• 제목/요약/키워드: NIH

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Decreased Interaction of Raf-1 with Its Negative Regulator Spry2 as a Mechanism for Acquired Drug Resistance

  • Ahn, Jun-Ho;Kim, Yun-Ki;Lee, Michael
    • Biomolecules & Therapeutics
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    • 제19권2호
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    • pp.174-180
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    • 2011
  • Experiments were carried out to determine the role of Raf-1 kinase in the development of drug resistance to paclitaxel in v-H-ras transformed NIH 3T3 fibroblasts (Ras-NIH 3T3). We established a multidrug-resistant cell line (Ras-NIH 3T3/Mdr) from Ras-NIH 3T3 cells by stepwise increases in paclitaxel. Drug sensitivity assays indicated that the $IC_{50}$ value for drug-resistant Ras-NIH 3T3/Mdr cells was more than 1 ${\mu}M$ paclitaxel, 10- or more-fold higher than for the parental Ras-NIH 3T3 cells. Western blot and RT-PCR analysis showed that the drug efflux pump a P-glycoprotein were highly expressed in Ras-NIH 3T3/Mdr cells, while not being detectable in Ras-NIH 3T3 cells. Additionally, verapamil, which appears to inhibit drug efflux by acting as a substrate for P-glycoprotein, completely reversed resistance to paclitaxel in Ras-NIH 3T3/Mdr cell line, indicating that resistance to paclitaxel is associated with overexpression of the multidrug resistance gene. Interestingly, Ras-NIH 3T3/Mdr cells have higher basal Raf-1 activity compared to Ras-NIH 3T3 cells. Unexpectedly, however, the colocalization of Raf-1 and its negative regulator Spry2 was less observed in cytoplasm of Ras-NIH 3T3/Mdr cells due to translocation of Spry2 around the nucleus in the perinuclear zone, implying that Raf-1 may be released from negative feedback inhibition by interacting with Spry2. We also showed that shRNA-mediated knockdown of Raf-1 caused a moderate increase in cell susceptibility to paclitaxel. Thus, the results presented here suggest that a Raf-1-dependent pathway plays an important role in the development of acquired drug-resistance.

보건분야 공무원 교육훈련 현황 및 발전 방안에 관한 연구 (A Study on the Improvement Plan of Public Health Official Training)

  • 신영학;윤영희;김지희;안창영;김점자;이종무;이순연;김명현;양숙자
    • 지역사회간호학회지
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    • 제14권3호
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    • pp.533-545
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    • 2003
  • Purpose: This study investigated the situation of public health official training and suggested a scheme for improving central and local official training institutes, in order to improve the quality and quantity of training programs for central and local public health officials. Methods: This study examined training resources, design processes, content and methods of training programs of the Department of Health and Welfare Training in NIH and the fifteen city and provincial officials training institutes in 2002. Results: The central and the local officials training institutes didn't exchange information on public health training. NIH supplied various specialized training programs for senior and junior officials. However, city and provincial official training institutes supplied a few training programs for local public health officials. Conclusion: A mutually cooperative relationship is needed between central and local official training institutes to exchange information on public health official training. The Department of Health and Welfare Training in NIH as a central training institute has to develop training programs related to new public health policies, supply training programs for senior officials, and support local official training institutes. To satisfy the training demands of public health officials, the city and provincial official training institutes should increase the number of training programs for junior officials.

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Ras에 의해 암화된 세포에서 dynamin-2의 발현 촉진 (Up-regulation of dynamin-2 gene expression in Ras-transformed cells)

  • 유지윤
    • 생명과학회지
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    • 제17권3호통권83호
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    • pp.375-380
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    • 2007
  • Dynamin은 여러 종류의 endocytosis 과정에서 최종적으로 endocytic vesicle을 membrane으로부터 분리하는데 중요한 역할을 하는 단백질이다. 이전의 보고에 의하면 dynamin-2는 Ras에 의해 암화된 세포에서 Ras signal의 신호 전달 단백질인 Grb2의 SH3 domain과 결합한다고 알려져 있다. 하지만 정상적인 세포 (NIH3T3)에 비해 Ras에 의해 암화된 세포 (NIH3T3(Ras))에서 이들 단백질의 발현이 높아지는지에 대해서는 아직 알려진 바가 없다. 본 연구에서는 먼저 NIH3T3 세포와 NIH3T3(Ras) 세포에서 dynamin-2와 Grb2의 단백질 발현을 보았는데, dynamin-2의 경우 NIH3T3 세포에 비해 NIH3T3(Ras) 세포에서 그 발현이 현저히 증가함을 볼 수 있었지만 Grb2의 경우 두 세포에서 발현의 차이를 관찰할 수 없었다. Competitive PCR을 이용하여 mRNA의발현정도를 확인하였을 때, 단백질 발현 정도와 마찬가지로 dynamin-2의 경우 NIH3T3(Ras) 세포에서 약 100배의 증가를 확인하였지만 Grb2의 경우 차이를 볼 수 없었다. Dynamin-2의 promoter 활성을 NIH3T3(Ras) 세포에서 관찰한 결과 start codon으로부터 300 bp에서 200 bp upstream에 dynamin-2의 promoter 활성을 조절하는 부위가 존재함을 확인할 수 있었다.

Differential expression patterns of gangliosides in the tissues and cells of NIH-mini pig kidneys

  • Cho, Jin-Hyoung;Kim, Ji-Su;Lee, Young-Choon;Oh, Keon-Bong;Kwak, Dong-Hoon;Kim, Won-Sin;Hwang, Seong-Soo;Ko, Ki-Sung;Chang, Kyu-Tae;Choo, Young-Kug
    • Animal cells and systems
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    • 제14권2호
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    • pp.83-89
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    • 2010
  • Gangliosides are a ubiquitous component of the membranes of mammalian cells that have been suggested to play important roles in various cell functions such as cell-cell interaction, adhesion, cell differentiation, growth control and signaling. However, the role that gangliosides play in the immune rejection response in xenotransplantation is not yet clearly understood. In this study, differential expression patterns of gangliosides in HEK293 (human embryonic kidney cells), PK15 (porcine kidney cells), NIH-kd (NIH-mini pig kidney cells, primary cultured) and the cortex, medulla and calyx of the NIH-mini pig kidney were investigated by high-performance thin-layer chromatography (HPTLC). The results revealed that HEK293, PK15 and NIH-kd contained GM3, GM2 and GD3 as major gangliosides. Moreover, GM3, which are the gangliosides of NIH-kd, were expressed at higher levels than HEK293 and PK15. Especially, GT1b were expressed in HEK293 and NIH-kd but not in PK15. Finally, GM1 and GD1a were expressed in NIH-kd, but not in HEK293 or PK15. These results suggest that differential expression patterns of gangliosides from HEK293, PK15 and NIH-kd are related to the immune rejection response in xenotransplantation.

Rapid and Direct Diagnosis of Enteroviruses from Stool Samples

  • Park, Jeong-Koo;Kim, Ki-Soon;Chung, Yoon-Seok;Lee, Yoon-Sung;Kim, Ji-Eun;Jee, Young-Mee;Lee, Kwang-Ho;Song, Chul-Yong;Yoon, Jae-Duek
    • 한국동물학회:학술대회논문집
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    • 한국동물학회 1998년도 한국생물과학협회 학술발표대회
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    • pp.329.1-329
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    • 1998
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NIH3T3와 NIH3T3(ras) 세포에서 Dynamin II 발현 및 형태적 비교 (Dynamin II Expression and Morphological Comparison of NIH3T3 and NIH3T3 (ras) Cells)

  • 이철우;김수관;최정윤;최백동;배춘식;정순정;정문진
    • Applied Microscopy
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    • 제35권3호
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    • pp.121-128
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    • 2005
  • Ras 신호전달체계는 세포내 다양한 결합 분자들과 더불어 세포의 분열과 세포의 이동에 관여한다. Dynamin 단백질은 endocytosis와 분비과정에서 vesicle를 분리하는데 관여하는 것으로 알려져 있으며, 3가지 아형으로 구분된다. Dynamin I은 신경조직에서 만 발현되고, dynamin II는 모든 조직에서 발현되지만 dynamin III는 정소를 포함한 생식기계에서만 발현된다. 선행된 연구에서 NIH3T3 세포를 이용하여 ras과발현 세포주를 만들었으며, dynamin II와 ras의 신호전달체계에 있는 Grb2가 결합한다는 것을 보고하였다. 따라서, 본 연구는 ras 단백질이 과발현되는 세포 (NIH3T3 (ras))와 대조세포인 NIH3T3의 형태학적인 차이점을 분석하고, 이 두 세포들에서 dynamin II 단백질의 발현의 차이를 비교하고자 하였다. Dynamin II의 발현차이를 분석하기 위해 형광염색을 하여 공초점 레이저현미경으로 세포내 분석을 하였으며, western blot을 시행하여 생화학적인 발현차이를 보았다. 또한, 두 세포의 미세구조적인 분석을 위하여 SEM과 TEM을 사용하였다. Dynamin II는 NIH3T3 (ras) 세포에서 발현이 증가 하였으며, NIH3T3 세포에 비하여 좀더 방추형이 었으며, 작은 세포질 돌기가 세포막을 따라 다수 신장되어있음이 관찰되었다. 또한, NIH3T3 (ras) 세포의 endocytotic vesicle이 형성되는 부위에서 dynamin II의 발현이 증가하였다. 이러한 결과로 dynamin II는 ras신호전달체계의한 신호전달분자로서 작용을 할 것으로 사료된다.

미국의 국립보건연구원

  • 김헌규
    • 과학과기술
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    • 제2권3호통권7호
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    • pp.65-70
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    • 1969
  • 1.NIH의 사명 2.NIH의 역사 3.NIH의 행정기구 4.직속의학연구소 개황 5.해외보건연구협조처

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