• 제목/요약/키워드: Nitrogen-methanol method

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A Modified Cryopreservation Method of Psychrophilic Chlorophyta Pyramimonas sp. from Antarctica

  • Hong, Sung-Soo;Lee, Soo-Young;Kim, Young-Nam;Kang, Sung-Ho;Kim, Hak-Jun
    • Ocean and Polar Research
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    • 제33권3호
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    • pp.303-308
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    • 2011
  • Polar psychrophiles which thrive under extreme conditions such as cold temperature, high salinity, and high dose ultraviolet light, emerge as novel targets for biotechnology. To prevent genetic drift and the possibility of contamination by subculturing, cryopreservation was employed for two psychrophilic microalgae, Porosira sp. (KOPRI AnM0008) and Pyramimonas sp. (KOPRI AnM0046), which have anti-freeze activities. Five cryoprotectants (dimethyl sulphoxide, ethylene glycol, glycerol, methanol and propylene glycol) showed toxicity at 20-30% (v/v). The optimal cryoprotectant concentration and equilibration time were less than 20% and 10 min, respectively. Cryopreservation was carried out in the presence of cryoprotectants either by direct freezing in liquid nitrogen ($LN_2$) or controlled freezing using a controlled rate freezer followed by storage in the $LN_2$ tank. As a result, Pyramimonas sp. (KOPRI AnM0046), a psychrophilic chlorophyta was revived. Cryopreserved Porosira sp. was not revived from either freezing protocols probably due to the silicic cell wall and its relatively large cell size. In the case of Pyramimonas sp. (KOPRI AnM0046), the controlled freezing method showed higher revival yield than the direct freezing method.

HPLC Determination of Tolperisone in Human Plasma

  • Bae Jung-Woo;Park Young-Seo;Sohn Uy-Dong;Myung Chang-Sun;Ryu Byung-Kwon;Jang Choon-Gon;Lee Seok-Yong
    • Archives of Pharmacal Research
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    • 제29권4호
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    • pp.339-342
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    • 2006
  • A simple high performance liquid chromatographic (HPLC) method was developed for the determination of tolperisone in human plasma. Tolperisone and internal standard (chlorphenesin) were isolated from 1 mL of plasma using 8 mL of dichlormethane. The organic phase was collected and evaporated under nitrogen gas. The residue was then reconstituted with 300 mL aliquot of mobile phase and a 100 mL aliquot was injected onto the $C_{18}$ reverse-phased column. The mobile phase, $45\%$ methanol containing $1\%$ glacial acetic acid and $0.05\%$ 1-hexanesulfonic acid was run at a flow rate of 1 mL/min. The column effluent was monitored using UV detector at 260 nm. The retention times for tolperisone and the internal standard were approximately 7.1 and 8.4 min, respectively. The standard curve was linear with minimal intra-day and inter-day variability. The quantification limit of tolperisone in human plasma was 10 ng/ mL. The proposed method has been applied to the determination of pharmacokinetic profile of tolperisone in Koreans. The T max of tolperisone in Koreans $(0.94{\pm}0.42\;h)$ was not significantly differ from that reported in Europeans (0.5-1 h), but the mean half-life in Koreans $(1.14{\pm}0.27\;h)$ was shorter than that in Europeans $(2.56{\pm}0.2\;h)$. The proposed HPLC method is simple, accurate, reproducible and suitable for pharmacokinetic study of tolperisone.

참가사리 분획물의 항산화.항균효과 (The Antioxidative and Antimicrobial Effects of Gloiopeltis Tenax)

  • 정영화;정복미;강대연;구미정;신미옥;배송자
    • Journal of Nutrition and Health
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    • 제39권4호
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    • pp.366-371
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    • 2006
  • 참가사리의 항산화효과를 측정하기 위해 ROS와 RNS 제거활성을 측정하였다. ROS 제거활성 측정결과 GTMM층과 GTMB층이 positive control로 사용한 trolox와 유사한 높은 제거능을 보였고, $ONOO^-$ 제거능은 그 효과가 미약하였으나 GTMM 층에서 나타났으며 NO 제거활성 역서 GTMM층과 GTMB층에서 약한 효과가 관찰되었다. 따라서 본 실험의 결과 GTMM 층에서 ROS 제거 활성의 효과가 높았으며 다음으로 GTMB층에서 효과를 보여 GTMM층과 GTMB층에 활성산소 제거효과를 가지는 물질이 있는 것으로 사료되어진다. Paper disc method를 이용한 항균활성 효과 실험결과, Serratia marcescens가 모든 층에서 높은 항균력을 보였으며 Proteus mirabilis에서도 GTMA층을 제외한 모든 층에서 항균효과를 보였다. 사용한 모든 균주에서 각각 항균력의 차이는 있으나 전체적으로 GTMB 층과 GTMM 층에서 높은 항균활성을 관찰할 수 있었다. 이 연구결과를 토대로 참가사리의 항산화 및 항균활성물질에 대한 단계적인 분리 동정이 이루어져 GTMM 층과 GTMB 층의 생리활성물질 개발이 기대되는 바이다.

국내 시판 블루베리와 라즈베리의 영양성분 분석 및 항산화 활성 (Analysis of Nutritional Compositions and Antioxidative Activities of Korean Commercial Blueberry and Raspberry)

  • 정창호;최성길;허호진
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제37권11호
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    • pp.1375-1381
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    • 2008
  • 국내 시판되는 블루베리와 라즈베리의 영양성분 및 항산화 활성에 대하여 조사하였다. 블루베리와 라즈베리 각각의 일반성분은 수분 10.47%와 22.67%, 조단백질 2.66%와 2.64%, 조지방 2.04%와 1.67%, 가용성물질소물 81.36%와 70.19%, 조섬유 1.48%와 0.85% 및 회분 1.99%와 1.98%였다. 총페놀화합물 함량은 라즈베리(5.340 mg/g)보다 블루베리(9.028 mg/g)가 높게 나타났다. 블루베리와 라즈베리의 주요 무기성분은 Ca(451.34 and 97.48 mg/100 g), K(355.40 and 215.20 mg/100 g), P(321.10 and 294.04 mg/100 g) 및 Na(137.58 and 137.67 mg/100 g)이었다. 블루베리와 라즈베리의 총아미노산 함량은 각각 2,011.44 mg/100 g과 2,098.82 mg/100 g이었으며, 주요 아미노산으로는 glutamic acid, aspartic acid 및 leucine이었다. 블루베리와 라즈베리 80% 메탄올 추출물의 DPPH 및 ABTS radical 소거활성을 측정한 결과 농도 5 mg/mL에서 각각 88.67%와 62.77%, 76.34%와 30.53%의 소거활성을 보였다. 블루베리와 라즈베리 80% 메탄올 추출물의 환원력을 이용한 항산화 활성은 농도의존적인 경향을 보였으며, $\beta$-carotene-linoleate와 FTC method를 이용한 항산화활성은 블루베리가 라즈베리보다 2배 높은 활성을 보였다.

아민 처리가 탄소나노튜브의 이산화탄소 흡착거동에 미치는 영향 (Influence of Amine Surface Treatment on Carbon Dioxide Adsorption Behaviors of Activated Carbon Nanotubes)

  • 장동일;조기숙;박수진
    • 공업화학
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    • 제20권6호
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    • pp.658-662
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    • 2009
  • 본 연구에서는 탄소나노튜브를 KOH를 이용하여 활성화 한 후 이를 아민으로 표면처리한 탄소나노튜브의 이산화탄소 흡착거동에 관하여 고찰하였다. 아민 처리한 탄소나노튜브의 물리화학적 특성은 X-ray photoelectron spectroscopy (XPS), $N_2$ adsorption isotherm, thermogravimetric analysis (TGA), 그리고 temperature programmed desorption (TPD)을 이용하여 분석하였다. 실험 결과, 활성화된 탄소나노튜브 표면의 아미노 관능기는 산성가스인 이산화탄소를 선택적으로 흡착하기 위한 염기성 자리로서 작용하였다. 상온에서의 이산화탄소 흡착량은 미처리된 탄소나노튜브가 가장 크게 나타났으나 온도가 증가할수록 급격한 감소를 나타내었으며 PEHA 처리한 경우 완만한 흡착거동을 보였다. 이는 탄소표면의 아미노 관능기와 이산화탄소 사이의 상호작용 때문이라 판단된다.

적색육어류의 고도불포화지질의 이용에 관한 연구 2. 정어리유의 고도불포화지질의 농축${\cdot}$정제 및 저장 안정성 (Utilization of Polyunsaturated Lipids in Red Muscled Fishes 2. Concentration, Refining, and Storage Stability of Polyunsaturated Lipids of Sardine Oil)

  • 이강호;이병호;정인학;서재수;최병대;송승호
    • 한국수산과학회지
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    • 제19권5호
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    • pp.436-445
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    • 1986
  • As the second part of the studies on the utilization of polyunsaturated lipids in sardine oil as nutritional or medical supplement, the conditions of lipid extration and concentration, refining, and storage stability of EPA-condensed sardine oil were investigated. In extraction of lipids, solvent ratios of chloroform-methanol mixture(2:1 v/v) affected the final content of unsaturated lipid in extracted oil and recovery. Stepwise solvent fractionation method at various low temperatures was effective to concentrate polyenoic acids like EPA and DHA when acetone or acetone-methanol mixture, added in the ratio of 1:5 (v/v) was applied step by step to different temperatures at 0 to $-35^{\circ}C$. Addition of 1 to $5\%$ (v/v) of water to acetone was also benefit to raise EPA content but that resulted in reducing the yield of condensed oil from $65\%\;to\;28\%$. Concentration rate of polyenoic acids by solvent fractionation in lipid-actone solution (1:5, v/v) at 0 to $-30^{\circ}C$ seemed limited to $5{\sim}8\%$ in fatty acid composition depending on the initial content of those polyenoic acids in the sardine oil. During the extraction, concentration, and alkaline treatment, oxidation was rapidly induced but oxidation products could be thoroughly removed on the process of deceleration and peroxide elimination. To stabilize the reactive polyenoic acid condensed oil during the storage, stuffing nitrogen gas was essential to expel dissolved oxygen in oil or to seal the oil from open air, and the addition of antioxidative agents as BHA and tocopherols were greatly helpful to extend the storage life.

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고성능액체크로마토그라피를 이용한 혈장 내 코엔자임 큐텐 분석 (Analysis of coenzyme Q10 in human plasma by high performance liquid chromatography)

  • 박용선;박상범;송선미;김용우;이경률
    • 분석과학
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    • 제22권6호
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    • pp.514-518
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    • 2009
  • 코엔자임 큐텐은 비타민과 유사한 물질로 체내 중 미토콘드리아에 주로 분포 되어 있으며 항산화 작용을 나타낸다고 알려져 있다. 본 연구는 27-44세의 건강한 성인 남 녀 24명을 대상으로 하였고 혈장내 코엔자임 큐텐의 농도를 정량 평가하기 위하여 UV 검출기가 장착된 고성능액체 크로마토그라피를 사용 하였다. 혈장 내 코엔자임 큐텐을 분리하기 위해서 메탄올로 지방단백질을 제거하였고 노말헥산을 이용하여 액체-액체 추출법으로 코엔자임 큐텐을 용해 시켰다. 그 후 원심분리를 실시하여 노말헥산과 제단백된 물질을 층분리 시키고 상층액을 다른 유리 시험관에 옮겨 담았다. 옮겨진 노말헥산 층은 질소 가스를 이용하여 증발 농축을 시켰으며 남은 잔사에 순수한 에탄올로 재용해 시켜 검사 장비 내로 주입 하였다. 이 때 사용된 컬럼은 C18 역상 컬럼이었고 275 nm의 파장이 이용되었으며 메탄올과 에탄올을 85:15로 섞은 이동상을 1.7 mL/min의 유속으로 흘렸다. 본 검사 방법의 정량한계(limit of quantitation : LOQ, N/S=10)는 0.02 mg/L로 평가 되었고 0.1-2.0 mg/L의 농도 범위에서 검량선을 작성 하였다. 대상군 24명의 혈장 중 코엔자임 큐텐의 농도는 0.41-0.98 mg/L의 범위에서 분포 하고 있었으며 평균 농도는 $0.62{\pm}0.13mg/L$ 였다. 본 연구의 결과 본 검사 방법은 특수성을 가지고 있었으며 혈장 내 $CoQ_{10}$을 분석하는데 충분한 정량한계를 가지고 있었기에 임상에 적용이 가능하고 연구 기관에서 사용하기에 적합하다고 사료 된다.

TMS-TFA 유도체화를 이용한 소변여지 중 유기산과 아미노산의 GC/MS 동시분석 (Simultaneous GC/MS Analyses of Organic acids and Amino acids in Urine using TMS-TFA derivative)

  • 윤혜란
    • 분석과학
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    • 제19권1호
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    • pp.107-114
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    • 2006
  • 본 연구에서는 trimethylsilyl (TMS) 및 trifluoroacetyl (TFA)유도체화를 이용하여 소변여지에서 대사이상 질환을 신속하게 스크리닝하는 GC/MS 분석법을 개발하였다. 유기산과 아미노산을 동시에 유도체화하기 위해 메틸오렌지를 지시약으로 하여 $60^{\circ}C-70^{\circ}C$에서 15-20 분간 카르복실기는 TMS로 아미노기는 TFA로 유도체한 후 GC/MS-SIM으로 분석하였다. 유기산과 아미노산의 직선성의 범위는 0.001-50 mg이었고, 소변에서의 검출한계는 10-200 ng, 정량한계는 80-900 ng 이었다. 직선성을 보이는 범위에서의 상관계수(R2)는 0.994-0.998이었고, 회수율은 methylcitric acid와 glycine을 제외하고 80-100%를 보였다. 이 방법은 기존의 유기산분석에는 GC/MS를 아미노산 분석에는 아미노산분석기를 사용하는 것과 비교할 때 GC/MS만 사용하여 동시에 유기산과 아미노산을 분석함으로써 전처리가 간단하고 짧은 분석시간과 우수한 감도, 정확도, 정밀도를 보여 주었다. 정상인과 대사이상질환 환자의 검체에 적용해 보았을 때, 본 분석방법은 유기산과 아미노산대사이상의 유전성대사질환 환자의 스크리닝, 진단 및 모니터링에 임상적으로 유용함을 보여주었다.

인체혈장 중 에탐부톨의 HPLC 분석법의 검증 및 단일용량 투여에 의한 약물동태 연구 (Determination of Ethambutol n Human Plasma by a Validated HPLC Method and Its Application to Single-dose Pharmacokinetics)

  • 곽혜선;박경호;최준식;송진아;성민경;장정옥;이화정
    • Journal of Pharmaceutical Investigation
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    • 제35권2호
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    • pp.123-127
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    • 2005
  • An HPLC method was employed for the determination of ethambutol in human plasma. After addition of internal standard (IS, octylamine, $2\;{\mu}g/mL$) and alkalinization of the plasma with 5 M sodium hydroxide, the drug and IS were extracted into the mixture of chloroform and diethyl ether (40:60, v/v). Following a 15-min vortex-mixing and a 10min centrifugation, the organic phase was spiked with $100{\mu}L$ of phenylethylisocyanate $(2000{\mu}g/mL)$ for chemical derivatization, mixed for 5 min and evaporated to dryness under a stream of nitrogen. The residue was reconstituted with $100{\mu}L$ of mobile phase and $20{\mu}L$ was injected into C18 column with a mobile phase consisting of methanol:water (70:30, v/v). The samples were detected utilizing an ultraviolet detector at 200 nm. The method was specific and validated with a limit of $0.15\;{\mu}g/mL$. Intra- and inter-day precision and accuracy were acceptable for all quality control samples including the lower limit of quantification. The applicability of this method was demonstrated by analysis of human plasma after oral administration of a single 1200-mg dose to 20 healthy subjects. From the plasma ethambutol concentration vs. time curves, the mean AUC was $9.61{\pm}1.64\;{\mu}g{\cdot}hr/mL$ and Cmax of $2.68\;{\mu}g/mL$ reached 2.73 hr after administration. The mean biological half-life of ethambutol was $3.46{\pm}1.21$ hr. Based on the results, this simple and validated assay could readily be used in any pharmacokinetic studies using humans.

미이용해조류의 이용화에 관한 연구 I. 미이용해조류의 성분조성과 조류단백질의 추출 (UTILIZATION OF UNEXPLOITED ALGAE FOR FOOD OR OTHER INDUSTRIAL USES 1. CHEMICAL COMPOSITION OF UNEXPLOITED ALGAE AND EXTRACTION OF ALGAL PROTEIN)

  • 박영호;변재형;오후규;강영중
    • 한국수산과학회지
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    • 제9권3호
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    • pp.155-162
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    • 1976
  • 미이용해조류를 주로 한 33종류 41개시료(홍조류 15종 19개시료, 갈조류 14종 18개시료, 녹조류 3종 3개 시료, 해산현화직물 1종 1개시료)의 조단백질, 조지방, 조섬유, 조회분, 가용성무질소물, 아미노태질소 및 총 아미노산의 조성을 조사하였고, 이 중 조단백질 함량이 높은 지충이, 지누아리 및 조단백질함량이 낮은 거머리말, 알쏭이모자반의 4종류를 시료로 하여 조류단백질의 추출율과 추출액중의 단백질의 침전조건에 대하여 조사 검토하였다. 1. 일반적으로 홍조류에는 조단백질함량이 높고 조지방함량이 낮은 것이 많은데 비하여 갈조류 및 녹조류에는 조단백질함량이 낮고 조지방함량이 높은 것이 많은 경향을 보였다. 2. 조단백질함량과 총아미노산량으로 보아 단백질자원으로서 유용한 조류로는 지충이, 부채꼴아크로소리움, 꿩꼬리, 오카무라서실, 검은서실, 지누아리, 진두발, 불등가사리, 돌가사리, 디크티오타, 고리매 등을 들 수 있고, 반대로 큰디크티오타, 코르다리아, 비틀 대모자반, 알쏭이모자반, 외톨개모자반, 도박, 털도박, 미끌도박, 남작파래, 구명갈파래, 거머리말 등은 그 함량이 극히 낮았다. 5. 분말시료를 물로 추출할 때 8시간 동안에 조체의 총조단백류외 $30\~40\%$ 추출되었으며, 조체단백질함량의 다과에 따른 추출율의 차는 별로 없었다. 또한 조류단백질의 추출속도는 4시간 동안에 총추출단백질의 3이상이 추출되었다. 4. 추출액중의 단백질침전법으로서는 methanol 처리법이 가장 효과적이었고, 다음이 가열처리법, TCA 처리법의 순이였으며, pH 조절법이 가장 못하였다. pH 조절법에 있어서는 pH5 부근으로 조절하는 것이 효과저인 경향을 보였다. 5. 추출액중의 단백질의 침전율은 알쏭이모자반의 것이 가장 좋았고 다음이 지누아리. 거머리말의 순이였으며 지충이의 것이 가장 못하였다.

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