases and also as a cardiotonic agent. Constituents of this plant have mainly been examined for glycosides: besides two steroidal alkaloids, gagaminine and gagamine which was firstly isolated by us, more than 35 polyoxypregnane glycosides and aglycones have also been identified. Gagaminine inhibits potently the hepatic aldehyde oxidase activity and lipid peroxidation in vitro. The present work deals with the comparison of antioxidative activities of gagamine, a new pregnane alkaloid, three isolated polyoxypregnanes containing a keto group at C-20 with those of gagaminine, a potent antioxidant, in order to explain the structure-activity relationships. The results of this study further prove that the cinnamoyl group of gagaminine is very important for the inhibition on the aldehyde oxidase activity while the nicotinoyl group is necessary for anti-lipid peroxidation. Besides that, the keto compounds having no ester group at C-12 were found to be more active than the others except gagaminine.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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