A self-assembled monolayer of protein G was fabricated to develop an immunosensor based on surface plasmon resonance (SPR), thereby improving the performance of the antibodybased biosensor through immobilizing the antibody molecules (lgG). As such, 11-mercaptoundecanoic acid (11-MUA) was adsorbed on a gold (Au) support, while the non-reactive hydrophilic surface was changed through substituting the carboxylic acid group (-COOH) in the 11-MUA molecule using 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrocholide (EDAC). The formation of the self-assembled protein G layer on the Au substrate and binding of the antibody and antigen were investigated using SPR spectroscopy, while the surface topographies of the fabricated thin films were analyzed using atomic force microscopy (AFM). A fabricated monoclonal antibody (Mab) layer was applied for detecting E. coli O157:H7. As a result, a linear relationship was achieved between the pathogen concentration and the SPR angle shift, plus the detection limit was enhanced up to 10$^2$ CFU/mL.
Park, Jisoo;Kim, Youngmi;Jung, Donggeun;Kim, Young-Pil;Lee, Tae Geol
한국진공학회:학술대회논문집
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한국진공학회 2016년도 제50회 동계 정기학술대회 초록집
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pp.378.2-378.2
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2016
Biosensors currently suffer from severe non-specific adsorption of proteins, which causes false positive errors in detection through overestimation of the affinity value. Overcoming this technical issue motivates our research. Polyethylene glycol (PEG) is well known for its ability to reduce the adsorption of biomolecules; hence, it is widely used in various areas of medicine and other biological fields. Likewise, amine functionalized surfaces are widely used for biochemical analysis, drug delivery, medical diagnostics and high throughput screening such as biochips. As a result, many coating techniques have been introduced, one of which is plasma polymerization - a powerful coating method due to its uniformity, homogeneity, mechanical and chemical stability, and excellent adhesion to any substrate. In our previous works, we successfully fabricated plasmapolymerized PEG (PP-PEG) films [1] and amine functionalized films [2] using the plasma enhanced chemical vapor deposition (PECVD) technique. In this research, an amine functionalized PP-PEG film was fabricated by using the plasma co-polymerization technique with PEG 200 and ethylenediamine (EDA) as co-precursors. A biocompatible amine functionalized film was surface characterized by X-ray photoelectron spectroscopy (XPS) and Fourier-transform infrared spectroscopy (FT-IR). The density of the surface amine functional groups was carried out by quantitative analysis using UV-visible spectroscopy. We found through surface plasmon resonance (SPR) analysis that non-specific protein adsorption was drastically reduced on amine functionalized PP-PEG films. Our functionalized PP-PEG films show considerable potential for biotechnological applications such as biosensors.
Bi metal deposited on $Bi_2MoO_6$ composite photocatalysts have been successfully synthesized via a simple reduction method at room temperature with using $NaBH_4$ as the reducing agent. The photocatalytic activity of the composite was evaluated by degradation of rhodamine B (RhB) and bisphenol A (BPA) solution under visible light. The rate constant of $Bi/Bi_2MoO_6$ composite to RhB is 10.8 times that of $Bi_2MoO_6$, and the degradation rate constant of BPA is 6.9 times of that of $Bi_2MoO_6$. Nitrogen absorption-desorption isotherm proved that the increase of specific surface area is one of the reasons for the improvement of photocatalytic degradation activity of $Bi/Bi_2MoO_6$ composites. The higher charge transfer efficiency of $Bi/Bi_2MoO_6$ is found through the characterization of the photocurrent and impedance, which are attributed to the surface plasmon resonance (SPR) effect produced by the introduction of the metal Bi monomer in the composite. Free radical capture experiments proved that cavitation is the main active species. Based on the above conclusions, a possible mechanism of photocatalytic degradation is proposed.
Exosomes, known as nanoscale extracellular vesicles in the range of 30-150 nm, are known to contain clinically significant information. However, there is still insufficient information on exosomal membrane proteins for cancer diagnosis. In this work, we investigated the characteristics of the membrane proteins of exosomes shed by cultured breast cancer cell lines using a surface plasmon resonance (SPR) spectroscopy and pre-activated alkanethiols modified sensor chips. The antibodies of breast cancer biomarkers such as MCU-16, EpCAM, CD24, ErbB2, and CA19-9 were immobilized on the pre-activated alkanethiols surfaces without any activation steps. The purified exosomes were loaded onto each antibody surface. The affinity rank of the antibody surfaces was decided by the relative capture efficiency factors for the exosomes. In addition, an antibody with a relative capture efficiency close to 100% was tested with exosome concentration levels of 104/µl, 105/µl, and 106/µl for quantitative analysis.
FcBP consisting of 13 amino acids specifically binds to Immunoglobulin G Fc domain. Initially, we utilized this peptide for preparation of antibody chip as a PEG composite for enhanced solubility. After then, the peptide conjugate was immobilized on agarose resin, resulting in highly efficient affinity column for antibody purification. The efficiency was comparable to commercial Protein A column. Recently, this peptide was conjugated with cell penetratingpeptide (CPP) on a backbone of GFP, affording antibody transducer, which carries antibody into live cells by simple mixing of antibody and the transducer in cell culture media. Antibody transduction into cells was monitored by live cell imaging. More recently, the FcBP was fused to ferritin cage, which consists of 24 ferritin protein molecules. The FcBP-ferritin cage showed greatly increased binding affinity to human IgG. Its binding was analyzed by QCM and SPR analysis. Finally, it was selectively delivered by Herceptin to SKBR3, a breast cancer cell, over MCF10A, non-tumorigenic cells.
Supraja, Nookala;Dhivya, J.;Prasad, T.N.V.K.V.;David, Ernest
Advances in nano research
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제6권2호
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pp.183-200
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2018
In the present study silver nanoparticles (AgNPs) were successfully synthesized using aqueous extract of Sargassum muticum. The aqueous extract (10%) treated with 1 mM silver nitrate solution resulted in the formation of AgNPs and the surface plasmon resonance (SPR) of the formed AgNPs was recorded at 360 nm using UV-Visible spectrophotometer. The molecules involved in the formation of AgNPs were identified by Fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR), surface morphology was studied by using scanning electron microscopy (SEM), SEM micrograph clearly revealed the size of the AgNPs was in the range of 40-65 nm with spherical, hexagonal in shape and poly-dispersed nature, and X-ray diffraction spectroscopy (XRD) was used to determine the crystalline structure. High positive Zeta potential (36.5 mV) of formed AgNPs indicates the stability and XRD pattern revealed the crystal structure of the AgNPs by showing the Bragg's peaks corresponding to (111), (200), (311) and (222) planes of face-centered cubic crystal phase of silver. The synthesized AgNPs exhibited effective anticancerous activity (at doses 25 and $50{\mu}g/ml$ of AgNPs) against Breast cancer cell line (MCF7).
FcBP consisting of 13 amino acids specifically binds to Immunoglobulin G Fc domain. Initially, we utilized this peptide for preparation of antibody chip as a PEG composite for enhanced solubility. After then, the peptide conjugate was immobilized on agarose resin, resulting in highly efficient affinity column for antibody purification. The efficiency was comparable to commercial Protein A column. Recently, this peptide was conjugated with cell penetrating peptide (CPP) on a backbone of GFP, affording antibody transducer, which carries antibody into live cells by simple mixing of antibody and the transducer in cell culture media. Antibody transduction into cells was monitored by live cell imaging. More recently, the FcBP was fused to ferritin cage, which consists of 24 ferritin protein molecules. The FcBP-ferritin cage showed greatly increased binding affinity to human IgG. Its binding was analyzed by QCM and SPR analysis. Finally, it was selectively delivered by Herceptin to SKBR3, a breast cancer cell, over MCF10A, non-tumorigenic cells (Fig. 1). Fig. 1. Fluorescent microscopic images of SKBR3 breast cancer cells (A~C) and MCF10A breast cells (D~F) treated with Cy3-trastuzumab/fFcBP-Pf_Fn complexes. Trastuzumab and FcBP-Pf_Fn, which were labeled with Cy3 (Cy3-trastuzumab) and fluorescein (fFcBP-Pf_Fn), respectively, selectively targeted SKBR3 over MCF10A.
A novel photonic crystal fiber (PCF) sensor with three D-shaped holes based on surface plasmon resonance (SPR) is analyzed in this paper. Three D-shaped holes are filled with the analyte, and the gold film is deposited on the side of three planes. The design of D-shaped holes with outward expansion can effectively solve the uniformity problem of metallized nano-coating, it is beneficial to the filling of the analyte and is convenient for real-time measurement of the analyte. Compared with the hexagonal lattice structure, the triangular arrangement of the clad air holes can significantly reduce the transmission loss of light and improve the sensitivity of the sensor. The influences of the air hole diameter, the distance between D-shaped holes and core, and the counterclockwise rotation angle of D-shaped holes on sensing performance are studied. The simulation results show that the wavelength sensitivity of the designed sensor can be as high as 10100 nm/RIU and the resolution can reach 9.9 × 10-6 RIU.
Velmurugan Palanivel;Sung-Chul Hong;Veera Ravi Arumugam;Sivakumar Subpiramaniyam;Pyong-In Yi;Seong-Ho Jang;Jeong-Min Suh;Eun-Sang Jung;Je-Sung Park
Advances in nano research
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제14권4호
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pp.391-397
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2023
This manuscript describes the one-step eco-friendly green fabrication of silver nanoparticles (AgNPs) through the in-situ bio-reduction of an aqueous solution of silver nitrate using Syzygium aromaticum leaf extract. UV-vis spectroscopy shows a characteristic SPR peak around 442 nm. FTIR spectroscopy showed that the AgNPs were capped with bioactive phyto-molecules. TEM images revealed oval and spherical particles with a mean diameter of ~12.6 nm. XRD analysis revealed crystalline and face-cantered cubic AgNPs. The phytosynthesized AgNPs showed broad-spectrum anti-microbial activity against two foodborne pathogenic bacteria, Listeria monocytogenes and Staphylococcus aureus. The AgNPs showed a prominent ability to inhibit biofilms formed by L. monocytogenes and S. aureus in laboratory conditions through a crystal violet assay. The results suggest that the AgNPs could be a novel nanotool to develop effective antimicrobial and anti-biofilm agents in food preservation.
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