시판중인 렌즈 보존액 중 가장 흔히 사용 또는 유통되고 있는 $SOLOCARE^{TM}$에 대한 안점막자극성시험을 식품의약품 안전청 고시에 따라 Draize법을 이용하여 그 자극성의 정도를 평가하고, 눈에 가해질 수 있는 잠재적인 독성을 평가하기 위하여, 배출물에 대한 도말표본 상에서 염증세포 및 비 염증성 유상피세포가 차지하는 비율과 함께 점안 후 안구 중, 각막, 홍채, 망막 및 공막의 조직병리학적 관찰을 실시한 결과 다음과 같은 결과를 얻었다. 비 세척군에서는 점안 후1, 2 및 3일에 국한하여, 각막과 결막에 경미한 자극이 관찰되어, 이 기간 동안의 평균 안점막 자극지수(Mean Index of Ocular Irritation; MIOI)가 각각 4.33, 3.33 및 2.00으로 관찰되었으며, 세척군에서는 점안 후 1 및 2일에 국한하여, 결막에서 경미한 자극성이 인정되었고, 이때 MIOI는 각각 3.00과1.33으로 관찰되었다. 따라서 $SOLOCARE^{TM}$는 세척군 및 비세척군 모두에서 MIOI가 모든 관찰기간에서 5.00 이하로 관찰되었으며, 관찰기간 중 MIOI의 최대값인 IAOI(The Index of Acute Ocular Irritation) 역시점안 1일후 4.33로 관찰되어 무자극성 물질로 관찰되었다. 한편 배출물에 대한 염증성 세포의 비율은 무처치 대조군과 비교하여 점안초기 유의성은 인정되지 않았으나, 다소 증가된 경향을 나타낸 이외 의미있는 변화는 인정되지 않았다. 또한 안구의 조직병리학적 검사에서 각막, 홍채, 망막 및 공막 모두에서 무처치 대조군과 비교하여 의미 있는 변화는 인정되지 않았다.
It has been demonstrated that majority of cells in the mammalian body such as myocytes and epithelial cells of skin and intestine respond to mechanical force or environmental factors and exhibit partial disruption of cell membrane, i. e., cell wounding, even in a physiological condition. Myocardial cells are rather apt to be wounded than other cells since they are definitely exposed to mechanical stress by contraction-relaxation and blood flow. However, the mechanism how myocardial cells protect themselves against cell wounding is not yet clarified. On this background, the present study was performed to elucidate whether albumin leakage is related to cell wounding and to assess whether diltiazem, a potent calcium channel blocker, is beneficial in isoproterenol-induced cell wounding in the heart. Hearts isolated from New Zealand White rabbits ($1.5\sim2.0kg$ body weight, n=20) were perfused with Tyrode solution by Langendorff technique. After stabilization of baseline hemodynamics, the hearts were subjected to bolus administration of isoproterenol and diltiazem as following order: $1.6{\mu}M$ isoproterenol at zero min (the beginning point): $16{\mu}M$ diltiazem at 20min; $1.6{\mu}M$ isoproterenol at 25min; $16{\mu}M$ isoproterenol at 45 min; $160{\mu}M$ diltiazem at 65 min; $16{\mu}M$ isoproterenol at 70 min. During all experiments, the left ventricular function was recorded, albumin leakage in the coronary effluents was analyzed by electrophoresis and Western blot, and myocardial cell membranes were examined by conventional transmission electron microscopy. Data were analyzed by t-test and linear regression test. Isoproterenol significantly increased the inotropic and chronotropic contractions, coronary flow, and frequency of arrhythmia, however, diltiazem did not influence on hemodynamics except decrease in the frequency of arrhythmia and a slight decrease in contractility. Isoproterenol also resulted partial disruption of myocardial cell membrane and inclose in albumin leakage, while diltiazem pretreatment showed number of electron-dense plaques in the cell membrane and a tendency of decrease in albumin leakage. These results indicate that albumin leakage may be an indirect index of cell wounding in the heart and diltiazem nay be beneficial to protect myocardial cells against isoproterenol-induced cell wounding. It is likely that diltiazem promotes resealing process of the cell membrane.
The quantitatively measured local myocardial perfusion rates with microspheres are used as an objective indicator of even distribution of cardioplegic solution, and the efficacy of the retrograde right atrial route of cardioplegia is evaluated in hearts with various levels of coronary arterial obstruction. After initial antegrade cardioplegia under the median sternotomy and aortic cannulation, 60 hearts from anesthetized New Zealand white rabbits are divided in random order as normal group [ligated left main coronary artery ; MA, MR] and diagonal group [ligated proximal diagonal artery ; LA, LR]. Half of each group [N=10] are perfused with antegrade cardioplegia[A] under the pressure of 100 cmH2O and the other half with retrograde right atrial route[R] under the pressure of 60 cmH2O[St. Thomas cardioplegic solution mixed with measured amount of microspheres]. The myocardium is subdivided into segments as A[atria], RV[right ventricle]. S[septum], LV[normally perfused left ventricular free wall], ROI[ischemic myocardium of left ventricular free wall]. LV and RQI are further divided into N[subendocardium] and P[subepicardium]. The resulting local myocardial perfusion rates and N /P of each group are compared with Wilcoxon rank sum test. The weight of the hearts is 5.94$\pm$0.66g, and there are no statistically significant dif-ferences[p>0.05, ANOVA] between six compared group. The mean flow rate[F: ml /g / min] of MR group is comparable with MA group[p>0.05], but in N and L group, there are significantly depressed F with right atrial route of cardioplegia, which means elevated perfusion resistance with this route. In spite of no significant differences in delivered doses of microsphere[DEL] between compared groups[p>0.05, ANOVA], there are significantly depressed REC and NF in hearts with right atrial cardioplegia which suggests increased requirement of cardioplegic solution with this route. The interventricular septum shows poor perfusion with right atrial route of cardioplegia without obstruction of supplying coronary arteries. But, with obstruction of coronary artery supplying septum as in M group, the flow rate is superior with right atrial route of infusion. The left ventricular free wall perfusion rates of every RQI with R route are superior to that of A route[p<0.05]. But, in LV segments, there are unfavorable effects of right atrial cardioplegia in L group, although the subendocardial perfusion is well maintained in N group. The LV free wall of left main group shows depressed perfusion rates with antegrade route as compared with RQI segments of diagonal group. But, by contraries, there are increased perfusion rates and superior N /P ratio with retrograde right atrial route. It implies more effective perfusion with right atrial route of cardioplegia in more proximal coronary arterial obstruction[i.e., M group as compared with L group]. As a conclusion, all region of ischemia have superior perfusion rates with right atrial car-dioplegia as compared with antegrade route, and especially excellent results can be obtained in hearts with more proximal obstruction of coronary arteries which would otherwise result in more severe ischemic damage. But, the depressed perfusion rates of the segments with normal coronary artery in hearts with coronary arterial obstruction may be a problem of concern with right atrial cardioplegia and needs solution.
분비세포와 점막고유층 점액분비세포로부터 분비된 점액으로 덮여있으며, 비점막 및 하기도를 보호하는 생체방어기능을 갖고 있는 실험토끼의 비점막에 상악동염이 유발되었을 때 점막 분비세포 수적 증가와 분비물질의 변화를 규명하기 위하여 전자현미경으로 미세구조적 특성을 관찰하였다. 또한 점막 당단백질 말단기인 sialic acid의 염증시 분포양상을 알아보고자 sialic acid에 특이적으로 반응하는 lectin인 WGA를 황금입자가 표지된 lectin WGA 복합체를 반응시키고 투과전자현미경으로 관찰하였다. 그 결과 염증이 없는 실험 토끼들의 정상 상악동 점막상피세포는 균일한 높이의 섬모를 갖는 상피 세포층에 부분적으로 분비세포가 관찰되었다. 분비세포는 전자밀도가 높은 과립과 전자밀도가 낮은 과립을 포함하고 있는 것이 관찰되었다. 상악동염을 유발시킨 실험 토끼들의 점막상피세포는 상피 세포층이 비후되었으며 분비세포 수가 증가하였고 부분적으로 섬모가 소실되었다. 이러한 변화는 상피세포 표면에 세균의 부착을 막는 일차적인 방어체제인 점액의 증가로 화농성의 분비물이 생성되어 섬모의 기능을 손상시키는 것으로 확인되었다. Lectin WGA 반응에서 정상 섬모세포의 섬모와 분비세포의 전자밀도가 낮은 과립에 sialic acid를 포함하고 있는 것으로 확인되었다. 상악동염이 유발된 실험토끼의 점액에 lectin WGA 반응 결과 섬모세포의 섬모와 분비세포의 전자밀도가 낮은 과립에서 sialic acid의 분포가 급격히 증가하는 것으로 관찰되었다. 따라서 점막에 염증이 유발되면 분비세포와 점막의 분비세포의 증식으로 sialic acid를 포함한 sialogylcoconjugate의 과다분비가 유발되며 이는 분비세포가 염증으로 인해 생체가 외부자극에 나타내는 급격한 방어기전으로 생각되었다.
Kim, Nari;Lee, Sang-Kyeong;Chung, Joon-Yong;Seog, Dae-Hyun;Kim, Euiyong;Jin Han
한국생물물리학회:학술대회논문집
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한국생물물리학회 2003년도 정기총회 및 학술발표회
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pp.23-23
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2003
It has been suggested that the impairment of smooth muscle cell (SMC) function by alterations in the $Ca^{2+}$-activated $K^{+}$ ( $K_{Ca}$ ) channels accounts for the reduction in coronary reserve during left ventricular hypertrophy (LVH). However, this hypothesis has not been fully investigated. The main goal of this study was to assess whether the properties of $K_{Ca}$ channels in coronary SMCs were altered during LVH. New Zealand white rabbits (0.8-1.0 kg) and Sprague-Dawley rats (300-400 g) were randomly selected to receive either an injection of isoproterenol (300 $\mu\textrm{g}$/kg body weight) or an equal volume of 0.9% saline (1 mL/kg body weight). The animals developed LVH 10 days after injection. In patch-clamp experiments, the unitary current amplitude and open probability for the $K_{Ca}$ channels were significantly reduced in LVH patches compared with control patches. The concentration-response curve of the $K_{Ca}$ channel to [C $a^{2+}$]$_{i}$ was shifted to the right. Inhibition of the $K_{Ca}$ channels with TEA was more pronounced in LVH cells than in the control cells. The whole-cell currents of $K_{Ca}$ channels were reduced during LVH. Western blot analysis indicated no differences in $K_{Ca}$ channel expression between the control and LVH coronary SM membranes. In contraction experiments, the effect of a high $K^{+}$concentration on the resting tension of the LVH coronary artery was greater than on that of the control. The effect of TEA on the resting tension of the LVH coronary artery was reduced as compared with the effect on the control. Our findings imply a novel mechanism for reduced coronary reserve during LVH.ing LVH.
The purpose of this study was to compare the effects of various surface treatments by measuring removal torque on bone healing around titanium implants. 40 Screw-shaped cp titanium implants with length of 4mm, outer diameter of 3.75mm, and pitch-height of 0.5mm were used Group 1 was left as machined(control), Group 2 was blasted with $50{\mu}m\;Al_2O_3$, group 3 was blasted and etched in etching solution($NH_4OH : H_2O_2:H_2O= 1 : 1 : 5$) at $90^{\circ}C$ for 1 minute group 4 was blasted and oxidated under pure oxygen at $800^{\circ}C$. The implant surface roughness was analyzed with SEM and CLSM(Confocal Laser Scanning Microscope) and implants were placed in proximal tibial metaphysis of 10 New Zealand White rabbits. After 3 months of healing period, removal torque of each implant was measured to compare bone healing around implant. The results obtained were as follows 1. In SEM view, blasting increased the roughness of the surface, but etching of that rough surface decreased the roughness due to the removal of the tip of the peak. Oxidation also decreased the roughness due to formation of needle-like oxide grains on the implant surface. 2. The Sa value from CLSM was least in the machined group($0.47{\mu}m$), greatest in blasted group($1.25{\mu}m$), and the value decreased after etching($0.91{\mu}m$) and oxidation($0.94{\mu}m$). 3. The removal torque of etched group(24.5Ncm) was greater than that of machined group(16.7Ncm) (P<0.05), and was greatest in the oxidated group(40.3Ncm) and the blasted group(34.7Ncm).
Purpose: The survival of composite graft is dependent on three steps, (1) plasmatic imbibitions, (2) inosculation, and (3) neovascularization. Among the many trials to increase the survival rate of composite graft, prostaglandin E1 (PGE1) has beneficial effects on the microcirculatory level with vasodilating, antithrombotic, anti-inflammatory and neoangiogenic properties. Lipo-PGE1 which is lipid microspheres containing PGE1 had developed to compensate the systemic and local side effects of PGE1. This study was proposed to determine whether Lipo-PGE1 administration enhanced the survival of composite graft through neovascularization quantitatively in a rabbit ear model. Methods: Fourteen New Zealand White Rabbits each weighing 3~4 kg were divided in two groups: (1) intravenous Lipo-PGE1 injection group and (2) control group. A $2{\times}1\;cm$ sized, full-thickness rectangular composite graft was harvested in each auricle. Then, the graft was reaaproximated in situ using a 5-0 nylon suture. For the experimental group, $3{\mu}g$/kg/day of Lipo-PGE1 ($5{\mu}g$/mL) was administered intravenously through the marginal vein of the ear for 14 days. The control group was received no pharmacologic treatment. On the 14th postoperative day, composite graft of the ear was harvested and immunochemistry staining used Monoclonal mouse anti-CD 31 antibody was performed. Neoangiogenesis was quantified by counting the vessels that showed luminal structures surrounded by the brown color-stained epithelium and counted from 10 random high-power fields (400x) by independent blinded observer. Statistical analysis (Wilcoxon Signed Ranks test for nonparametric data) was performed using SPSS v12.0, with values of p<0.05 considered significant. Results: The mean number of the microvessels was $15.48{\pm}8.65$ in the experimental group and $9.82{\pm}7.25$ in the control group (p=0.028). Conclusion: The use of Lipo-PGE1 facilitated the neoangiogenesis, resulted in the improvement of the survival rate of graft. On the basis of this results, we could support wider application of Lipo-PGE1 for more effective therapeutic angiogenesis and successful survival in various cases of composite graft in the human.
목적: 0.9% NaCl solution 에 2주간 담근 레이저 처리 임플란트 표면의 친수성 증가현상을 확인하고 그것이 각 임플란트의 초기 치유기간 10일 후에 임플란트의 회전 제거력에 미치는 영향을 확인하고자 한다. 재료 및 방법: 지름 3 mm, 길이 8 mm 되는 10개의 선반 가공된 티타늄 임플란트를 대조군은 레이저 처리하고, 다른 실험군 10개는 레이저 처리 후 2주간 0.9% 생리적 식염수에 담근 후 뉴질랜드산 흰 토끼의 경골에 식립한후, 10일 후에 각각 회전 제거력을 측정하였다. 각 시편의 젖음각과 표면조성 및 형태를 분석하였다. 결과: 10일 후에 실험군의 회전 제거력이 대조군보다 의미있는 증가세를 보였다 (P = .002, < .05). 주사전자 현미경 성분분석과, 형태는 별다른 차이를 보이지 않았다. 결론: 식염수에 담그는 과정은 의미있는 회전 제거력의 증진을 초기기간(10일 후)에 나타낼 수 있다.
The tendon is a dense connective tissue that connects muscle to bone and plays an essential role in joint motion. The injured tendon heals slowly owing to its low cellularity and vascularity. This study aimed to evaluate and compare the effects of regenerative injection therapy (RIT), 20 % dextrose prolotherapy (DP), and platelet-rich plasma (PRP) injections that can promote tendon healing. Twenty-one New Zealand white rabbits were divided into the control, DP, and PRP treatment groups. The superficial digital flexor tendon (SDFT) of the right hindlimb of each rabbit was used. A round defect of 2 mm was induced. Approximately 0.2 mL of 20% dextrose and autologous PRP were injected into the proximal and distal ends of the SDFT mass. Radiographic and ultrasonographic examination and cross-sectional area (CSA) calculations were performed pre-operatively and at 2, 4, and 8 weeks. The SDFT of both limbs was transected for biomechanical and histomorphometric evaluations. The SDFT of the left limb was transected for intact control. Semi-quantitative analysis was performed to evaluate the histomorphometric properties. Additional analysis was performed using H&E, Masson's trichrome, and immunohistochemical staining. The biomechanical evaluation showed that the treatment groups had higher tensile strength compared to the defect control group, while the PRP group had higher tensile strength than the DP group. On histological examination, the treatment groups appeared to be relatively closer to the remodeling phase of the healing process than the defect control group; the characteristics of the PRP group were closer to the remodeling phase than those of the DP group. The ultrasonographic examination showed different tendencies. Increased values in the CSA were observed during the early period in the treatment groups. This study suggests that PRP and DP can promote the healing of tendon injury, and these effects were superior with PRP than that with DP.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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