Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.21
no.5
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pp.1148-1153
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2007
Streptococcus mutans is considered one of the primary etiologic agents of dental caries. we studied the effect of the ethanol extracts of Tribuli fructus (T. fructus) on the growth, biofilm formation, acid production, adhesion and insoluble glucan synthesis of S. mutans. The ethanol extracts of T. fructus showed concentration dependent inhibitory activity against the growth and acid production of S. mutans, and produced significant inhibition at the concentration of 0.025, 0.05, 0.1, 0.2, 0.3, 0.5 mg/ml compared to the control group. In the biofilm assay, the ethanol extracts of T. fructus inhibited formation of biofilm synthesized by S. mutans at the concentration of 0.05 mg/ml. The extracts markedly inhibited S. mutans adherence to HA treated with saliva, and cell adherence was repressed by more than 50% at the concentration 0.05 mg/ml. On the activity of glucosyltransferase which synthesizes water insoluble glucan form sucrose, ethanol extract of T. fructus showed more than 10% inhibition over the concentration of 0.025 mg/ml. Hence, we conclude that T. fructus might be a candidate of anticaries agent. Further studies are necessary to clarify the active constituents of T. fructus responsible for such biomolecular activities.
The objective of this study was to evaluate the effects of NaCl on the biofilm formations of the isolate from Staphylococcus aureus outbreaks linked to ham. The S. aureus ATCC13565 isolated from ham was exposed to NaCl concentrations of 0%, 2%, 4%, and 6% supplemented in tryptic soy broth (TSB) for 24 h at $35^{\circ}C$, followed by plating 0.1 mL of the culture on tryptic soy agar containing 0%, 2%, 4%, and 6% NaCl, respectively. After incubating at $35^{\circ}C$ for 24 h, the colonies on the plates were collected and diluted to $OD_{600}$ = 0.1. The diluents of S. aureus were incubated on a 96-well flat bottom plate containing TSB plus the appropriate NaCl concentrations, and the biofilm formation was quantified by crystal violet staining after being incubated at $35^{\circ}C$ for 9 h. Confocal laser scanning microscope (CLSM) was also used for visualizing the biofilm formation of S. aureus at NaCl concentrations of 0%, 2%, 4%, and 6%. The transcriptional analysis of biofilm-related genes, such as icaA, atl, clfA, fnbA, sarA, and rbf, was conducted by quantitative real-time PCR. Crystal violet staining and CLSM showed that the biofilm formations of S. aureus increased (p<0.05) along with the NaCl concentrations. Moreover, the expression of the icaA genes was higher at the NaCl concentrations of 4% and 6% as compared with 0% of NaCl by approximately 9-folds and 20-folds, respectively. These results indicated that the NaCl formulated in processed food may increase the biofilm formations of S. aureus by increasing the icaA gene expressions.
Objectives: Cetylpyridinium chloride CPC-based mouthwashes are well known to have no harmful ingredients in the mouth and can be used for a long time. The purpose of this study was to evaluate the effect of using CPC-based mouthwashes to suppress the biofilm formation and antibiotics for handling orthodontic appliances. Methods: To measure the antibacterial effect, Streptococcus mutans (S. mutans) cultured orthodontic appliances were precipitated in Gargreen and Polident for 5 minutes, incubated at 37℃ for 24 hours(h). In order to measure the biofilm removal effect, the degree of biofilm formation on the orthodontic appliances was stained with a methylene blue and the difference before and after was compared using image J software program (NIH Image J; NIH, Bethesda, MD). Results: The viability of S. mutans according to the concentration showed that Gargreen and Polident inhibited colony formation compared to the control, respectively (p<0.01). The degree of biofilm formation was significantly higher in the control, however both Gargreen and Polident significantly reduced it compared to the before and after condition on removable orthodontic appliances (p<0.01). Conclusions: This study suggests that the use of Gargreen, a cetylpyridinium chloride based oral cleaning cleanser, could be replaced by Polident for antibacterial effect and biofilm formation on removable orthodontic appliances.
LIVE/DEAD$^{(R)}$ BacLight$^{TM}$ and alamarBlue$^{(R)}$ are fluorescent materials used for the enumeration of live and dead bacteria. LIVE/DEAD$^{(R)}$ BacLight$^{TM}$ is generally used for confocal microscopy applications to differentiate live from dead bacteria in a biofilm or planktonic state. AlamarBlue$^{(R)}$ has also been used widely to assay live and dead bacteria in a planktonic state. Whilst these materials are successfully utilized in experiments to discriminate live from dead bacteria for several species of bacteria, the application of these techniques to oral bacteria is limited to the use of LIVE/DEAD$^{(R)}$ BacLight$^{TM}$ in biofilm studies. In our present study, we assessed whether these two methods could enumerate live and dead oral bacterial species in a planktonic state. We tested the reagents on Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Porphyromonas gingivalis, Aggregatibacter actinomycetemcomitans and Enterococcus faecalis and found that only LIVE/DEAD$^{(R)}$ BacLight$^{TM}$ could differentiate live from dead cells for all five of these oral strains. AlamarBlue$^{(R)}$ was not effective in this regard for P. gingivalis or A. actinomycetemcomitans. In addition, the differentiation of live and dead bacterial cells by alamarBlue$^{(R)}$ could not be performed for concentrations lower than $2{\times}10^6$ cells/ml. Our data thus indicate that LIVE/DEAD$^{(R)}$ BacLight$^{TM}$ is a more effective reagent for this analysis.
The water discharged from dental unit waterlines (DUWLs) is heavily contaminated with bacteria. The development of efficient disinfectants is required to maintain good quality DUWL water. The purpose of this study was to establish a DUWL biofilm model using well-plates to confirm the effectiveness of disinfectants in the laboratory. Bacteria were obtained from the water discharged from DUWLs and incubated in R2A liquid medium for 10 days. The bacterial solution cultured for 10 days was made into stock and these stocks were incubated in R2A broth and batch mode for 5 days. Batch-cultured bacterial culture solution and polyurethane tubing sections were incubated in 12-well plates for 4 days. Biofilm accumulation was confirmed through plating on R2A solid medium. In addition, the thickness of the biofilm and the shape and distribution of the constituent bacteria were confirmed using confocal laser microscopy and scanning electron microscopy. The average accumulation of the cultured biofilm over 4 days amounted to $1.15{\times}10^7CFU/cm^2$. The biofilm was widely distributed on the inner surface of the polyurethane tubing and consisted of cocci, short-length rods and medium-length rods. The biofilm thickness ranged from $2{\mu}m$ to $7{\mu}m$. The DUWL biofilm model produced in this study can be used to develop disinfectants and study DUWL biofilm-forming bacteria.
Park, Min Jeong;Kim, Hye Soo;Kim, Han Bi;Park, JunHo;Yu, Chan Yeol;Cho, Soo Jeong
Journal of Life Science
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v.32
no.1
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pp.56-62
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2022
This study was investigated to evaluate the potential of Stewartia koreana Nakai as an oral healthcare material. The inhibitory effects of extracts on the biofilm formation and fimbriae genes expression of Porphyromonas gingivalis were determined by minimal inhibitory concentrations (MIC), biofilm biomass staining, SEM, and qRT-PCR analysis. The S. koreana Nakai branch was extracted into 70% ethanol, and bacteriostatic MIC of extracts against P. gingivalis were 0.6 mg/ml. In P. gingivalis cultures treated with 0.2-2.0 mg/ml of extract, biofilm production rate was significantly decreased in a concentration-dependent manner. The morphology of treated and untreated samples was observed by SEM, and cell aggregation and biofilm were only observed in those treated with extract. Subsequently, qRT-PCR analysis showed that the mRNA expression on fimbriae genes fimA and fimB was suppressed in a concentration-dependent manner. Based on these results, it can be suggested that S. koreana branch extract has the potential to be used as naturally derived oral healthcare material because of its bacteriostatic action and inhibition of P. gingivalis biofilm formation.
PURPOSE. The aim of this study was to investigate the destructive effects of biofilm formation and/or biocorrosive activity of 6 different oral microorganisms. MATERIALS AND METHODS. Three different heat polymerized acrylic resins (Ivocap Plus, Lucitone 550, QC 20) were used to prepare three different types of samples. Type "A" samples with "V" type notch was used to measure the fracture strength, "B" type to evaluate the surfaces with scanning electron microscopy and "C" type for quantitative biofilm assay. Development and calculation of biofilm covered surfaces on denture base materials were accomplished by SEM and quantitative biofilm assay. According to normality assumptions ANOVA or Kruskal-Wallis was selected for statistical analysis (${\alpha}$=0.05). RESULTS. Significant differences were obtained among the adhesion potential of 6 different microorganisms and there were significant differences among their adhesion onto 3 different denture base materials. Compared to the control groups after contamination with the microorganisms, the three point bending test values of denture base materials decreased significantly (P<.05); microorganisms diffused at least 52% of the denture base surface. The highest median quantitative biofilm value within all the denture base materials was obtained with P. aeruginosa on Lucitone 550. The type of denture base material did not alter the diffusion potential of the microorganisms significantly (P>.05). CONCLUSION. All the tested microorganisms had destructive effect over the structure and composition of the denture base materials.
Insoluble glucans synthesized by Streptococcus mutans enhance the pathogenicity of oral biofilm by promoting the adherence and accumulation of cariogenic bacteria on the surface of the tooth. The objective of this study was to investigate the effect of Leuconostoc spp. on the in vitro formation of S. mutans biofilm. Three strains, Leuconostoc gelidum A TCC 49366, Leuconostoc mesenteroides ssp. cremoris A TCC 19254 and Leuconostoc mesenteroides ssp. mesenteroides ATCC 8293, were used in this study. They exhibited profound inhibitory effects on the formation of S. mutans biofilm and on the proliferation of S. mutans. The water-soluble polymers produced from sucrose were most strongly produced by L. gelidum, followed by L. mesenteroides ssp. cremoris and L. mesenteroides ssp. mesenteroides. The mean wet weights of the artificial biofilm of S. mutans were also significantly reduced as a result of the addition of the water-soluble polymers obtained from Leuconostoc cultures. According to the results of thin-layer chromatographic analysis, the hydrolysates of the water-soluble polymers produced by Leuconostoc were identical to those of dextran T-2000, forming predominately ${\alpha}-(1-6)$ glucose linkages. These results indicate that dextran-producing Leuconostoc strains are able to inhibit the formation of S. mutans biofilm in vitro.
Park, Jong Hew;Kim, Yong-Gun;Um, Heung-Sik;Lee, Si Young;Lee, Jae-Kwan;Chang, Beom-Seok
Journal of Dental Rehabilitation and Applied Science
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v.35
no.3
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pp.160-169
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2019
Purpose: The purpose of this study was to evaluate the antimicrobial effects of a toothbrush with light-emitting diodes (LEDs) on periodontitis-associated dental biofilm attached to a zirconia surface by static and dynamic methods. Materials and Methods: Zirconia disks (12 mm diameter, 2.5 mm thickness) were inserted into a 24-well plate (static method) or inside a Center for Disease Control and Prevention (CDC) biofilm reactor (dynamic method) to form dental biofilms using Streptococcus gordonii and Fusobacterium nucleatum. The disks with biofilm were subdivided into five treatment groups-control, commercial photodynamic therapy (PDT), toothbrush alone (B), brush with LED (BL), and brush with LED+erythrosine (BLE). After treatment, the disks were agitated to detach the bacteria, and the resulting solutions were spread directly on selective agar. The number of viable bacteria and percentage of bacterial reduction were determined from colony counts. Scanning electron microscopy (SEM) was performed to visualize alterations in bacterial morphology. Results: No significant difference in biofilm formation was observed between dynamic and static methods. A significant difference was observed in the number of viable bacteria between the control and all experimental groups (P < 0.05). The percentage of bacterial reduction in the BLE group was significantly higher than in the other treated groups (P < 0.05). SEM revealed damaged bacterial cell walls in the PDT, BL, and BLE groups, but intact cell walls in the control and B groups. Conclusion: The findings suggest that an LED toothbrush with erythrosine is more effective than other treatments in reducing the viability of periodontitis-associated bacteria attached to zirconia in vitro.
Bacterial infection after implant installation or bone graft is a serious complication. Bone grafts represent a temporary foreign body lacking vascularisation and are therefore of increased susceptibility to infection, which may be introduced either intraoperatively or postoperatively. Bone graft-associated infections are due to biofilm formation on the surface of the bone graft and often require removal of the infected bone graft with substantial graft failure. In this review, the implant and graft related infection, the role of biofilm and the management will be discussed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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