A peroxynitrite is formed when superoxide and nitric oxide exist at near eqimolar ratio in biological systems. Although not a free radical by chemical nature, peroxynitrite is a powerful oxidant having a wide array of tissue damaging effects ranging from lipid oxidation and inactivation of enzymes and ion channels through protein oxidation and nitration to inhibition of mitochondrial respiration. During our search for new antioxidizing components from natural resources, twenty salt marsh plants were screened for their ONOO and DPPH radical scavenging activities. Among them, methanol extract of Rosa rugosa, lxeris tamagawaensis, Erigeron annus, Tetragonia tetragonoides, Imperata cylindrica, and Suaeda japonica inhibited more than 85% of peroxynitrite produced by 3-morpholinsydnonimine (SIN-1) at a concentration of 5 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$. In addition, Rosa rugosa, Artemisia capillaris, Erigeron annus and Ixeris tamagawaensis showed significant scavenging effect against DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical).
To discover the sources with antioxidative activity in traditional medicines, 100 extracts of Korean medicinal plants were screened for their scavenging effect on peroxynitrite $(ONOO^{-})$ and total reactive oxygen species (ROS). The potency of total ROS scavenging activity was shown in the extracts of 25 plants, and 4 of their species, Macleaya cordata R. Br., Salvia plebeia R. Br., Cassia tora L. and Angelica gigas Nakai, had a greater effect with $IC_{50}$ values of $1.7{\pm}0.36$, $4.3{\pm}1.08$, $4.9{\pm}0.17$ and $5.8{\pm}1.01\;{\mu}g/ml$, respectively, than that of trolox, positive control $(7.61{\pm}0.12\;{\mu}g/ml)$. Another 35 extracts exhibited inhibitory effect of below 50 percent at $100\;{\mu}g/ml$ of sample concentrations on total ROS, while the rest observed total ROS generators rather than scavengers. The peroxynitrite scavenging activities were observed in the greater part of the plants tested. Five of them, Schisandra chinensis Baill, Campsis grandiflora (Thunb.) K. Schum., Cedrela sinensis A. Juss., Pleuropterus multiflorus Turcz. and Veronica linariaefolia Pall represented scavenging activities on peroxynitrite twice as strong with $IC_{50}$ Values of $0.48{\pm}0.10$, $0.59{\pm}0.15$, $0.60{\pm}0.10$, $0.64{\pm}0.10$ and $0.91{\pm}0.23\;{\mu}g/ml$, respectively, as that of penicillamine $(1.72{\pm}0.05\;{\mu}g/ml)$, positive control. Consequently, 25 species of the entire plants tested, exhibited scavenging activities on total ROS and $ONOO^{-}$, Salvia plebeia R. Br., Macleaya cordata R. Br., Cassia tora L. and Angelica gigas Nakai exerted potent scavenging activities on both radicals.
Reactive oxygen species (ROS) and nitrogen species (RNS) are both important signaling molecules involved in pain transmission in the dorsal horn of the spinal cord. Xanthine oxidase (XO) is a well-known enzyme for the generation of superoxide anions ($O_2^{\bullet-}$), while S-nitroso-N-acetyl-DL-penicillamine (SNAP) is a representative nitric oxide (NO) donor. In this study, we used patch clamp recording in spinal slices of rats to investigate the effects of $O_2^{\bullet-}$ and NO on the excitability of substantia gelatinosa (SG) neurons. We also used confocal scanning laser microscopy to measure XO- and SNAP-induced ROS and RNS production in live slices. We observed that the ROS level increased during the perfusion of xanthine and xanthine oxidase (X/XO) compound and SNAP after the loading of 2',7'-dichlorofluorescin diacetate ($H_2DCF-DA$), which is an indicator of intracellular ROS and RNS. Application of ROS donors such as X/XO, ${\beta}-nicotinamide$ adenine dinucleotide phosphate (NADPH), and 3-morpholinosydnomimine (SIN-1) induced a membrane depolarization and inward currents. SNAP, an RNS donor, also induced membrane depolarization and inward currents. X/XO-induced inward currents were significantly decreased by pretreatment with phenyl N-tert-butylnitrone (PBN; nonspecific ROS and RNS scavenger) and manganese(III) tetrakis(4-benzoic acid) porphyrin (MnTBAP; superoxide dismutase mimetics). Nitro-L-arginine methyl ester (NAME; NO scavenger) also slightly decreased X/XO-induced inward currents, suggesting that X/XO-induced responses can be involved in the generation of peroxynitrite ($ONOO^-$). Our data suggest that elevated ROS, especially $O_2^{\bullet-}$, NO and $ONOO^-$, in the spinal cord can increase the excitability of the SG neurons related to pain transmission.
Objectives This study was designed to evaluate the anti-inflammatory effects of Seungseup-tang (SST) on the monosodium iodoacetate (MIA)-induced osteoarthritis rats. Methods Osteoarthritis was induced by injection of MIA ($50{\mu}l$ with 80 mg/ml) into knee joint cavity of rats. Rats were divided into 4 groups (normal group, control group, indomethacin treated group, SST treated group, each n=6). Normal group was not injected with MIA and taken normal diet. Control group was injected with MIA and taken with distilled water. Indomethacin treated group was injected with MIA and taken indomethacin 5 mg/kg by oral administration. SST treated group was injected with MIA and taken SST 200 mg/kg by oral administration. We examined the weight-bearing ability of hind paw, biomarkers related to oxidative stress in serum, inflammatory proteins and inflammatory mediators and cytokines. Moreover, histopathological examination of knee joint structure was also performed by Hematoxylin & Eosin (H&E), Safranin-O staining method. Results In the present study, SST treated group showed a similar inhibitory effects alike indomethacin treated group, in most of the studied parameters of inflammation. The increased oxidative stress biomarker such as reactive oxygen species (ROS) and peroxy nitrite ($ONOO^-$) in the serum were reduced with SST. Especially, the level of $ONOO^-$ compared with control group significantly suppressed. Also, the expression of inflammatory mediators and cytokines induced by nuclear factor-kappa B (NF-${\kappa}B$) activation was modulated through inhibition of IkBa phosphorlation. In addition, histological analysis revealed that cartilage damage by MIA repaired markedly in SST treated group. Conclusions According to the results, Seungseup-tang may be effective for preventing the progression of osteoarthritis.
Seo, Kyoung-Chun;Noh, Jeong-Sook;Yi, Na-Ri;Choi, Ji-Myung;Cho, Eun-Ju;Han, Ji-Sook;Song, Yeong-Ok
Preventive Nutrition and Food Science
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v.13
no.2
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pp.77-83
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2008
To further the goal of isolating Bacillus sp. from commercial chungkukjang (CKJ) for a development of a probiotic dietary adjunct using soymilk or milk, antioxidant activity of CKJ purchased from the Sunchang Traditional Village in Chunbook province was examined. Six CKJ samples were evaluated and 3 were selected based on the results of the physicochemical analysis and sensory evaluation for further antioxidant study. $IC_{50}$ for DPPH scavenging activity of methanol extracts of CKJ ranged from 238.1 to 345.7 ${\mu}g/mL$. CKJ exhibited over 80% scavenging of ${\cdot}OH$ and ONOO- at concentrations of 100 ${\mu}g/mL$ and 250 ${\mu}g/mL$, respectively. $O_2^-$ and NO scavenging activities of three CKJ were increased in a dose dependent manner with the concentration tested from 100 to 1000 ${\mu}g/mL$. In this study, the methanol extract of CKJ exhibited a great reduction capability and powerful free radical scavenging activity, especially against OH. and ONOO-, which are the most toxic radicals responsible for oxidative damage in the body. However, radical scavenging effects of CKJ on DPPH, $O_2^-$, and nitrite radical were rather moderate. In conclusion, CKJ may reduce the oxidative stress in the body by scavenging the free radicals.
Jung, Hyun Ah;Karki, Subash;Ehom, Na-Yeon;Yoon, Mi-Hee;Kim, Eon Ji;Choi, Jae Sue
Preventive Nutrition and Food Science
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v.19
no.4
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pp.281-290
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2014
The aim of the present study was to evaluate the anti-diabetic, anti-inflammatory, antioxidant potential, and total phenolic content (TPC) of green and red kohlrabi cultivars. Anti-diabetic and anti-inflammatory activities were evaluated via protein tyrosine phosphatase (PTP1B) and rat lens aldose reductase inhibitory assays and cell-based lipopolysaccharide (LPS)-induced nitric oxide (NO) inhibitory assays in RAW 264.7 murine macrophages. In addition, scavenging assays using 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical, 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt (ABTS) radical, and peroxynitrite ($ONOO^-$) were used to evaluate antioxidant potential and TPC was selected to assess phytochemical characteristics. Between the two kohlrabi cultivars, red kohlrabi (RK) had two times more TPC than green kohlrabi (GK) and showed significant antioxidant effects in DPPH, ABTS, and $ONOO^-$ scavenging assays. Likewise, methanol (MeOH) extracts of RK and GK inhibited LPS-induced NO production in a dose dependent manner that was further clarified by suppression of iNOS and COX-2 protein production. The MeOH extracts of RK and GK exhibited potent inhibitory activities against PTP1B with the corresponding $IC_{50}$ values of $207{\pm}3.48$ and $287{\pm}3.22{\mu}g/mL$, respectively. Interestingly, the RK MeOH extract exhibited significantly stronger anti-inflammatory, anti-diabetic, and antioxidant effects than that of GK MeOH extract. As a result, our study establishes that RK extract with a higher TPC might be useful as a potent anti-diabetic, antioxidant, and anti-inflammatory agent.
The quantitative structure-activity relationships (QSAR) study of antioxidative anthocyanidins and their glycosides were evaluated using 4 different assays of Trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC), superoxide radical ($O_2^{{\cdot}-}$), hydrogen peroxide ($H_2O_2$), and peroxynitrite radical ($ONOO^-$) scavenging with TSAR software. Four models were developed with significant predictive values ($r^2$ and p value), which indicated that the antioxidant activities were mainly governed by the 3-dimensional structural energy (torsional energy), constitutional properties (the number of hydroxyl and methyl groups), and electrostatic properties (heat of formation, and dipole, quadrupole, and octupole components). This QSAR approach could contribute to a better understanding of structural properties of anthocyanidins and their glycosides that are responsible for their antioxidant activities. It might also be useful in predicting the antioxidant activities of other anthocyanins.
This study was designed to evaluate the mechanism by which reactive nitrogen intermediates (RNI) induced the cytotoxicity of human doparminergic neuroblastoma SH-SY5Y cells. 3-Morpholino-sydnonimine (SIN-l), a donor of peroxynitrite (ONOO) and sodium nitroprusside (SNP), a donor of nitric oxide (NO) induced cell detachment and apoptotic death, as characterized by chromatin condensation, the ladder pattern fragmentation of genomic DNA and morphological nuclear changes. SIN-l also induced the activation of caspase 3-like protease in a time-dependent manner. Exogenous antioxidants, such as reduced glutathione (GSH), N-acetylcysteine (NAC), and selenium protected the cells from apoptotic death and reduced the activation of caspase 3-like protease by SIN-1. Furthermore, SIN-l directly reduced the intracellular levels of glutathione. Taken together, these data suggested that RNI including NO and peroxynitrite decrease the concentration of intracellular antioxidant such as GSH, which lead to the apoptotic death of human neuroblastoma SH-SY5Y cells.
Proceedings of the Korean Journal of Food and Nutrition Conference
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2000.05a
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pp.13-20
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2000
Melatonin, a chemical mediator produced in the mammalian pineal gland and several other organ, is a ubiquitously acting antioxidant. It has been shown to scavenge the hydroxyl radical (ㆍOH), singlet oxygen ($^1$O$_2$) and the peroxynitrite anion (ONOO-). In addition, melatonin reportedly stimulates a number of antioxidative enzymes including glutathione peroxidase, glutathione reductase and glucose-6-phosphate dehydrogenase. Antioxidative effect of melatonin in pharmacological and physiological level was investigated using hepatocarcinogen 2-nitropropane (2-NP) and pinealectornized (Px) rats, respectively. Lipid peroxidation (LPO) as indicated by malondialdehyde and 4-hydroxyalkenals and DNA damage as indicated by 8-hydroxydeoxyguanosine (8-OH-dG) induced by 2-NP were prevented by melatonin. The degree of LPO and DNA damage in Px rats were higher than those of intact old and young ones suggesting the removal of pineal gland resulted in higher accumulation of oxidative damage.
Among the aldehydes derived from lipid peroxidation, 4-hydroxynonenal (HNE) that can be produced from arachidonic acids. linoleic acids, or their hydroperoxides in relatively large amounts in response to oxidative insult. Therefore, HNE might be an important mediator of Oxidative stress-induced apoptosis. To study the hypothesis that HNE may induce apoptosis, we estimated cytotoxicity of HNE on YPEN-1 rat prostatic endothelial cells. (omitted)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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