본 연구에서는 미나리 에탄올 추출물 및 그 분획물의 항염증 효과를 알아보기 위해서 LPS에 의해 염증반응이 유도된 RAW 264.7 세포에 대해 추출물이 미치는 항염증 효과를 살펴보았다. 미나리 에탄올 추출물은 nuclear factor-${\kappa}B$ ($NF-{\kappa}B$)의 활성을 억제함으로써 iNOS와 COX-2의 단백질 발현을 감소시켰고, 결과적으로 NO 생성을 억제하였다. 또한, 미나리 에탄올 추출물의 헥산, 부탄올, 에틸아세테이트 그리고 메틸렌클로라이드 분획물을 처리했을 때 에틸아세테이트와 메틸렌 클로라이드 분획물 전처리 실험군에서 LPS에 의해 유도된 NO의 형성이 현저히 감소함을 확인할 수 있었다. 그중 미나리 에틸아세테이트 분획물은 iNOS와 COX-2의 단백질 발현량 및 전염증성 사이토카인을 현저히 감소시킴에 따라 우수한 항염증 효과를 확인하였다. 따라서 본 연구 결과는 미나리 에탄올 추출물, 그 분획물 중 에틸아세테이트 분획물이 염증을 완화시키는 유효성분이 많은 것을 규명하였고 향후 에틸아세테이트 분획물에서 어떠한 유효성분이 있는 지에 대해 추후 실험이 필요할 것으로 보인다. 또한, 이러한 항염증 효능을 규명함으로써 향후 기능성 식품 소재로의 이용 가능성을 제시한다.
Objectives : The current study is to evaluate the hepatoprotective effect of youngyanggak-san (YGS) on thioacetamide (TAA)-induced acute liver injury in rats. Methods : YGS is composed of Glycyrrhizae Radix, Asiasari Radix, Cimicifugae Rhizoma, Saigae Tataricae Cornu. While N-YGS (non-youngyanggak-san) doesn't include Saigae Tataricae Cornu. Two samples were administrated TAA together for 3 days. Thirty-six rats were divided into four groups. Rats except for the normal group were received TAA (200 mg/kg of body weight, I.P) were divided into three groups (n=9/group) : Group 1 (TAA only), Group 2 (TAA + 200 mg/kg YGS) and Group 3 (TAA + 200 mg/kg N-YGS). Acute liver damage confirmed using histological examination, The factors associated with oxidative stress and liver function activity measured in serum. Also, expressions of inflammation related proteins were investigated by western blot analysis. Results : Oxidative stress factors such as ROS and $ONOO^-$ in the Group 2 was manifested by a significant rise compared with Group 1. YGS markedly decreased the elevated ROS and $ONOO^-$. Furthermore, YGS significantly reduced the levels of serum alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) The nuclear $factor-{\kappa}B$ ($NF-{\kappa}B$) activation induced by TAA led to increase both inflammatory mediators and cytokines. While YGS administration remarkably suppressed such the overexpression. In addition, the histopathological analysis showed that the liver tissue lesions were improved obviously in YGS treatment. Conclusion : YGS provided a hepatoprotective effect on acute liver damage through the suppression of oxidative stress. Especially, this effect enhanced markedly when Saigae Tataricae Cornu is included.
Kim, Sung-Ryoul;Kwak, Jae-Woo;Lee, Sung-Ka;Jung, Seung-Gon;Han, Man-Seung;Kim, Bang-Sin;Kook, Min-Suk;Oh, Hee-Kyun;Park, Hong-Ju
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제38권1호
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pp.14-19
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2012
Introduction: This study was conducted to evaluate ssrA expression resulting from adaptation of Escherichia coli (E. coli) to oral pathogens through signal exchange. Materials and Methods: Human cell lines Hep2 and HT29, wild-type E. coli (WT K-12), ssrA knock-out E. coli (${\Delta}K$-12), and Scleropages aureus (S. aureus) were used. A single culture consisting of Hep2, HT29, WT K-12, and ${\Delta}K$-12, and mixed cultures consisting of Hep2 and WT K-12, Hep2 and ${\Delta}K$-12, WT K-12 and S. aureus, ${\Delta}K$-12 and S. aureus, and Hep2, WT K-12, and S. aureus were prepared. For HT29, a mixed culture was prepared with WT K-12 and with WT K-12 and S. aureus. Total RNA was extracted from each culture with the resulting expression of ssrA, nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells (NF-${\kappa}B$), and p53 was evaluated by Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). Results: The expression of ssrA in a single culture of WT K-12 was lower than that observed in the mixed culture of WT K-12 with S. aureus. Greater ssrA expression was observed in the mixed culture of WT K-12 with Hep2 than in the single culture of WT K-12. The expression of NF-${\kappa}B$ was higher in the mixed culture of Hep2 with ${\Delta}K$-12 than that in the mixed culture of Hep2 with WT K-12, and was lowest in the single culture of Hep2. The expression of ssrA was higher in the mixed culture of WT K-12 with Hep2 and S. aureus than in the mixed culture of WT K-12 with Hep2. Conclusion: These results suggest that ssrA plays an important role in the mechanism of E. coli adaptation to a new environment.
본 연구에서는 염생식물인 칠면초와 세발나물의 인슐린 저항성을 개선하는 효과를 조사하였다. 본 실험에 사용한 OLETF쥐는 CCK-1 수용체의 결함으로 인해 인슐린 저항성을 걸쳐 제 2형 당뇨병이 유발되는데, 인슐린 저항성이 진행되는 10주령부터 28주령이 될 때까지 칠면초와 세발나물을 18주 동안 섭취시켰다. 염생식물식이군들의 체중이나 공복혈당 변화는 식이기간 동안 전반적으로 대조군과 유의적인 차이를 보이지 않았다. Oral glucose tolerance test에서 염생식물 섭취가 당 내성을 개선하는 효과를 보였으나 그 혈당 변화를 면적으로 환산하였을 때 각 식이군들 간의 유의적인 차이는 관찰되지 않았다. 혈중 insulin 및 HbA1c 수치는 유의하게 낮은 수치를 보였으며, adiponectin 수치는 높고 leptin과 ghrelin 수치는 낮았으나 현저한 차이는 관찰되지 않았다. 세발나물식이군의 혈중 중성지질과 총 cholesterol 수치는 대조군에 비해 유의적으로 더 낮았다. 혈중 지질산화물 함량은 각 식이군 간 유의차가 관찰되지 않았으나 염생식물식이군에서 더 낮은 경향을 보였으며, NF-${\kappa}B$ p65는 지방조직에서 유의적으로 낮은 발현량을 보였다. 또한 두 염생식물식이군에서 인슐린 신호전달의 negative regulator인 $pIRS1^{Ser307}$의 발현량은 대조군에 비해 더 낮음을 확인하였다. 그러므로 칠면초와 세발나물은 생후 성장하면서 인슐린 저항성이 생기는 OLETF쥐의 인슐린 저항성을 현저하게 줄여주지는 못하였으나 그 개선 효과는 있는 것으로 시사되며, 두 염생식물의 급여 기간을 늘려 제 2형 당뇨병을 예방하는 효과에 대한 섬세한 검토가 보완되어야 할 것으로 사료된다.
밀배아유가 LPS로 자극된 대식세포에서 염증과 관련된 인자들에 미치는 영향을 살펴보기 위해, NO 및 전염증성 cytokine의 분비량과 iNOS 및 COX-2의 발현량, NF-κB p65와 MAPKs 활성화를 확인하였다. 또한 ICR 마우스를 이용하여 croton oil로 유도된 귀부종을 통해 귀두께 변화 및 귀조직을 관찰하였다. 그 결과, 밀배아유는 LPS로 인해 증가된 NO 및 전염증성 cytokine의 분비량을 감소시켰으며, 특히, IL-6와 TNF-α는 100 μg/ml 농도에서 90% 이상의 분비 억제효과를 나타내었다. LPS에 의해 증가된 iNOS와 COX-2의 발현은 100 μg/ml 농도로 밀배아유 처리시 발현 억제가 가장 크게 나타났으며, NF-κB p65의 발현도 밀배아유 농도가 증가함에 따라 발현 억제효과를 나타내었으며, 100 μg/ml 농도로 처리 시 억제 효과가 가장 컸다. 밀배아유는 MAPKs의 인산화를 억제시켰으며, 특히, ERK와 JNK의 인산화 억제가 농도 의존적으로 크게 효과를 나타내었다. 또한, 밀배아유는 croton oil로 유도된 귀부종에서 귀두께를 감소시켰으며, 경피와 진피의 두께 및 진피에 침윤된 비만세포의 수도 감소시킴을 확인하였다. 이상으로, 밀배아유는 NF-κB 및 MAPKs의 신호 경로 조절을 통한 염증성 매개 인자들의 발현 감소로 항염증 효과를 나타냄을 확인하여, 천연 항염증 소재로서 활용도가 가능함을 시사한다.
본 연구에서는 참콩풍뎅이(Popillia flavosellata) 에탄올 추출물(PFE)의 항염증 효능을 분석하기 위해 PFE를 농도별(500, 1,000, 2,000 μg/ml)로 대식세포인 RAW 264.7에 처리 시 최고 처리농도인 2,000 μg/ml까지 통계적인 유의성 있는 독성이 없음을 확인하였다. LPS (100 ng/ml)로 염증 유도된 RAW 264.7 세포에 PFE를 농도별(500, 1,000, 2,000 μg/ml)로 동시 처리 시 농도 의존적으로 염증성사이토카인인 TNF-α와 IL-6의 단백질 생성을 통계적인 유의성(p<0.001)있게 억제함을 확인하였다. 또한 염증 유도된 RAW 264.7 세포에 PFE 동시 처리 시 NF-κB p65의 핵으로 이동이 차단됨과 iNOS와 COX-2의 단백질 발현을 감소시키는 것을 확인하였다. 이상의 연구결과를 통해 참콩 풍뎅이는 염증에 의해 활성화된 TLR-4 신호전달과정을 조절하는 NF-κB p65의 활성과 염증성사이토카인 TNF-α와 IL-6의 생성 및 염증성효소 iNOS와 COX-2의 생성을 억제하는 항염증 효능이 있음을 확인하였다.
Objectives: Myrrh have been used as a traditional remedy to treat infectious and inflammatory diseases. However, it is largely unknown whether myrrh ethanol extract could exhibit the inhibitory activities against particulate matter (PM)-induced skin injury on human keratinocytes, HaCaT cells. Therefore, this study was aimed to investigate the inhibitory activity of myrrh ethanol extract on PM-induced skin injury in HaCaT cells. Methods: To investigate the inhibitory effects of myrrh ethanol extract in HaCaT cells, the skin injury model of HaCaT cells was established under PM treatment. HaCaT keratinocyte cells were pre-treated with myrrh ethanol extract for 1 h, and then stimulated with PM. Then, the cells were harvested to measure the cell viability, reactive oxygen species (ROS), pro-inflammatory cytokines including interleukin (IL) 1-beta, IL-6, and tumor necrosis factor (TNF)-𝛼, hyaluronidase, collagen, MMPs. In addition, we examined the mitogen activated protein kinases (MAPKs) and inhibitory kappa B alpha (I𝜅-B𝛼) as inhibitory mechanisms of myrrh ethanol extract. Results: The treatment of myrrh ethanol extract inhibited the PM-induced cell death and ROS production in HaCaT cells. In addition, myrrh ethanol extract treatment inhibited the PM-induced elevation of IL-1beta, IL-6, and TNF-𝛼. Also, myrrh ethanol extract treatment inhibited the increase of hyaluronidase, MMP and decrease of collagen. Furthermore, myrrh ethanol extract treatment inhibited the activation of MAPKs and the degradation of I𝜅-B𝛼. Conclusions: Our result suggest that treatment of myrrh ethanol extract could inhibit the PM-induced skin injury via deactivation of MAPKs and nuclear factor (NF)-𝜅B in HaCaT cells. This study could suggest that myrrh ethanol extract could be a beneficial agent to prevent skin damage or inflammation.
본 연구에서는 Euptelea pleiosperma 에탄올 추출물(EPEE)의 항산화능과 항염증 생리활성을 in vitro assay system 및 cell culture model system을 이용하여 분석하였다. 먼저 EPEE의 항산화능을 DPPH radical scavenging activity로 분석한 결과 radical 소거능의 정도가 양성 대조군으로 사용한 ascorbic acid 보다 높은 활성을 보여 매우 강한 항산화능을 보유함을 확인하였다. 또한 RAW 264.7 세포주를 이용한 $H_2O_2$ 및 LPS의 유도에 의해 생성된 ROS에 대한 소거능을 분석한 결과에서도 농도의존적인 강한 소거능을 보였다. 뿐만 아니라 대표적인 항산화효소 중 하나로 천연물에 의한 항산화능 활성에 의해 주로 발현이 유도되는 hemeoxygenase 1 (HO-1) 및 그 전사 인자인 nuclear factor-E2-related factor 2 (Nrf2)의 단백질 발현이 EPEE의 처리에 의해 유의적으로 증가됨을 보였으며 이러한 HO-1 및 Nrf2의 발현 변화는 상위신호전달계인 MAPKs 및 PI3K/Akt 에 의해 조절될 가능성을 보였다. 한편 EPEE가 LPS에 의해 유도된 NO 생성에 미치는 영향을 분석한 결과 농도의존적인 NO 생성 저해능을 보였으며 이는 NO 생성 단백질인 iNOS의 발현 저해에서 기인함을 확인하였다. 이와 같은 EPEE의 NO 생성 억제 효과는 염증 상위신호전달계인 NF-${\kappa}B$ 및 AP-1의 조절을 통해 일어날 가능성을 보였다. 이러한 결과를 통해 EPEE의 높은 항산화능과 항염증 활성을 처음으로 확인하였으며 향후 기능성 소재로서 유용하게 활용될 수 있을 것으로 판단된다.
본 연구에서는 진피-황금 혼합물 (CS)이 급성 역류성 식도염에 미치는 식도 점막 보호 효과를 평가하기 위하여 CS를 경구투여한 후 수술을 통해 역류성 식도염을 유발하였으며, 실험 종료 후 혈액 채취 및 식도 조직을 적출하였다. 동물에게서 적출한 식도 점막의 손상 정도를 육안으로 확인한 결과 CS투여군에서 식도 점막의 손상이 유의하게 감소하였으며, H&E staining을 통해 관찰한 결과 마찬가지로 CS투여군에서 식도 상피의 탈락 및 염증세포의 침윤이 현저하게 감소한 것을 확인하였다. 혈액을 이용하여 역류성 식도염의 원인으로 유효하다고 알려진 ROS의 수치를 확인한 결과, CS투여군에서 ROS 수치가 유의적으로 감소하였으며, western blotting을 통해 NADPH oxidase인 NOX4, p47phox, p22phox의 발현을 확인한 결과, 마찬가지로 CS 투여군에서 유의하게 감소하였고, 특히 CS200투여군에서 Normal군과 비슷한 수치를 나타냈다. 또한, CS투여는 염증성 단백질인 MAPK와 NF-κB 경로를 유의적으로 억제하였을 뿐 아니라 tight junction 단백질인 claudin-1과 claudin-4의 발현을 유의하게 조절한 것을 확인하였다. 이상의 결과를 종합해보면 진피-황금 추출물은 산화적 스트레스를 억제함으로써 염증성 단백질의 발현을 조절할 뿐 아니라 tight junction 단백질의 발현을 조절하여 식도 점막을 보호하는 것으로 판단되나 역류성 식도염은 음식물의 섭취와 밀접한 관련이 있는 만큼 추후 동물의 식이 섭취량을 조사하는 등 세부적인 추가 연구가 필요할 것으로 보인다.
Objectives : The aim of this study was to investigate whether the extract of Coptidis Rhizoma inhibits inflammation in chronic cold stress (CCS)-exposed mice or not. Methods : Coptidis Rhizoma extract (CRE) was made by reflux with distilled water. Male ICR mice (7 weeks old) were divided randomly into 5 groups: (1) control, (2) CCS, (3) CCS+CRE 100 mg/kg, (4) CCS+CRE 300 mg/kg, (5) CCS+CRE 1,000 mg/kg groups. Mice were orally administered once a day for 14 days starting from 1 day before CCS. Group (2)-(5) were exposed to CCS conditions that maintained at $4^{\circ}C$ for 2 h once a day for 14 days. The levels of serum cortisol and hypothalamic prostaglandin E1 (PGE1) and PGE2 were measured by enzyme-linked immunosorbent assay kit. The expression levels of several pro-inflammatory factors like heat shock protein 70 (HSP70), c-fos, and nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells (NF-kB) were measured by western blot analysis in mouse hypothalamus. Results : Oral administration of CRE 1,000 mg/kg significantly suppressed the increase of serum cortisol levels in mice exposed to CCS. CCS-exposed mice had significantly increased the expression of HSP70, c-fos, and NF-kB in hypothalamus, while CRE treatment significantly attenuated the elevation of these pro-inflammatory factors. The ratio of PGE2/PGE1 was also higher in CCS-exposed mice than control group. CRE treatment significantly reduced the increase of PGE2/PGE1 ratio induced by CCS. Conclusion : These findings suggest that Coptidis Rhizoma may work as a potential agent to modulate inflammatory responses under the condition of cold adaptation formed by CCS.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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