A whole body extract (WBE), a crude nuclear fraction, of aphids was prepared and used to identify the proteins which bound specifically to 5'-upstream regions of the transcription initiation site of the aphid ribosomal RNA gene (rDNA). While DNA fragment (-263/-195) was bound by only one specific 53 kDa protein, two DNA fragments, A(-194/23) and B(-393/-264), were commonly bound by three proteins (52 kDa, 50 kDa and 40 kDa). It was also revealed that the formation of he DNA-protein complex requires a cation.
In this study, Prionospio depauperata Imajima, 1990 is newly reported in Korean fauna. Prionospio depauperata can be distinguished from other relatives by the four pairs of branchiae which are pinnate on chaetigers 2 and 5, and apinnate on chaetigers 3 and 4; caruncle extending to the end of chaetiger 2; and moderate dorsal crest present on chaetigers 7-13. The morphological diagnosis of P. depauperata are provided with the photographs of four Prionospio species. The mitochondrial cytochrome c oxidase subunit 1 (CO1), 16S ribosomal DNA (16S rDNA), and the nuclear 18S ribosomal DNA (18S rDNA) sequences of four Prionospio species from Korean waters, P. depauperata Imajima, 1990, P. japonica Okuda, 1935, P. krusadensis Fauvel, 1929, and P. membranacea Imajima, 1990, were determined for the first time. The inter-specific genetic distances among the congeners of four Prionospio species were 22.3-29.6% in CO1, 10.5-25.0% in 16S rDNA, and 0.3-3.6% in 18S rDNA.
The taxonomy of the umbelliferous species Angelica amurensis and its allies was reviewed on the basis of molecular phylogenies derived from sequences of nuclear ribosomal DNA internal transcribed spacer (ITS) regions. Strict consensus of six minimal length 119-step trees derived from equally weighted maximum parsimony analysis of combined nuclear rDNA ITS1 and ITS2 sequences from 29 accessions of Angelica and outgroups indicated that Angelica purpuraefolia, known to be endemic to Korea, is the same species as A. amurensis. Comparisons of sequence pairs across both spacer regions revealed identity or 1-2 bp differences between A. purpuraefolia and A. amurensis. These results indicated that the two taxa are not distinguished taxonomically. Also, nuclear rDNA ITS regions are discussed as potential barcoding loci for identifying Korean Angelica.
PMO-P4, being cultivated as "Sanghwang" in Korea, was proved to be P. baumii based on ITS (internal transcribed spacer) sequencing and RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) patterns along with some Phellinus species including P. linteus. The similaraty of ITS sequencing between PMO-P4 and other Phellinus species was given the range of 48.6%~72.2%, showing the highest homology from P. linteus and the lowest from P. gilvus.
We compared the DNA sequence difference of isolates of Clonorchis sinensis from one Korean (Kimhae) and two Chinese areas (Guangxi and Shenyang), The sequences of nuclear rDNA (18S, internal transcribed spacer 1 and 2: ITS1 and ITS2) and mitochondrial DNA (cytochrome c oxidase subunit 1: cox1) were compared. A very few intraspecific nucleotide substitution of the 18S, ITS1, ITS2 and cox1 was found among three isolates of C. sinensis and a few nucleotide insertion and deletion of ITS1 were detected. The 18S, ITS1, ITS2 and cox1 sequences were highly conserved among three isolates. These findings indicated that the Korean and two Chinese isolates are similar at the DNA sequence level.
We analyzed the nuclear-encoded large subunit ribosomal RNA gene (LSU rDNA) sequences of 19 dinoflagellates occurring in costal waters off Korea and reconstructed a phylogenetic tree containing 74 representative species from 37 distinct genera. Of these, the LSU rDNA sequences of Amylax triacantha (Jörgensen) Sournia, Gonyaulax verior Sournia (= Amylax diacantha Meunier), Gyrodinium fissum (Levander) Kofoid et Swezy, Katodinium glaucum (Lebour) Lebour III, Noctiluca scintillans (Macartney) Kofoid et Swezy, Oxyphysis oxytoxoides Kofoid, and Pyrophacus steinii (Schiller) Wall et Dale are reported for the first time. Our LSU rDNA tree consistently placed Oxyrrhis marina Dujardin and N. scintillans at the most primitive positions, giving rise to a strongly supported monophyletic group of typical dinoflagellate species belonging to the Dinophyceae. The phylogenetic relationships among the typical dinoflagellates, however, were not resolved in the higher taxonomic levels in general. Only genera at terminal branches were usually supported with high confidence. The Dinophysiales, represented by Dinophysis species and O. oxytoxoides, formed a strongly supported monophyletic assemblage. The Gymnodiniales and Peridiniales were recovered as polyphyletic groupings. Members of the Gonyaulacales were consistently grouped together, but lacked statistical support. Within this order, the Ceratiaceae and Goniodomataceae each formed a monophyletic group, but the Gonyaulacaceae was polyphyletic. The phylogenetic relationships of the Gonyaulacaceae were generally congruent with differences in the combinations of the apical pore complex, hypothecal organization and thecal formula.
Intraspecific genetic diversity of Korean isolates of Phytophthora drechsleri was investigated based on PCR-RFLP of rDNA along with closely related species in the genus; P. cryptogea, P. melonis, P. erythroseptica, P. cinnamomi, P. cambivora and P. cactorum. Gene regions of nuclear small subunit and internal transcribed spacer (ITS) in rDNA were amplified with polymerase chain reaction and digested with 9 restriction enzymes. Phytophthora species was readily differentiated from each other based on the digestion patterns, however, P. cryptogea was not separable from some isolates of P. drechsleri. Twenty one isolates of P. drechsleri originated from 15 host plants were divided into three distinct groups designated as PdG1, PdG2 and PdG3, respectively. Four isolates in PdG1 were originated from green vegetables and tomato and nine isolates in PdG2 were mainly isolated from medicinal plants. The two groups showed 95.3% homology and four isolates of P. cyptogea came under the groups. However, Eight isolates in PdG3 collected from cucurbits were clearly differentiated from those of PdG1 and PdG2 by 66.5% homology, but completely matched with a Taiwan isolate of P. melonis. Results indicated that three distinct groups exist in Korean isolates of P. drechleri and each group has host preference. In addition, reclassification of the cucurbits isolates are reserved because of their distinct genetic characters from other intraspecific groups in P. drechsleri.
Thistle is a perennial plant that is widely used for medicinal purposes. Information on the genetic diversity of thistle populations are great important for their conservation and germ plasmic utilization. Although thistle is an important medicinal plant species registered in South Korea, no molecular markers are currently available to distinguish them from other similar species from different countries. In this study, we developed single nucleotide polymorphism (SNP) markers derived from the nuclear ribosomal DNA internal transcribed spacer (ITS) regions of genomic sequences to identify distinct Korean-specific thistle species via an amplification refractory mutation system (ARMS)-PCR and high resolution melting (HRM) curve analyses. We performed molecular authentication of four different kinds of thistle species from different regions using DNA sequences in the ITS intergenic region. We also developed a quantitative PCR assay using species-specific ITS primers, which allowed us to estimate the ratio of Korean-specific thistle species using varying ratios of mixed genomic DNA templates from the two species. The SNP markers developed in this study are useful for rapidly identifying specific thistle species from different countries.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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