Objective : The purpose of this study was to compare anti-Inflammation and anti-oxidation of Jeondo-San(JDS) extracted with two kinds of solvents, ethanol and water. Methods : Two kinds of JDS extractions were prepared 20, 50, $100\;{\mu}g/mg$. The Cytotoxicity was measured by MTT assay in Raw 264.7 cell. The anti-inflammation effects were measured by inhibitory efficacy on $PGE_2$, NO, TNF-$\alpha$, COX-2 and iNOS in Raw 264.7 cell. The anti-oxidation effects were measured by ROS inhibitory efficacy, intracellular GSH synthesis and DPPH Radical scavenging in HaCaT cell. Results : 1. All of JDS extraction groups had no cytotoxicity in Raw 264.7 cell. 2. All of JDS extraction groups showed significantly inhibitory effect on production of $PGE_2$. Inhibitory efficacy increased in accodance with concentration. 3. All of JDS extraction groups showed significantly inhibitory effect on production of NO. Inhibitory efficacy increased in accodance with concentration. 4. All of JDS extraction groups did not show significantly inhibitory effect on production of TNF-$\alpha$. 5. $100\;{\mu}g/ml$ JDS extracted with ethanol and $50\;{\mu}g/ml$, $100\;{\mu}g/ml$ JDS extracted with water showed inhibitory effect on iNOS expression. 6. All of JDS extraction groups showed significantly inhibitory effect on production of ROS. Inhibitory efficacy increased in accodance with concentration. Ethanol extractions were better than water extractions. 7. $100\;{\mu}g/ml$ JDS extracted with ethanol only produced GSH of $32{\pm}5.2%$. 8. All of JDS extraction groups showed significantly scavenging effect of DPPH radicals. Inhibitory efficacy increased in accodance with concentration. Ethanol extractions were better than water extractions. Conclusion : Two kinds of JDS extractions have not cytotoxicity and inhibit production of NO. JDS extracted with water was effective in anti-inflammation, JDS extracted with ethanol was effective in anti-oxidation.
The inhibitory effects of Curcuma longa rhizome-derived materials against nitric oxide (NO) production were assessed. The inhibitory effect (57%) on NO production was evidenced by the methanol extract of C. longa at $1\;{\mu}g/mL$. In the fractionation of the methanol extract, the ethyl acetate fraction evidenced an inhibitory effect greater than 62.1% at $1\;{\mu}g/mL$. The active constituent was identified as curcumin. Curcumin exerted potent inhibitory effects of 78.7 and 65.7% at concentrations of 1 and $0.5\;{\mu}g/mL$, respectively. Furthermore, the inhibitory effect of ar-turmerone was measured as 31.3 and 15.8% at 1 and $0.5\;{\mu}g/mL$, respectively. The iNOS expression-suppressive effects of curcumin were assessed via western blot analysis. Our results suggest that curcumin and ar-turmerone may prove useful in the development of new types of NO inhibitors.
Background: To date, the anti-wrinkle efficacy of phellodendri cortex has not been defined. In this study, we investigated the nitric oxide (NO) production and elastase inhibitory activities of 80% methanol extract of Phellodendri cortex and its ethyl acetate fraction. Methods and Results: We prepared 80% methanol extract, and its fractions from phellodendri cortex. The treatment of RAW 264.7 cell with $25{\mu}g/m{\ell}$ 80% methanol extract and ethyl acetate fraction resulted in no toxicity. We conducted assays of nitric oxide (NO) production and elastase inhibition. In the NO production assay, the ethyl acetate fraction showed an inhibitory effect approximately 17 times stronger than the 80% methanol extract. In elastase inhibitory assay, the ethyl acetate fraction also showed a stronger effect than the 80% methanol extract. In order to standardize the extract and fraction, we used TLC to separate the extract and observed the plate under UV light. We confirmed that the known pharmacological ingredients berberine, and palmatine in the 80% methanol extract and the ethyl acetate fraction. Conclusions: These results indicated that phellodendri cortex extract and its ethyl acetate fraction produced strong inhibitory effect on elastase and NO production.
The effect on the antioxidant activity and Nitric Oxide activity production inhibitory activity of Taraxacum has not been known. Therefore, phenolics and flavonoid contents were investigated from the ethanol extracts of five different Taraxacum species. The results showed that, among the five Taraxacum, T. hallaisanensis contains the highest total phenolic and flavonoid contents. When the antioxidant activity was measured by DPPH, $ABTS^+$ and reducing power activity, the free radical scavenging activity of T. hallaisanensis was also the highest among five Taraxacum species. However, measurement by CCK-8 assay in Raw264.7 cells indicated that the extracts of Taraxacum species have no effect on cell viability. Moreover, we also investigated the effect of Taraxacum species on NO scavenging activity in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated Raw264.7 cells. The results clearly showed that Taraxacum species inhibited NO production, and the inhibitory effect of T. hallaisanensis was the strongest. The above results suggested that Taraxacum species affected the antioxidant and NO scavenging activity, and among the five species, antioxidant and NO scavenging activity assay of T. hallaisanensis was significantly higher than those of other four Taraxacum species. Therefore, T. hallaisanensis could be used as a potential drug with anti-oxidant and anti-inflammatory effect.
In this study, we investigated on antioxidative activity, tyrosinase inhibitory activity and nitric oxide(NO) production inhibitory activity in the hot water extract of Taraxacum coreanum and its fractions. The total polyphenol and flavonoid contents of the extract were found to be 65.42 mg/g and 9.83 mg/g, respectively. And the total polyphenol and flavonoid contents of the ethyl acetate fraction were found to be 168.23 mg/g and 31.92 mg/g, respectively. In DPPH radical scavenging ability, $SC_{50}$ values of the ethyl acetate and butanol fraction were exhibited 64.65 ${\mu}g/ml$ and 277.42 ${\mu}g/ml$, respectively. Moreover, ethyl acetate fraction showed higher inhibitory activity than other samples in tyrosinase inhibitory activity. In NO production inhibitory activity, the extract and its fractions showed NO production inhibitory effect. Especially, the ethyl acetate, chloroform and butanol fraction was exhibited higher NO production inhibitory activity than other samples. As a result, the ethyl acetate and butanol fraction from the water extract of T. coreanum could be applicable to functional materials for skin-related fields.
Hur, Jinyoung;Lee, Pyeongjae;Kim, Mi Jung;Cho, Young-Wuk
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제18권5호
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pp.397-402
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2014
Microglia are activated by inflammatory and pathophysiological stimuli in neurodegenerative diseases, and activated microglia induce neuronal damage by releasing cytotoxic factors like nitric oxide (NO). Activated microglia synthesize a significant amount of vitamin $D_3$ in the rat brain, and vitamin $D_3$ has an inhibitory effect on activated microglia. To investigate the possible role of vitamin $D_3$ as a negative regulator of activated microglia, we examined the effect of 25-hydroxyvitamin $D_3$ on NO production of lipopolysaccharide (LPS)-stimulated microglia. Treatment with LPS increased the production of NO in primary cultured and BV2 microglial cells. Treatment with 25-hydroxyvitamin $D_3$ inhibited the generation of NO in LPS-activated primary microglia and BV2 cells. In addition to NO production, expression of 1-${\alpha}$-hydroxylase and the vitamin D receptor (VDR) was also upregulated in LPS-stimulated primary and BV2 microglia. When BV2 cells were transfected with 1-${\alpha}$-hydroxylase siRNA or VDR siRNA, the inhibitory effect of 25-hydroxyvitamin $D_3$ on activated BV2 cells was suppressed. 25-Hydroxyvitamin $D_3$ also inhibited the increased phosphorylation of p38 seen in LPS-activated BV2 cells, and this inhibition was blocked by VDR siRNA. The present study shows that 25-hydroxyvitamin $D_3$ inhibits NO production in LPS-activated microglia through the mediation of LPS-induced 1-${\alpha}$-hydroxylase. This study also shows that the inhibitory effect of 25-hydroxyvitamin $D_3$ on NO production might be exerted by inhibiting LPS-induced phosphorylation of p38 through the mediation of VDR signaling. These results suggest that vitamin $D_3$ might have an important role in the negative regulation of microglial activation.
Kadayat, Tara Man;Kim, Mi Jin;Nam, Tae-Gyu;Park, Pil-Hoon;Lee, Eung-Seok
Bulletin of the Korean Chemical Society
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제35권8호
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pp.2481-2486
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2014
Twelve thienyl/furanyl-hydroxyphenylpropenones were systematically designed and synthesized, and evaluated for their inhibitory effect on LPS-induced ROS and NO production in RAW 264.7 macrophages. Compound 11 displayed the most significant inhibitory activity of LPS-induced ROS and NO production in RAW 264.7 macrophages. Structure-activity relationship study indicated that para-hydroxyphenyl moiety plays an important role for inhibitory activities on both LPS-induced ROS and NO production as well as 3-thienyl moiety on molecule.
To investigate the anti-inflammatory activity of natural products, we determined the anti-inflammatory activity of purified epigallocatechin (EGC) from Camellia sinensis leaves. In the present study, we found that EGC inhibited the production of proinflammatory mediators (IL-6, TNF-${\alpha}$, NO, and $PGE_2$) in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated Raw 264.7 cells. Suppression of IL-6 seems to be at least partly attributable to the inhibitory effect of EGC. TNF-${\alpha}$ is a major cytokine produced by LPS-induced macrophages, and they have a wide variety of biological functions including regulation of inflammation. The inhibition of IL-6 and TNF-${\alpha}$ production by EGC may downregulate the acute-phase response to LPS, thereby reducing LPS-induced inflammation. In addition to IL-6 and TNF-${\alpha}$, EGC effectively reduced the production of other key inflammatory mediators, including NO and $PGE_2$. The inhibitory effect of EGC on NO and $PGE_2$ production was supported by the suppression of inducible nitric oxide synthase and COX-2 at protein levels. These results support the traditional use of EGC in the alleviation of various inflammation-associated diseases and suggest that EGC might be useful in the development of new functional foods for inflammatory diseases.
잣나무 잎 추출물에 대해 염증인자인 hyaluronidase 저해효과를 측정한 결과 ethanol 추출물에서 물추출물에 비해 상대적으로 더 높은 HAase 저해효과를 보여주었으며, $50-200{\mu}g/mL$ phenolic 농도에서 13.2-29.5%의 저해효과를 나타내었다. 잣나무잎 추출물을 Raw 264.7 cell에 농도별로 처리하여 생성되는 NO량을 측정한 결과 LPS처리군은 LPS 무처리군에 비하여 3배에 가까운 NO발현을 나타내었으며, 농도 의존적으로 NO발현을 억제하였다. LPS에 의해서 생성된 $PGE_2$의 생성억제 효과를 측정한 결과 $25{\mu}g/mL$의 처리농도에서 ethanol 추출물이 26.2%의 저해율을 나타내었다. NO 생성 억제기작에 관한 iNOS 단백질의 발현량을 측정한 결과 $25{\mu}g/mL$의 농도에서 40%의 높은 억제효과를 나타내었으며, 농도 의존적으로 감소하는 경향을 관찰 할 수 있었다. LPS 처리시 또 다른 염증인자인 COX-2의 단백질 발현을 측정한 결과 $25{\mu}g/mL$의 처리 농도에서 64%의 저해효과를 나타내었다. 잣나무잎 추출물이 Raw 264.7 세포에서 LPS에 의해서 생성되는 $TNF-{\cdot}$, IL-6의 생성억제 효과를 측정한 결과 $25{\mu}g/mL$의 처리농도에서 각각 61.7, 62%의 저해 효과를 나타내었다. 따라서 잣나무잎 추출물은 염증억제를 위한 천연 기능성 소재로 활용이 가능할 것으로 판단되었다.
During the screening for inhibitors on nitric oxide (NO) production in LPS-activated murine macrophage, RAW 264.7 cells, two coumarins were isolated from chloroform extract of Ponciri Fructus. They were identified as imperatorin (10), phellopterin (11) on the basis of spectroscopic methods. The $IC_{50}$ values for NO formatiom were about $5.4\;{\um}M$ and $35.0\;{\um}M$, respectively, and then eleven coumarins were tested for the inhibitory effects on NO production in activated macrophages. All the test coumarins inhibited NO production in concentration-dependent manner and furanocoumarins (6-11) showed much more potent inhibitory effect than simple coumarins. Among the compounds examined xanthotoxin (8) was the most potent inhibitors of NO production $(IC_{50}=1.4\;{\mu}M)$. Analysis of the structure-activity relationship among these coumarins led to the conclusion that the substitution of C-5 position in furanocoumarins reduces greatly their inhibitory potency although the substitution of C-8 does not almost affect it.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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