Cancer immunotherapy using gene-modified tumor cells is safe and customized cancer treatment method. In this study, we made gene-modified tumor cells by transferring costimulatory molecules, 4-1BBL and OX40L, into tumor cells using lentivirus vector, and identified anti-cancer effect of gene-modified tumor cells in CT26 mouse colorectal tumor model. We construct pLVX-puro-4-1BBL, -OX40L vector for lentivirus production and optimized the transfection efficiency and transduction efficiency. The transfection efficiency is maximal at DNA:cationic polymer = 1:0.5 and DNA 2 ㎍ for lentivirus production. Then, the lentiviral including 4-1BBL and OX40L was used to deliver CT26 mouse tumor cells to establish optimal delivery conditions according to the amount of virus. The transduction efficiency is maximal at 500 μL volume of lentiviral stock without change in cell shape or growth rate. CT26-4-1BBL, CT26-OX40L significantly inhibited the tumor growth compare with CT26-WT or CT26-β-gal cell line. These data showed the possibility the use of genetically modified tumor cells with costimulatory molecule as cancer immunotherapy agent.
홍삼에서 분리한 수용성 갈변물질의 항산화 활성을 linoleic acid, Ox-brain autoxidant, Fe$^{2+}$ ADP/NAD 및 cumene hydoperoxide 시스템에서 조사한 결과를 다음과 같다. 1. Linoleic acid :투석내액의 갈변물질보다 투석외액의 갈변물질 쪽에서 hydroperoxy radical 저해율이 높은 것으로 나타났으며, 이때 S-2의 산화저해율은 S-1, L시험구보다 적은 농도에서 저해율이 높았다. S-2의 산화저해율은 49,52, 62.44 및 97.5%로 나타나 첨가농도가 증가함에 따라 linoleic acid 산화저해율은 높았다. 2. Ox-brain autoxidant : 자동산화에의한 항산화활성을 조사한 결과, 투석내액의 갈변물질보다 투석외액의 갈변물질 쪽에서 자동산화에 의한 항산화활성이 높은 것으로 나타났다. 특히S-2의 항산화 활성은 22.5, 31.7, 31.9 및 33.5%로 나타났다. 3. Fe$^{2+}$ ADP/NAD 및 cumene hydroperoxide : 횐쥐 간의 microsome 분획을 분리하여 수용성 갈변물질의 ADP/NABP 및 cumene hydroperoxide 항산화 활성을 조사한 결과, 모든 시험구에서 반응 초기에 항산화 활성이 있으나, 반응 시간이 길수록 항산화 활성은 감소하였다. 그 활성의 순서는 S-2>S-1>L순으로 나타났으나 항산화 활성의 강도는 전체적으로 약하게 나타났다.
Toll-like receptors (TLRs), which recognize structurally conserved components among pathogens, are mainly expressed by antigen-presenting cells such as dendritic cells (DCs), B cells, and macrophages. Recognition through TLRs triggers innate immune responses and influences antigen-specific adaptive immune responses. Although studies on the expression and functions of TLRs in antigen-presenting cells have been extensively reported, studies in lymphoid tissue inducer (LTi) cells have been limited. In this study, we observed that LTi cells expressed TLR2 and TLR4 mRNA as well as TLR2 protein and upregulated OX40L, CD30L, and TRANCE expression after stimulation with the TLR2 ligand zymosan or TLR4 ligand LPS. The expression of tumor necrosis factor superfamily (TNFSF) members was significantly upregulated when cells were cocultured with DCs, suggesting that upregulated TNFSF expression may contribute to antigen-specific adaptive immune responses.
Lymphoid tissue inducer (LTi) cells have been characterized in mouse as a key cell when secondary lymphoid tissues are organized during development and memory T cells are formed after birth. In addition to their involvement in adaptive immune responses, recent studies show that they contribute to innate immune responses by producing large amount of interleukin (IL)-22 against microbial attack. Here, we compare IL-22-producing LTi and LTi-like cells in human and mouse and discuss their heterogeneity in different tissues.
Nb/Al Superconducting Tunnel Junction(STJ) 소자를 제작하여 I-V 특성곡선을 측정하고 제작된 STJ 소자의 초전도체 특성 및 성능 파라미터 값들을 구하였다. 크기가 각각 20, 40, 60, 그리고 $80{\mu}m$인 4종류의 STJ소자를 제작하였으며 각 소자는 총 5층의 Nb/A1/AlOx/Al/Nb 다결정(polycrystalline) 박막으로 구성된 SIS(Superconductor Insulate. Superconductor) 방식의 조셉슨 접합 구조를 갖는다. 이 연구에서 제작한 STJ 소자는 $Tanner^{TM}$ L-Edit 8.3 프로그램으로 설계하였으며 한국표준과학연구원의 SQUID 제조실험실에서 제작하였다. 5층의 STJ 박막은 DC magnetron sputtering, reactive ion etching, CVD(Chemical Vapor Deposition) 장비를 이용해 생성되었다. 제작된 STJ 소자는 액체헬륨으로 냉각(4K)시킨 후 I-V 특성곡선을 측정하여 초전도 특성을 확인하였고, STJ 소자의 성능을 결정하는 파라미터인 energy gap, normal resistance, normal resistivity, dynamic resistance, dynamic resistivity, 그리고 quality factor를 계산하였다. Nb/Al STJ 소자의 FWHM 에너지 분해능 계산 결과, 순수 Nb STJ 소자보다 $11\%$ 우수한 에너지 분해능 특성을 확인하였다.
In this study, we compared the immune cell populations in rheumatoid arthritis (RA) synovial fluid, which shows lymphoid tissue-like structure, with those in tonsils, which are normal secondary lymphoid tissues. Firstly, we found that $CD4^-CD11b^+$ macrophages were the major population in RA synovial fluid and that B cells were the major population in tonsils. In addition, synovial fluid from patients with osteoarthritis, which is a degenerative joint disease, contained $CD4^+CD11b^+$monocytes as the major immune cell population. Secondly, we categorized three groups based on the proportion of macrophages found in RA synovial fluid: (1) the macrophage-high group, which contained more than 80% macrophages; (2) the macrophage-intermediate group, which contained between 40% and 80% macrophages; and (3) the macrophage-low group, which contained less than 40% macrophages. In the macrophage-low group, more lymphoid tissue inducer (LTi)-like cells were detected, and the expression of OX40L and TRANCE in these cells was higher than that in the other groups. In addition, in this group, the suppressive function of regulatory T cells was downregulated. Finally, CXCL13 expression was higher in RA synovial fluid than in tonsils, but CCL21 expression was comparable in synovial fluid from all groups and in tonsils. These data demonstrate that increased lymphocyte infiltration in RA synovial fluid is correlated with an increase in LTi-like cells and the elevation of the chemokine expression.
수산물 가공공장에서 대량으로 폐기되고 있는 어피를 유용하게 산업적으로 이용하기 위하여 어피로부터 젤라틴 제조를 위한 추출조건에 대하여 검토하였다. 아울러 최적 조건하에서 제조한 여피젤라틴의 물리적 특성, 분자량 및 아미노산 조성 등을 시판 젤라틴의 그것들과 비교 검토하였다. 어피젤라틴의 추출조건은 침지용액인 수산화칼슘농도 1.0~1.5%(w/v), 첨가수량 6~7배, 온도 $40{\sim}50^{\circ}C$ 및 추출시간 5시간이었으며, 이 조건하에서 명태피로부터 추출된 젤라틴의 수율이 대구피 및 각시가자미피로부터 추출한 젤라틴의 수율보다 높았다. 어피젤라틴의 중금속 함량은 시판 젤라틴의 중금속 함량보다 적었으며, 어피젤라틴의 물성면에서 젤리강도, 전기전도도는 시판 젤라틴보다 낮았지만, 점도 및 등전점은 시판 젤라틴보다 높았다. 어피젤라틴의 아미노산 조성 중 glutamic acid, serine, threonine, methione 및 cysteine의 함량은 돈피 및 우피의 아미노산 함량에 비해 높았지만, proline 및 hydroxyproline의 함량은 낮았고, 그외의 아미노산 함량은 거의 비슷하였다.
이상의 실험결과들을 요약하면, CFA를 안면영역 피하로 주입하여 발생한 염증성 통증 행위반응은 P2X 수용체의 억제제의 투여로 감소할 수 있었다. 특히 $P2X_7$ 수용체 억제제를 투여하면 진통작용 뿐 아니라 활성화된 신경아교세포 발현을 억제하였다. 이러한 실험 결과는 $P2X_7$ 수용체가 신경아교세포에 영향을 미쳐 안면에서 발생하는 만성 염증성 통증의 발생과 유지에 관여하고 있다는 것을 보여준다. 따라서 중추신경계의 신경아교세포를 조절할 수 있는 중추성 $P2X_7$ 수용체 작용기전은 임상에서 만성 염증성 통증을 보다 효과적으로 치료할 수 있는 새로운 방법을 제시해 줄 수 있다고 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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