The purpose of this study was to investigate effects of osteoporosis on fracture wound healing in the calcium deficient rat. To research the experiment some ten-week old Wistar strain rats with approximately 300 gms weight were selected. Then, the rats were divided into two groups: Normal diet group(rats given a normal diet before and after bone fracture) and Low calcium diet group(rats given a low calcium diet before and after bone fracture). Both groups had been provided with each diet for three weeks. When the rats became thirteen weeks old, the mandibular angle of rats in both groups was artificially fractured for test. The healing of fracture wounds was reviewed by using soft x-ray radiography and /sup 99m/Tc-MDP bone scan and also histopathologic examination. The obtained results were as follows : 1. The radiolucency of the fracture site for the Normal diet group started to decrease from the 14th day since the experiment was made, while the Low calcium diet group began decrease in the radiolucency from the 21st day of the experiment. The radiolucency for the Normal diet group disappeared at the 42nd day, but one for the Low calcium diet group disappeared at the 56th day of the experiment. 2. The highest uptake rate of /sup 99m/Tc-MDP stood at the 14th day of the experiment in the Normal diet group and the Low calcium diet group's maximum rate was recorded at the 21st day of the experiment. These both groups were gradually experiencing decrease in the uptake rate as the experiment time was going on. However, the uptake rate in the Low calcium diet group was lower than one in the Normal diet group. 3. For the Normal diet group, the newly formed trabeculae, which were similar to one of the surroundung bone, were seen at the 42nd day of the experiment. On the other hand, the Low calcium diet group showed at the 56th day of the experiment that the osteoporotic findings looked weak, irregular trabeculae, and also large bone marrow space were observed clearly. As a result of the above experiment, it is said that the healing of the fracture can be completed for both groups, the Normal diet group and the Low calcium diet group. However, the amount of the newly formed bone wound in the Low calcium diet group is rather decreased compared to one in the Normal diet group and at the same time the healing of the fracture is delayed in the Low calcium diet group. Consequently, for the successful healing of fracture in osteoporosis, it is considered that the management of the etiologic factors of osteoporosis must be preceded. The more study of calcium metabolism and functions of osteoblast and osteoclast needs to proceed on.
여러 단백질과 다양한 무기질(칼슘 등)을 함유한 단단한 기관인 골은 정상적으로 다른 연조직 세포로 무기질을 공급하는 역할을 수행하지만, 비타민 결핍, 노화, 폐경기 및 대사성 질환 등으로 인해서 골다공증이 유발되고 동시에 다양한 연조직(심장, 대동맥, 신장, 허파, 췌장 등)의 석회화가 빈번히 유도된다. 같은 중간엽 줄기세포로부터 유래되는 연조직을 구성하는 세포와 조골세포 사이에서는 상호 횡간의 분화가 될 수 있는 여지가 있어, 연조직 세포는 칼슘 축적으로 골을 형성하는 조골세포와 유사한 세포로 분화될 수 있다. 연조직을 이루는 다양한 연조직 장기의 칼슘 축적으로 인한 석회화는 치명적인 장기손상으로 생명을 위협할 수 있으므로 적극적인 예방과 치료가 중요할 것이다. 골다공증과 연조직 석회화는 상호 밀접한 연계성이 있어 한 가지의 질병이 진행되면 다른 질병이 연속적으로 발병할 우려가 있으므로 초기 질병에 대한 적극적인 치료가 필요하다. 향후 초고속고령화 사회 진입으로 이의 두 질환의 급격한 증가가 예상되므로, vitamin K와 D를 비롯한 다양한 무기질을 균형적으로 조절할 수 있는 식습관과 다량의 항산화제를 함유한 음식물 섭취로 이의 질환을 예방할 수 있을 것이다.
본 실험에서는 폴리칸(베타-글루칸)과 칼슘 락테이트 글루코네이트 1:9 (g/g) 복합 조성물인 Polycalcium의 시험관 내(in vitro) 골다공증에 대한 효과를 사람 유래 조골세포(human primary osteoblast)와 설치류 유래 파골 전구세포(raw264.7 cell)를 이용하여 평가하였다. Polycalcium이 조골세포에 미치는 영향을 확인한 결과, 10 mg/ml 농도의 polycalcium 처리군에서 무처리 대조군에 비해 유의성 있는 조골세포의 수적 증가가 각각 배양 3, 7 및 10일 후에 확인되었으며, 또한 10 mg/ml 농도의 polycalcium 처리군에서 무처리 대조군에 비해 유의성있는 ALP함량의 증가가 확인되었다. Polycalcium이 파골세포에 미치는 영향을 확인한 결과, 각각 $10^{-5}$, $10^{-3}$ 및 $10^{-1}$ mg/ml polycalcium 처리군에서 무처리 대조군에 비해 유의성 있는 파골세포의 수적 감소가 배양 4일 후에 확인되었다. 이 같은 결과를 바탕으로, polycalcium이 조골세포의 증식 촉진 효과와 함께 파골세포 형성 억제 효과가 있는 것으로 확인되었다.
Kim, Bum-Joon;Kim, Se-Hoon;Lee, Haebin;Lee, Seung-Hwan;Kim, Won-Hyung;Jin, Sung-Won
Journal of Korean Neurosurgical Society
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제60권2호
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pp.225-231
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2017
Objective : Solid bone fusion is an essential process in spinal stabilization surgery. Recently, as several minimally invasive spinal surgeries have developed, a need of artificial bone substitutes such as demineralized bone matrix (DBM), has arisen. We investigated the in vivo bone growth rate of DBM as a bone void filler compared to a local autologous bone grafts. Methods : From April 2014 to August 2015, 20 patients with a one or two-level spinal stenosis were included. A posterior lumbar interbody fusion using two cages and pedicle screw fixation was performed for every patient, and each cage was packed with autologous local bone and DBM. Clinical outcomes were assessed using the Numeric Rating Scale (NRS) of leg pain and back pain and the Korean Oswestry Disability Index (K-ODI). Clinical outcome parameters and range of motion (ROM) of the operated level were collected preoperatively and at 3 months, 6 months, and 1 year postoperatively. Computed tomography was performed 1 year after fusion surgery and bone growth of the autologous bone grafts and DBM were analyzed by ImageJ software. Results : Eighteen patients completed 1 year of follow-up, including 10 men and 8 women, and the mean age was 56.4 (32-71). The operated level ranged from L3/4 to L5/S1. Eleven patients had single level and 7 patients had two-level repairs. The mean back pain NRS improved from 4.61 to 2.78 (p=0.003) and the leg pain NRS improved from 6.89 to 2.39 (p<0.001). The mean K-ODI score also improved from 27.33 to 13.83 (p<0.001). The ROM decreased below 2.0 degrees at the 3-month assessment, and remained less than 2 degrees through the 1 year postoperative assessment. Every local autologous bone graft and DBM packed cage showed bone bridge formation. On the quantitative analysis of bone growth, the autologous bone grafts showed significantly higher bone growth compared to DBM on both coronal and sagittal images (p<0.001 and p=0.028, respectively). Osteoporotic patients showed less bone growth on sagittal images. Conclusion : Though DBM alone can induce favorable bone bridging in lumbar interbody fusion, it is still inferior to autologous bone grafts. Therefore, DBM is recommended as a bone graft extender rather than bone void filler, particularly in patients with osteoporosis.
Objective : Osteoporosis is a disease of unbalanced bone metabolism that results in low bone mineral density with increased bone fragility and propensity for fractures. The increased rate of bone fracture due to osteoporosis places a significant burden on public health care expenditures. Therefore, numerous studies have been designed and performed to identify the drugs or health foods that can improve the bone quality or quantity. This study was designed to evaluate and analyze the therapeutic effects of rutin on histomorphometric values of the spine and femur in an osteoporotic mouse model induced by bilateral ovariectomy. Methods : Thirty female ICR mice (8 weeks old) underwent either a sham operation (only abdominal incision, sham group, n=10) or bilateral ovariectomy (n=20). The ovariectomized (OVX) animals were randomly divided into two groups : untreated OVX group (OVX-C, n=10), or rutin-administered group (OVX-R, n=10). The OVX-C group received weight-adjusted doses of saline vehicle and the OVX-R group received 50 mg/kg of rutin intraperitoneally, starting 1 day after surgery. At 4 and 8 weeks after surgery, serum estrogen, osteocalcin, alkaline phosphatase (ALP), and the telopeptide fragment of type I collagen C-terminus (CTX-1) were analyzed. Interleukin (IL)-1β, IL-6, IL-10, and tumor necrosis factor (TNF)-α were also analyzed. Bone histomorphometric parameters of the 4th lumbar vertebra and femur were determined by micro-computed tomography. Results : In OVX-C group, ALP, osteocalcin, CTX-1, IL-1β, IL-6, and TNF-α levels were significantly increased at 4 and 8 weeks compared to sham operation group. Rutin administration after OVX statistically significantly reduced ALP, CTX-1, IL-1β, IL-6, and TNF-α levels at 4 and 8 weeks. Rutin administration also improves bone histomorphometric parameters including trabecular bone volume fraction, trabecular thickness, and trabecular number. Trabecular separation was also decreased in OVX-R group compared to OVX-C group. Conclusion : The present study demonstrated that rutin has therapeutic effects on improving bone histomorphometric values in an OVX mouse model. The improvement in histomorphometric values may be associated with the reduction of osteoclastic activity via inhibition of IL-1β, IL-6, and TNF-α. In future studies, the mechanism for the effect of rutin on osteoporosis should be demonstrated more clearly to use rutin in human osteoporosis.
Purpose : The first purpose of this study is to find out whether the water extract of Rehmanniae Radix Preparat(RRP), Cuscutae Semen(CS) and their combination(Ssangbohwan, SBH) have the effect of suppressing Receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand(RANKL)-induced osteoclast differentiation. The second purpose of this study is to find out whether the water extract of RRP, CS and SBH have the effect of inhibiting osteoporosis in an osteoporosis model induced by lipopolysaccharide(LPS). Methods : After promoting differentiation of osteoclasts by treating the RANKL, we observed the effect by the administration of RRP, CS and SBH. In addition, by means of Reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR), we assayed mRNA expression levels of NFATc1, c-Fos, TRAP and GAPDHS(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, spermatogeni) from bone marrow macrophages(BMMs). Similarly, the protein expression levels of NFATc1 (Nuclear factor of activated T-cells, cytoplasmic1), C-Fos, MAPKs(Mitogen-activated protein kinases) and ${\beta}$-actin in cell lysates were analyzed by means of Western Blotting. Finally, we determined the anti-osteoporotic effects of RRP, CS and SBH, through the use of Lipopolysaccharide-induced bone-loss mouse. Results : RRP, CS and SBH showed remarkable inhibitive effect on RANKL-treated osteoclast differentiation without cytotoxicity. SBH inhibited the phosphorylation of p38, Jun N-terminal kinases(JNK), and I-${\kappa}B$ and down-regulated the induction of c-Fos and NFATc1 by RANKL. RRP, CS suppressed degradation of I-${\kappa}B$, but it did not affect c-Fos and NFATc1 by RANKL. Lastly, in vivo data showed that RRP and SBH prevented bone erosion by LPS treatment. Conclusions : These results demonstrate SBH can be effective remedy for bone-loss diseases such as osteoporosis.
Park, Jin Soo;Park, Ga Young;Choi, Han Gyul;Kim, Seong Joung;Kim, June Hyun;park, Min Cheol;Kim, Yun Kyung;Han, Sang Yong;Jo, Eun Heui
Journal of Acupuncture Research
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제34권2호
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pp.1-18
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2017
Objectives : The purpose of this study was to evaluate the effects of water extracts of Eucommiae cortex (EC), Psoraleae semen (PS), and their combination on receptor activator of nuclear factor-kappa-B ligand (RANKL)-induced osteoclast differentiation. Methods : We assayed the protein expression levels of nuclear factor of activated T-cells, cytoplasmic 1 (NFATc1), c-Fos, mitogen-activated protein kinases (MAPKs), and ${\beta}-actin$ in cell lysates using western blotting. Similarly, mRNA expression levels of NFATc1, c-Fos, tartrateresistant acid phosphate (TRAP), and glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, spermatogeni (GAPDHS) from bone marrow macrophages (BMMs) were analyzed using reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Furthermore, we determined the anti-osteoporotic effects of the water extracts of EC, PS, and their combination in a lipopolysaccharide (LPS)-induced bone-loss mouse model. Results : The in vitro data revealed showed that the combination of EC and PS extract showed a more remarkable inhibition of osteoclast differentiation than each herb did alone. The combination downregulated the induction of c-Fos, NFATc1, and TRAP by suppressing the phosphorylation of p38 and c-Jun N-terminal kinases (JNKs) and inhibiting nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells ($NF-{\kappa}B$). Lastly, the in vivo data showed that PS reduced the LPS-induced bone erosion. Conclusion : The result of this study suggests that EC and PS could be potential therapeutic agents for bone loss diseases such as osteoporosis.
This study was performed to investigate the changes of mandibular condyle by low calcium diet and the effects of irradiation on the bone in osteoporotic state. In order to carry out this experiment, 80 seven-week old Sprague-Dawley strain rats weighing about 150 gm were selected and equally divided into one experimental group of 40 rats and one control group with the remainder. The experimental group and the control group were then subdivided into two group and exposed to irradiation. The two irradiation groups received a single dose of 20 Gy on the jaw area only and irradiated with a cobalt-60 teletherapy unit. The rats in the control and experimental groups were serially terminated by fours on the 3rd, the 7th, the 14th, and the 21st day after irradiation. After termination, both sides of the dead rats mandibular condyle were removed and fixed with 10% neutral formalin. The bone mineral density of mandibular condyle was measured by use of dual energy X-ray bone densitometer(model DDX-alpha, Lunn Corp., U. S. A.). The mandibular condyle was radiographed with Hitex HA-80(Hitex Co., Japan). Thereafter, the obtained radiographs were observed, and the mandibular condyle was further decalcified and embedded in paraffin as the general method. The specimen sectioned and stained with hematoxylin-eosin, PAS and Rabbit Anti-Human Tumor Necrosis Factor-a observed by a light microscope. The obtained results were as follows: 1. In the non-irradiated group with the low calcium diet, the bone mineral density of the condyle was markedly decreased after 14 days, and decrease the number of trabeculae of the condyle and resorption of the calcified cartilaginous zone were observed after 3 days. On microscopic observations, the number nd size of trabeculae were decreased after 7 days of experiment. 2. In the irradiated group with the low calcium diet, the bone mineral density of the condyle was markedly decreased after 14 days and resorption of the calcified cartilaginous zone and decrease the number and coarse of the trabeculae of the condyle were observed. These findings were extended rather than in non-irradiated group with low calcium diet. On microscopic observations, many osteoclasts were detected and the number and size of trabeculae were somewhat decreased after 7 days. Also there was degenerative changes of tissues of bone marrow on the 14th day but that condition was restored on the 21st day of experiment. 3. In the irradiated group with normal diet, the bone mineral density of the condyle was somewhat decreased with times and degree of decrease of the number of trabeculae was somewhat larger than in the non-irradiated group with normal diet. On microscopic observations, the tissues of bone marrow were atrophic and degenerative changes but that condition was restored on the 21st day of experiment. 4. In immunocytochemical findings, in the irradiated and non-irradiated groups with low calcium diet, negative or partial positive response to TNF was observed, but positive response in the normal diet groups.
본 연구에서는 각기 다른 측정 부위에서 도출된 골밀도와 골소주 패턴 간의 상관관계를 복합적으로 분석하여 측정부위에 따른 평가변수의 골다공증 예측 가능성을 평가하고자 하였다. 실험대상은 40대 이상의 폐경기 이후 여성 40명을 선정하였고, T-Score 분류법에 따라 각각 20명의 정상군 및 골다공증군으로 분류하였다. 실험대상의 골밀도는 이중 에너지 X선 흡수 계측법을 통해 대퇴경부(Femoral Neck), 전자부(Trochanter) 및 워드 삼각부(Ward's Triangle)에서 측정하였다. 또한 각 측정부위에 $50{\times}50$ 픽셀 크기의 관심영역을 지정하고, 기존 연구에서 제안된 영상처리기법을 적용하여 각 영역의 골소주 패턴을 추출하였다. 골다공증을 예측하기 위한 평가변수는 구조적 변수(평균 회색조, 골면적, 골둘레, 골두께, 말단거리), 골격화 변수(골개수, 골길이) 및 프랙탈 차원(fractal dimension)으로 구분되는 총 8가지를 선정하였다. 실험결과, 골면적, 골둘레, 골두께, 말단거리, 골개수, 골길이 및 프랙탈 차원이 골밀도를 유의하게 반영하였고(p<0.003), 평가변수의 분석을 통한 골다공증의 높은 예측 가능성을 확인하였다.
Ginsenosides, which are the active materials of ginseng, have biological functions that include anti-osteoporotic effects. Aqueous ginseng extract inhibits osteoclast differentiation induced by receptor activator of NF-${\kappa}B$ ligand (RANKL). Aqueous ginseng extract produces chromatography peaks characteristic of ginsenosides. Among these peaks, ginsenoside Re is a major component. However, the preventive effects of ginsenoside Re against osteoclast differentiation are not known. We studied the effect of ginsenoside Re on osteoclast differentiation, RANKL-induced tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) activity, and formation of multinucleated osteoclasts in vitro. Ginsenoside Re hampered osteoclast differentiation in a dose-dependent manner. In an in vivo zebrafish model, aqueous ginseng extract and ginsenoside Re had anti-osteoclastogenesis effects. These findings suggest that both aqueous ginseng extract and ginsenoside Re prevent bone resorption by inhibiting osteoclast differentiation. Ginsenoside Re could be important for promoting bone health.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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