A strain producing a potent protease was isolated from turban shell. The strain was identified as Bacillus sp. S17110 based on phylogenetic analysis. The enzyme was purified from culture supernatant of Bacillus sp. S17110 to homogeneity by ammonium sulfate precipitation, SP-Sepharose, and DEAE-Sepharose anion exchange chromatography. Protease activity of the purified protein against casein was found to be stable at pH 7 to pH 10 and around $50^{\circ}C$. Approximately 70% of proteolytic activity of the enzyme was detected either in the presence of 100 mM SDS or Tween 20. The enzyme activity was enhanced in the presence of $Ca^{2+},\;Zn^{2+},\;Mg^{2+}$, but was inhibited by EDTA, indicating that it requires metal for its activity. The purified enzyme was found to be a monomeric protein with a molecular mass of 75 kDa, as estimated by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and gel filtration chromatography. The purified enzyme was analyzed through peptide fingerprint mass spectra generated from matrix-assisted laser desorption ionization-time-of-flight-mass spectrometry (MALDI-TOF-MS) and a BLAST search, and identified as immune inhibitor A (inhA) deduced from nucleotide sequence of B. cereus G9241. Since InhA was identified as protease that cleave antibacterial proteins found in insect, inhA-like protease purified from Bacillus sp. S17110 might be pathogenic to sea invertebrates.
Succinic semialdehyde reductase was inactivated by o-phthalaldehyde. The inactivation followed pseudo-first order kinetics, and the second-order rate constant for the inactivation process was 28 $M^{-1}s^{-1}$ at pH 7.4 and $25^{\circ}C$. The absorption spectrum ($\lambda_{max}$ 337 nm) and fluorescence excitation ($\lambda_{max}$ 340 nm) and fluorescence emission spectra ($\lambda_{max}$ 409 nm) were consistent with the formation of an isoindole derivative in the catalytic site between a cysteine and a lysine residue approximately about 3 $\AA$ apart. The substrate, succinic semialdehyde, did not protect enzymatic activity against inactivation, whereas the coenzyme NADPH protected against o-phthaladehyde induced inactivation of the enzyme. About 1 isoindole group per mol of the enzyme was formed following complete loss of enzymatic activity. These results suggest that the amino acid residues of the enzyme participating in a reaction with o-phthalaldehyde are cysteinyl and lysyl residues at or near the NADPH binding site.
The human genome has evolved as a consequence of evolutionary forces, such as natural selection. In this study, we investigated natural selection on the human genes by comparing the numbers of nonsynonymous (NS) and synonymous (S) mutations in individual genes. We initially collected all coding SNP data of all human genes from the public dbSNP. Among the human genes, we selected 3 different selection groups of genes: positively selected genes (NS/S${\geq}$3), negatively selected genes (NS/S${\leq}$1/3) and neutral selection genes (0.9
Journal of The Korean Society of Agricultural Engineers
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v.57
no.6
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pp.21-33
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2015
Recently, the Korean government announced a new development plan for a large-scale greenhouse complex in reclaimed lands. Wind environments of reclaimed land are entirely different from those of inland. Many standard books for ventilation design didn't include qualitative standard for natural ventilation. In this study, natural ventilation rates were analyzed to suggest standard for ventilation design of venlo type greenhouse built on reclaimed land. CFD (Computational Fluid Dynamics) simulation models were designed according to the number of spans, wind conditions and vent openings. The wind profile at a reclaimed land was designed using ESDU (Engineering Sciences Data Unit) code. Using the designed CFD simulation model, ventilation rates were computed using mass flow rate and tracer gas decay method. Additionally computed natural ventilation rates were evaluated by comparing with ventilation requirements. As a result of this study, ventilation rates were decreased with increasing of the number of spans. Ventilation rates were linearly increased with increasing of wind speed. When the wind speed was $1.0\;m{\cdot}s^{-1}$, only side vent was open and wind direction was $45^{\circ}$, homogeneity of ventilation rate at 0~1 m height is the worst. Finally, chart for computing natural ventilation rate was suggested. The chart was expected to be used for establishing standard of ventilation design.
Kim, Jung-Mo;Oh, Su-Young;Kim, Min-Young;Seo, Myoung-Suk;Kang, Chi-Duk;Park, Hye-Gyeong;Kang, Ho-Sung
Biomedical Science Letters
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v.9
no.4
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pp.241-248
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2003
Sodium salicylate, a plant stress hormone that plays an important role(s) in defenses against pathogenic microbial and herbivore attack, has been shown to induce a variety of cell responses such as anti-inflammation, cell cycle arrest and apoptosis in animal cells. p38MAPK plays a critical role(s) in the cell regulation by sodium salicylate. However, the signal pathway for sodium salicylate-induced p38MAPK activation is yet unclear. In this study, we show that although sodium salicylate enhances reactive oxygen species (ROS) production, N-acetyl-L-cysteine, a general ROS scavenger, did not prevent sodium salicylate-induced p38MAPK, indicating ROS-independent activation of p38MAPK by sodium salicylate. Sodium salicylate-activated p38MAPK appeared to be very rapidly down-regulated 2 min after removal of sodium salicylate. Interestingly, sodium salicylate-pretreated cells remained fully responsive to re-induction of p38MAPK activity by a second sodium salicylate stimulation or by other stresses, $H_2O$$_2$ and methyl jasmonate (MeJA), thereby indicating that sodium salicylate does not exhibit both homologous and heterologous desensitization. In contrast, pre-exposure to MeJA, $H_2O$$_2$, heat shock, or hyperosmotic stress reduced the responsiveness to subsequent homologous stimulation. Sodium salicylate was able to activate p38MAPK in cells desensitized by other heterologous p38MAPK activators. These results indicate that there is a sensing mechanism highly specific to sodium salicylate for activation of p38MAPK, distinct trom pathways used by other stressors such as MeJA, $H_2O$$_2$ heat shock, and hyperosmotic stress.
Three cheilostomatous bryozoans from Korean waters were identified. Thalamoporella sibogae Soule, Soule and Chaney, 1992 and Schizomavella acuta Osburn, 1952 are new to Korea, and Buffonellaria acutirostris is new to the bryozoans fauna. S. acuta and B. acutirostris n. sp. are described with figures.
To study the influence of the rotifer Brachionus calyciflorus on harmful algal bloom suppression, we focused on assessing the rotifer's abilities using several prey species : Microcystis aeruginosa, Synechocystis sp., Chlorella vulgaris and Coelastrum sp. of the warm-weather species and the cold-weather centric diatom Stephanodiscus hantzchii. Grazing effects and growth rates of rotifers B. calyciflorus were 94.5% and $1.29d^{-1}$, respectively, for Synechocystis sp., 87.4% and $0.60d^{-1}$, respectively, for M. aeruginosa, 95.2% and $0.65d^{-1}$, respectively, for C. $vulgaris^{TM}$, 78.6% and $0.45d^{-1}$, respectively, for C. vulgaris UTEX., 86.5% and $0.99d^{-1}$, respectively, for Coelastrum sp., and 82.6% and $0.40d^{-1}$, respectively, for S. hantzchii. Of these, although the growth of Synechocystis and Coelastrum was effectively suppressed by rotifer grazing, efficient suppression effects on Stephanodiscus blooms were unexpected. The present study revealed that reproduction of B. calyciflorus was greatly influenced by its food types in the initial stages and the efficiencies of bio-agents as sole food sources vary depending on the target algae and the agent.
Park, Yong Jin;Jeong, Jisu;Kim, Jae Seok;Choi, Dong Soo;Cho, Goang-Won;Park, Jin Seong;Lim, Jong Kuk
Journal of Integrative Natural Science
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v.12
no.2
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pp.47-57
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2019
Staphylococcus epidermidis is well-known not only as an innocuous normal flora species commonly isolated from human skin, but also as an important bacterial species to keep skin healthy, because this species can protect the human skin from pathogenic microorganisms. However, S. epidermidis turns into a potential pathogen in damaged skin, because these bacteria can easily form a biofilm on the wound area and provide antimicrobial resistance to other microorganisms embedded in the biofilm. Thus, it is important to kill S. epidermidis in the early stage of wound treatment and block the formation of biofilms in advance. In the present study, hydrogel wound dressings were fabricated using polyvinyl alcohol/polyethylene glycol containing silver citrate nanorods, which have been proven to have strong antimicrobial activity, especially against S. epidermidis, and their wound-healing efficacy was investigated in vivo using a rat experiment.
Phage display of proteins is a powerful tool for protein engineering since a vast library of sequences can be rapidly screened for a specific property. In this study, we develop da new phage display vector that was derived from a pET-25b(+) vector. The pET-25b(+) was modified in order that the expressed protein would have a T7-tag at the amino terminus and GpS (a major coat protein of M13 phage) at the carboxyl terminus. Another vector without the gp8 gene was also constructed. The newly developed phagemid vectors have several advantageous features. First, it is easy to examine whether or not the target proteins are functional and faithfully transported into the periplasmic space. This feature is due to the fact that recombinant proteins are produced abundantly in the pET system. Second, the T7-tag makes it possible to detect any target proteins that are displayed on the surface of filamentous bacteriophage. To verify the utility of the vector, the clones containing the glutathione S-transferase (GST) gene as a target were examined. The result showed that the GST produced from the recombinant vector was successfully transported into the periplasmic space and had the anticipated enzyme activity. Western blot analysis using a T7-tag antibody also showed the presence of the target protein displayed on the surface of the phage. The phages prepared from the recombinant clones were able to bind to glutathione-Sepharose and then eluted with glutathione. These results showed that the new vectors developed in this study are useful for the phage display of proteins.
Jo, Ye-seul;Kwon, Kyeong-seok;Lee, In-bok;Ha, Tae-hwan;Park, Se-jun;Kim, Rack-woo;Yeo, Uk-hyeon;Lee, Sang-yeon;Lee, Seung-no
Journal of The Korean Society of Agricultural Engineers
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v.57
no.6
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pp.35-46
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2015
Improvement in domestic poultry production has a positive effect on the export competitiveness of the poultry industry. However, overproduction and enlargement of facilities to assure a supply increase a stocking density which make a poor environment in the broiler house. In particular, an intensive rearing environment is vulnerable to dust control that causes respiratory diseases, such as asthma, bronchitis, etc., to farmers and broilers. However, monitoring data and research for environment control are not adequate, and there are no air quality regulations in broiler houses in Korea. In this study, TSP, PM10, inhalable dust and respirable dust concentration were monitored according to season, age of broiler and broiler's activities. Air quality assessment was also performed in accordance with the threshold limit value by Donham et al. (2000). The TSP concentrations were 77.5 %, 219.7 % higher and PM10 concentrations were 121.2 %, 303.8 % higher when change of season and winter respectively than summer. There were significantly different concentrations according to season and age of broiler. Inhalable and respirable dust concentration were also clearly different according to the season and age of broiler. A high dust concentration was observed, specifically exceeding the threshold limit by 119 % in the winter. In the case of the broiler's motion was activity according to worker's access into the broiler house, concentration level was 769.6 % higher than broiler's motion was stable and exceeded the threshold limit. These results suggest that the worker should put on protective equipment to protect there's respiratory health in the broiler house.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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