Objectives: This study was performed to evaluate the skin irritation toxicity of processed sulfur. Methods: All experiments were conducted at Medvill (Korea), an institution authorized to perform non-clinical studies, under the Good Laboratory Practice (GLP) regulations. In order to investigate skin irritation toxicity of processed sulfur, we divided the back of six rabbits into two control sites and two test sites. One of each of the two control and test sites was then designated abraded sites and intact sites. In test sites, 0.5 g of processed sulfur was applied to the back of the rabbit for 24 hours, and in control sites, 0.5 g of sterile distilled water was applied in the same way. We observed and evaluated mortality, weight, general symptoms, and skin irritation toxicity. This study was conducted with the approval of the Animal Ethics Committee (Approval number: IAC2020-1549). Results: In all experiments, no dead animals were observed. In all cases, skin coloration was observed at 24 hours after processed sulfur administration. This coloration lasted up to 48 hours and is believed to be the effect of the administration of test substances. Weight measurement indicated that weight was lost 72 hours after administration in three cases, but this is considered an accidental weight change. Normal weight gain was observed in the remaining subjects. In all animals, no skin irritation toxicity was observed, and the primary irritation index (P.I.I) was calculated as 0.0 according to Draize's evaluation method. Conclusion: The above findings suggest that it is relatively safe to apply a processed sulfur to the skin. Further research on this topic is needed to provide more specific evidence.
New Zealand white 계의 토끼에게 EDC를 사용하여 hemocyanin에 접합시킨 human G-17-I을 면역한 결과 gastrin의 방사면역측정에 적합한 항 gastrin 혈청을 얻는데 성공하였다. 본 실험에서 얻은 항 gastrin 혈청의 역가는 1:25,000이며 human G-17-I과 human big gastrin에 매우 친화력이 높은 반면 다른 위장관 peptide 들과는 교차반응성이 아주 낮았다. 본 항 gastrin 혈청의 effective affinity constant는 $1.77{\times}10^{11}/M$이었다. 또한 총 결합부위(total binding sites)는 255 nM, 이질성지수(heterogeneity index)는 0.84 그리고 average affinity constant는 $0.79{\times}10^{11}/M$이었다. 본 실험에서 얻은 항 gastrin 혈청을 사용하여 사람과 흰쥐의 혈장 gastrin 농도를 방사면역측정법으로 측정한 결과 이미 잘 알려진 결과와 동일한 성적을 얻을 수 있었다. 이러한 결과들을 종합하여 볼때 본 실험에서 얻은 항 gastrin 혈청은 생리적농도로 존재하는 gastrin의 방사면역측정에 적합한 것으로 생각된다.
Purpose: The aim of this study was to determine whether biphasic calcium phosphate (BCP) bone substitute with two different concentrations of Escherichia coli-expressed recombinant human bone morphogenetic protein 2 (ErhBMP-2) enhances new bone formation in a standardized rabbit sinus model and to evaluate the concentration-dependent effect of ErhBMP-2. Methods: Standardized, 6-mm diameter defects were made bilaterally on the maxillary sinus of 20 male New Zealand white rabbits. Following removal of the circular bony windows and reflection of the sinus membrane, BCP bone substitute without coating (control group) was applied into one defect and BCP bone substitute coated with ErhBMP-2 (experimental group) was applied into the other defect for each rabbit. The experimental group was divided into 2 subgroups according to the concentration of ErhBMP-2 (0.05 and 0.5 mg/mL). The animals were allowed to heal for either 4 or 8 weeks and sections of the augmented sinus and surrounding bone were analyzed by microcomputed tomography and histologically. Results: Histologic analysis revealed signs of new bone formation in both the control and experimental groups with a statistically significant increase in bone formation in experimental group 1 (0.05 mg/mL ErhBMP-2 coating) after a 4-week healing period. However, no statistically significant difference was found between experimental group 1 and experimental group 2 (0.5 mg/mL ErhBMP-2 coating) in osteoinductive potential (P<0.05). Conclusions: ErhBMP-2 administered using a BCP matrix significantly enhanced osteoinductive potential in a standardized rabbit sinus model. A concentration-dependent response was not found in the present study.
Purpose: A new form of porous polyethylene, characterized by higher porosity and pore interconnectivity, was developed for use as a tissue-integrated implant. This study evaluated the effectiveness of porous polyethylene blocks used as an onlay bone graft in rabbit mandible in terms of tissue reaction, bone ingrowth, fibrovascularization, and graft-bone interfacial integrity. Methods: Twelve New Zealand white rabbits were randomized into 3 treatment groups according to the study period (4, 12, or 24 weeks). Cylindrical specimens measuring 5 mm in diameter and 4.5 mm in thickness were placed directly on the body of the mandible without bone bed decortication, fixed in place with a titanium screw, and covered with a collagen membrane. Histologic and histomorphometric analyses were done using hematoxylin and eosin-stained bone slices. Interfacial shear strength was tested to quantify graft-bone interfacial integrity. Results: The porous polyethylene graft was observed to integrate with the mandibular bone and exhibited tissue-bridge connections. At all postoperative time points, it was noted that the host tissues had grown deep into the pores of the porous polyethylene in the direction from the interface to the center of the graft. Both fibrovascular tissue and bone were found within the pores, but most bone ingrowth was observed at the graft-mandibular bone interface. Bone ingrowth depth and interfacial shear strength were in the range of 2.76-3.89 mm and 1.11-1.43 MPa, respectively. No significant differences among post-implantation time points were found for tissue ingrowth percentage and interfacial shear strength (P>0.05). Conclusions: Within the limits of the study, the present study revealed that the new porous polyethylene did not provoke any adverse systemic reactions. The material promoted fibrovascularization and displayed osteoconductive and osteogenic properties within and outside the contact interface. Stable interfacial integration between the graft and bone also took place.
To produce reconstituted rabbit embryos with fetal fibroblasts, the present study was evaluated the efficiencies of the different fusion and activation conditions as assessments of subsequent development and chromosome in the embryos. New Zealand White rabbits were used throughout the study. Fetal fibroblasts collected from 22-d of fetuses were cultured in DMEM + 10% FBS in 5% $CO_2$ in air. The culture was maintained for 10 passages. In every passage half of cell suspension were kept In frozen. From rabbits treated with FSH in 30% PVP solution and hCG, oocytes were surgically collected from oviducts at 14 h post-hCG injection and stripped off their cumulus cells by re-pipetting in a 300 IU hyaluronidase solution. Oocytes with an extruded first polar body and dense cytoplasm were enucleated by micromanipulation in Ham's F-10 medium+7.5 g/$m\ell$ cytochalasin B. Euncleation was confirmed under a fluorescence microscope after staining with 5 g/$m\ell$ bisbenzimide for 2 min. Each enucleated oocyte was injected with a fetal fibroblast into a perivitelline space. Reconstructed eggs were compared fusion rates either at 2.0 ㎸/cm or 1.6 ㎸/cm(60 sec, double pulses). After fusion, all eggs were activated with the combination of 5 M ionomycin (5 min) and 10 g/$m\ell$ cycloheximide (CHX, 3h), and cultured in CRlaa medium and transferred into TCM199+10% FBS on day 3. Although there was not significantly differ in fusion rate between treatments (60%, 2.0 ㎸/cm vs. 79.4%, 1.6 ㎸/cm), none of them in the eggs fused with 2.0 ㎸/cm developed to blastocyst. In comparison of development and chromosome status between different activation treatments (Group 1; 5 M ionomycin/10 g/$m\ell$ CHX, Group 2; 5 M ionomycin/5 g/$m\ell$ CHX + 2 mM DMAP after fusion with 1.6 ㎸/cm), there were not differ in cleavage and development rates (67.3% and 28.9% in Group 1; 67% and 33% in Group 2). All out of 8 embryos evaluated in Group 1 appeared a normal diploid chromosome sets and mean number of cells (Mean SEM) on day 4.5 of culture was 141.5 23.15 (n=8). It can be concluded that the use of cycloheximide has not happened in chromosome abnormalities, and fetal fibroblasts can be used for cloning in rabbit.
The role of the periosteum on osteointegration of $Bio-Oss^{(R)}$(Geistlich, Wolhusen/Switzerland) was studied in rabbit calvarial defect. 12 New Zealand white male rabbits between 2.8 and 4 kg were included in this randomized, blinded, prospective study. Each rabbit was anesthetized with Ketamine HCl(5 mg/kg) and Xylazine HCl(1.5 ml/kg). An incision was made to the bony cranium and the periosteum was reflected. Using a 6-mm trephine bur(3i. USA), four 8-mm defects were created with copious irrigation. The defects were classified into barrier membrane($Tefgen^{(R)}$, Lifecore Biomedical. Inc, U.S.A.) only group as a control, $Bio-Oss^{(R)}$ with barrier membrane group, $Bio-Oss^{(R)}$ with periosteum covering group, and $Bio-Oss^{(R)}$ without periosteum covering group. There were 2 rabbits in each group. The wound was closed with resorbable suture materials. Rabbits were sacrificed using phentobarbital(100 mg/kg) intravenously at 1, 2, and 4 weeks after surgery. The samples were fixed in 4% paraformaldehyde, and decalcified in hydrochloric acid decalcifying solution(Fisher Scientific, Tustin, CA) at $4^{\circ}C$ for 2-4 weeks. It was embedded in paraffin and cut into 6 ${\mu}m$ thickness. The sections were stained with H & E and observed by optical microscope. The results were as follows; 1. The periosteum played an important role in osteointegration of $Bio-Oss^{(R)}$ in bone defects. 2. When the periosteum remained intact and $Bio-Oss^{(R)}$ was placed on the defect, $Bio-Oss^{(R)}$ with periosteum covering has been incorporated into the newly formed bone from 2-week postoperatively. 3. When the periosteum was removed at the surgical procedure, invasion of connective tissue took place among the granules, and new bone formation was delayed compared to periosteum covering group. Therefore, when the bone grafting was performed with periosteal incision procedure to achieve tension-free suture, the integrity of the overlying periosteum should be maintained to avoid fibrous tissue ingrowth.
연구배경: 적출 흰쥐 심장에서 짧은 기간 동안 칼슘 파라독스를 반복하면(칼슘결핍 및 재투여에 의한 칼슘 전처치, calcium-free preconditioning-calcium depletion and repletion)하면 후속 되는 보다 긴 기간 동안의 허혈에 대하여 재관류시 심장기능 회복 증가, 괴사크기의 감소 등 허혈성 전처치에서 나타나는 것과 유사한 심근보호 효과가 있음이 최근 보고되어 있다. 본 실험에서는 적출 토끼 심장을 이용하여 칼슘결핍용액으로 전처치할 경우 ischemic preconditioning(이하 IP)와 유사한 심근보호 효과가 나타나는가의 유무를 기능 및 형태학적 측면에서 확인하고자 하였다. 대상 및 방법: 체중 1.5∼2.0 kg의 건강한 흰토끼(New Zealand White rabbit)의 적출 심장을 이용하여 Langendorff 방법에 따라 관류하여 일정한 기준치가 유지되면 전체 허혈(5분)-재관류(10분) 1회 실시로 IP를 유도하고 45분 동안 전체허혈후 120분 동안 재관류하였다(IP군, n=7). 대조군(n=7)에서는 IP없이 45분 동안 전체허혈후 120분 동안 재관류를 실시하였다. 칼슘결핍용액 투여 전처치군(n=7)에서는 5분 동안 칼슘결핍용액을 투여 후 10분 동안 칼슘이 포함된 관류액으로 관류하고 45분 동안 허혈을 실시한 후 120분 동안 재관류하였다. 허혈후 재관류 기간 동안 좌심실 기능, 관혈류 등을 측정하였으며 심근괴사 크기는 1% tetrazolium으로 염색하여 형태계측 하였다. 결과는 분산분석(ANOVA)을 실시하여 유의성이 있다고 판정되면 Tukey's post-hoc test로 검정하였다. 결과: 45분 동안 허혈후 LVDP, dP/dt, 관혈류 등은 다른 실험군에 비하여 IP군에서 현저히 증가하였으나 칼슘결핍용액 투여 전처치군에서는 오히려 허혈 대조군에 비하여 현저히 감소하였다. 그러나 칼슘결핍용액 투여 전처치군에서는 IP군에서와 같이 허혈 대조군에 비하여 심근괴사 범위가 현저히 감소되었다. 결론: 이상의 결과로 적출 관류 토끼 심장에서 칼슘결핍용액 투여로 전처치할 경우 후속된 장시간 동안의 허혈에 대하여 좌심실기능 회복 증가는 기대할 수 없으나 심근괴사 범위 한정 등의 보호효과가 있는 것으로 생각된다.
In oral and maxillofacial surgery, bone graft is very important procedure for functional and esthetic reconstruction. So, many researcher studied about bone graft material like autogenous bone, allograft bone and artificial bone materials. The purpose of this study is to evaluate the quantity of bone generation induced by $Grafton^{(R)}$ graft, human allogenic demineralized bone matrix. Total 24 sites of artificial bony defects prepared using trephin bur(diameter 8 mm) on parietal bone of six adult New Zealand White rabbits. Experimental group had six defect sites which grafted $Grafton^{(R)}$(0.1 cc). Active control group had nine defect sites, into which fresh autogenous bone harvested from own parietal bone was grafted and passive control group had nine defect sites without bone graft. After six weeks postoperatively, the rabbits were sacrificed. The defects and surrounding tissue were harvested and decalcified in 10% EDTA, 10% foamic-acid. Specimens were stained with H&E. New bone area percentage in whole defect area was measured by IMT(VT) image analysis program. Quantity of bone by $Grafton^{(R)}$ graft was smaller than that of autograft and larger than that of empty defects. In histologic view $Grafton^{(R)}$ graft site and autograft site showed similar healing progress but it was observed that newly formed bone in active control group was more mature. In empty defect, quantity and thickness of new bone formation was smaller than in $Grafton^{(R)}$-grafted defect. $Grafton^{(R)}$ is supposed to be a useful bone graft material instead of autogenous bone if proper maintenance for graft material stability and enough healing time were obtained.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제32권4호
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pp.360-373
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2006
The purpose of this research was to investigate whether pulsed electromagnetic field (PEMF) stimulation applied to the rabbit cranial defects grafted with ${\beta}$-tricalcium phosphate (${\beta}$-TCP) could affect the new bone formation. With 16 New Zealand white rabbits under the same condition, bilateral calvarial bone defects were formed around the sagittal suture line. The defect on the left side was grafted with ${\beta}$-TCP, while on the right side was grafted by harvested autogenous bone. PEMF was applied to 8 rabbits for 8 hours per day. The bony specimen were divided into 3 groups, the group 1 was autogenous bone grafted specimen, the group 2 was ${\beta}$-TCP grafted with PEMF, and the group 3 was ${\beta}$-TCP grafted without PEMF. We investigated the bone regeneration & growth factor expression at 2, 4, 6, and 8 weeks. As a result, BMP 2 was expressed in the group 1 from 2 weeks, the group 2 from 4 weeks, and the group 3 from 6 weeks. BMP 4 was expressed in the group 1 from 2 weeks, in the group 2 and the group 3 from 4 weeks. 4. There was no significant difference in expression pattern of BMP 7, PDGF, VEGF, and TGF-${\beta}$1 during grafted bone regeneration in group 1, 2, and 3. According to our results, PEMF stimulation could be effective on the new bome formation in animal study, and have a feasibility of clinical use.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제34권4호
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pp.428-434
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2008
Introduction: Piezosurgery device is one of the most commonly used instrument on the intraoral surgery such as maxillary sinus lift and autogeneous bone graft. Piezosurgery instrument also contains the tips that are manufactured especially for the convenient bone graft, which now many surgeons apply them for collecting bone graft materials in the curettage method for the restoration of skull defects. However, objective data has not been shown concerning the effects about bone graft with using Piezosurgery. Therefore we investigated the effects of Piezosurgery on the rabbit-skull defect healing. Materials & Methods: To investigate the regeneration of the bony defect with various bone graft, 10 adult New Zealand white rabbits (average weight : $2.8{\pm}0.3kg$, about 12weeks) were used. The four circular bony defects measuring 6mm in diameter were made with Piezosurgery device on each rabbit cranial bone. The harvested bone tissues during defect formation were also used for autogeneous bone graft. They were grafted into the defects in a various type; block type (Group 1), particulated type by the bone mill (Group 2), chopped type by curette shaped Piezosurgery tip (Group 3), the defect without any graft was served as control (control group). The animals were sacrificed after 6 weeks and bone regeneration capacity was evaluated histomorphometrically. Result & Conclusion: Autogeneous bone graft harvested using a Piezosurgery instrument showed satisfactory bone regeneration. There was no conspicuous difference bone prepared among by bone mill or Piezosurgery and block bone graft. Therefore, the bone harvested from the intraoral site near the operation field using the piezosurgery device can be a feasible and reliable graft for intraoral bony defects.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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