Effect of antibiotics belonging to three different groups, including third generation cephalosporins, aminoglycosides, and quinolones, on the outer membrane protein (OMP) profile of Klebsiella pneumoniae was examined. It was found that a new OMP (porins) of 40 kDa molecular mass was expressed in Klebsiella pneumoniae, when grown in the presence of ceftazidime, whereas new proteins with 30 kDa and 22 kDa masses were detected in the presence of ofloxacin. The immunoblot analysis showed that the new proteins of 40 kDa and 30 kDa molecular masses were expressed on the outer envelope, when being exposed to antibiotics ceftazidime and ofloxacin, respectively. This finding is important, as the outer surface comes in contact with the immune system, and therefore may have a bearing on the outcome of the disease.
Ko, Kyong-Cheol;Lee, Binna;Cheong, Dae-Eun;Han, Yunjon;Choi, Jong Hyun;Song, Jae Jun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.25
no.11
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pp.1835-1841
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2015
A cell surface display system for heterologous expression of the multifunctional cellulase, CelEx-BR12, in Escherichia coli was developed using truncated E. coli outer membrane protein C (OmpC) as an anchor motif. Cell surface expression of CelEx-BR12 cellulase in E. coli harboring OmpC-fused CelEx-BR12, designated MC4100 (pTOCBR12), was confirmed by fluorescence-activated cell sorting and analysis of outer membrane fractions by western blotting, which verified the expected molecular mass of OmpC-fused CelEx-BR12 (~72 kDa). Functional evidence for exocellulase activity was provided by enzymatic assays of whole cells and outer membrane protein fractions from E. coli MC4100 (pTOCBR12). The stability of E. coli MC4100 (pTOCBR12) cellulase activity was tested by carrying out repeated reaction cycles, which demonstrated the reusability of recombinant cells. Finally, we showed that recombinant E. coli cells displaying the CelEx-BR12 enzyme on the cell surface were capable of growth using carboxymethyl cellulose as the sole carbon source.
The outer membrane of Gram-negative bacteria is the outermost layer of cellular environment in which numerous biophysical and biochemical processes are in action sustaining viability. Advances in cell engineering enable modification of bacterial genetic information that subsequently alters membrane physiology to adapt bacteria to specific purposes. Surface display of a functional molecule on the outer membranes is one of strategies that directs host cells to respond to a specific extracellular matter or stimulus. While intracellular expression of a functional peptide or protein fused to a membrane-anchoring motif is commonly practiced for surface display, the method is not readily applicable to exogenous or large proteins inexpressible in bacteria. Chemical conjugation at reactive groups naturally occurring on the membrane might be an alternative, but often compromises fitness due to non-specific modification of essential components. Herein, we demonstrated two distinct approaches that enable site-specific decoration of the outer membrane with a fluorescent agent in Escherichia coli. An unnatural amino acid genetically incorporated in a surface-exposed peptide could act as a chemoselective handle for bioorthogonal dye labeling. A surface-displayed α-helical domain originating from a part of a selected heterodimeric coiled-coil complex could recruit and anchor a green fluorescent protein tagged with a complementary α-helical domain to the membrane surface in a site- and hetero-specific manner. These methods hold a promise as on-demand tools to confer new functionalities on the bacterial membranes.
Proceedings of the Korean Society of Machine Tool Engineers Conference
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1997.04a
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pp.1-5
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1997
The plane surface rolling, one of the plastic working process, good surface condition due to increase of surface roughness and hardness. It is well known that mechanism of surface rolling depends upon rolling conditions such as rolling speed, contact pressure, step length of rolling, the shape of roller and mechanical properties of material. In this study, the optimal value of the above parameter on the surface roughness were investigated by using the rolling tool with NACHI 6000ZZ ball bearing outer races on machine structure carbon steel[SM45C]
Proceedings of the Korean Institute of Surface Engineering Conference
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2016.11a
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pp.189-189
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2016
In this study, the Al-rich AlTiSiN thin films that consisted of TiN/AlSiN nano-multilayers were deposited on the steel substrate by magnetron sputtering, and their high-temperature oxidation behavior was investigated, which has not yet been adequately studied to date. Since the oxidation behavior of the films depends sensitively on the deposition method and deposition parameters which affect their crystallinity, composition, stoichiometry, thickness, surface roughness, grain size and orientation, the oxidation studies under various conditions are imperative. AlTiSiN nano-multilayer thin films were deposited on a tool steel substrate, and their oxidation behavior of was investigated between 600 and $1000^{\circ}C$ in air. Since the amount of Al which had a high affinity for oxygen was the largest in the film, an ${\alpha}-Al_2O_3-rich$ scale formed, which provided good oxidation resistance. The outer surface scale consisted of ${\alpha}-Al_2O_3$ incoporated with a small amount of Ti, Si, and Fe. Below this outer surface scale, a thin ($Al_2O_3$, $TiO_2$, $SiO_2$)-intermixed scale formed by the inwardly diffusing oxygen. The film oxidized slower than the $TiO_2-forming$ kinetics and TiN films, but faster than ${\alpha}-Al_2O_3-forming$ kinetics. During oxidation, oxygen from the atmosphere diffused inwardly toward the reaction front, whereas nitrogen and the substrate element of iron diffused outwardly to a certain extent.
Proceedings of the Korean Institute of Surface Engineering Conference
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2017.05a
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pp.97-97
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2017
This study investigated the corrosion protection by electrodeposited copper layer on AZ31 Mg alloy with and without additional silver layer by immersion test, salt spray test, OCP transient and potentiodynamic polarization experiment. The single electrodeposited Cu layer on AZ31 Mg alloy showed a nodular structure with many imperfections of crevices between the nodules, which resulted in the fast initiation of pitting corrosion within first few hours of immersion. Double-layer coating of Cu and outer Ag layer slightly increased the initiation time for pitting corrosion. Triple-layer coatings of Cu/Ag/Cu exhibited the most efficient corrosion protection of AZ31 Mg alloy, compared to the single- and double-layer coatings. Surface morphology of the outer Cu layer in the triple-layer was changed from the nodular structure to fine particle structure with no crevices due to the presence of an additional Ag layer. Thus, the improved corrosion resistance of AZ31 Mg alloy by electrodeposited Cu/Ag or Cu/Ag/Cu layers is readily ascribed to the decreased number of imperfections in the electrodeposited layers due to the additional silver layer. It is concluded that the additional silver layer provides many nucleation sites for the second Cu plating, resulting in the formation of finer and denser structure than the first Cu electrodeposit.
The dual drug-loaded alginate beads simultaneously containing drug in inner and outer layers were prepared by dropping plain (single-layered) alginate beads into $CaCl_2$ solution. The release characteristics were evaluated in simulated gastric fluid for 2 h followed by intestinal fluids thereafter for 12 h. The surface morphology and cross section of dual drug-loaded alginate beads was also investigated using scanning electron microscope (SEM). The poorlv water-soluble ibuprofen was chosen as a model drug. The surface of single-layered and dual drug-loaded alginate beads showed very crude and roughness, showing aggregated particles, surface cracks and rough crystals. The thickness of dual drug-loaded alginate beads surrounded by outer layer was ranged from about 57 to 329mcm. The distinct chasm between inner and outer layers was also observed. In case of single-layered alginate bead, the drug was not released in gastric fluid but was largely released in intestinal fluid. However, the release rate decreased as the reinforcing $Eudragit^{\circledR}$ polymer contents increased. When the plasticizers were added into polymer, the release rate largely decreased. The release rate of dual drug-loaded alginate beads was stable in gastric fluid for 2 h but largely increased when switched in intestinal fluid. The drug linearly released for 4 h followed by another linear release thereafter, showing a distinct biphasic release characteristics. There was a difference in the release profiles between single-layered and dual drug-loaded alginate beads due to their structural shape. However, this biphasic release profiles were modified by varying formulation compositions of inner and outer layer of alginate beads. The release rate of dual drug-loaded alginate beads slightly decreased when the outer layer was reinforced with $Eudragit^{\circledR}$ RS1OO polymers. In case of dual drug-loaded alginate beads with polymer-reinforced outer layer only, the initial amount of druc released was low but the initial release rate (slope) was higher due to more swellable inner cores when compared to polymer-reinforced inner cores. The current dual drug-loaded alginate beads may be used to deliver the drugs in a time dependent manner.
This study classified outer-ring galaxies using 25,308 galaxies within z=0.05 from the SDSS DR7, which are larger than Rpet>6 arcsec and whose minor-to-major axis ratio (b/a)<0.6. We selected 531 galaxies that have ring-like structures by visual inspection of the color images of 25,308 galaxies; these galaxies with ring-like structures served as a primary sample from which we selected 90 outer-ring galaxies. The final sample of 69 outer-ring galaxies was selected by examining the photometric properties of the candidate galaxies. Their properties were determined by conducting surface photometry on their u, g, r, i, and z images. The frequency of the outer-ring galaxies was found to be 0.3% of the local galaxies. We examined the environment of the outer-ring galaxies using two measures of environment, namely, the projected distance to the nearest-neighbor galaxy and the local background density. We did not observe any notable difference between outer-ring and other galactic environments.
Transactions of the Korean Society of Machine Tool Engineers
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v.16
no.3
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pp.109-116
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2007
The present study examined mechanical properties according to the change of outer circumference in the friction welding of A2024-T4 stock, which is used much as aircraft structure, truck wheel, stainless materials and A2024-T4 stock with 10 hollow at the center. Welding conditions were fixed at RPM 2,000rpm, friction pressure of 50MPa, friction time of 1.5sec, upset pressure of 120MPa and upset time of 2.0 seconds. From the result of this study were drawn conclusions as follows : According to the result of a tensile strength test, the solid shaft showed linear increase of tensile strength with the change of outer circumference, the hollow shaft showed maximum tensile stength when the length (L) was 2mm and decrease of tensile strength with the change of outer circumference, hardness appeared to increase and then decrease for welding interface, and it showed maximum hardness 155Hv at L=5mm of the solid shaft. Bending strength increased linearly far change of the distance (L) of outer circumference in the solid shaft and then decreased linearly in the hollow shaft. the result of examining tissue, the tissue grew finer around the welding interface and divided the basic material and the welding surface.
Journal of the Korean Society of Manufacturing Process Engineers
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v.16
no.3
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pp.100-106
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2017
A universal outer diameter measurement module was developed using a linear variable differential transformer (LVDT). This outer diameter measurement module enables simultaneous measurement of outer diameter, displacement, and perpendicularity of bench-type high-precision products by combining analogue and digital measurement principles with mechanically precise and fine adjustment functions. The developed module showed a performance of 0.001mm in measurement resolution, 0.001mm in measurement accuracy, reference surface abrasion lower than Ra 0.1864, and measurement stability of 0.002mm. Therefore, we have acquired domestic measurement technology to improve productivity by securing technical competitiveness for universal diameter measurement technology, lower production costs through import substitution, and increased quality of products with more precise measurement technology. Furthermore, a substitution effect is expected for expensive import measurement system equipment used in production, research, and inspection sites in industries that produce precision processing products such as automobile and machine components.
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