연초 N. glauoa(2n=24)와 N. langsdorffii(2n=18)의 종간상 호교잡에 의하여 종간잡종을 획득하였다. N. glauca $\times$ N. langsdorffii 교잡에서는 100%의 F$_1$ 종자를 획득할 수 있었으나, N. langsdorffii $\times$ N. glauca교잡에서는 종자결실이 극히 불량하였다. 그러나 종자 발아율은 모두 양호하였으며, 정상 식물체로 생장하였다. F$_1$식물체의 chromosome수를 조사한 결과 모두 2n=21개로 종간잡종임이 확인되었으며, 엽병의 존재여부 및 형태, 잎의 형태, 꽃잎의 형태와 색깔 및 크기, 화분의 색깔 등의 형태적 특성을 조사한 결과 모두 종간잡 종임을 재차 확인 할 수 있었다. F$_1$잡종식물체에서는 spontaneous tumor인 genetic tumor가 형성되었으며, N. glauca을 모본으로 한 교잡체에서는 생식생장기부터 형성되었고, N. langsdorffii을 모본으로 한 잡종체에서는 생식생장기 이후에만 형성되었다. 특히 genetic tumor 조직을 기내에서 식물호르몬 무첨가 배지에서 배양할 경우 생장이 매우 왕성하였으며 많은 teratoma shoot를 형성하였다. 또한 genetic tumor 조직이 아닌 일반 F$_1$식물체의 잎과 줄기절편도 식물호르몬 무첨가 배지에 접종되었을 때에도 15일경부터 callus가 왕성히 형성되었으며, 30일경부터는 수많은 teratoma shoot가 형성되었다. 식물호르몬 무첨가배지에서 잡종체의 teratoma shoot 형성은 N. langsdorffii $\times$ N. glauca 보다 N. glauca $\times$ N. langsdorffii가 더 양호한 경향을 보였다. Teratoma shoot 중에서는 뿌리는 가지고 있지 않지만 지상부가 정상적으로 자란 shoot를 절취하여 다시 조직배양 할 경우에는 영양생장기에 배양잡종식물체에서 많은 genetic tumor가 형성되었다.
The physiological effects of elevated $CO_2$ concentration and temperature were examined for Quercus gilva and Q. glauca grown under control (ambient $CO_2$ and temperature) and treatment (elevated $CO_2$ and temperature) conditions for 39 months. The objective of the study was to measure the long-term responses, in physiological parameters, of two oaks species exposed to elevated $CO_2$ and temperature. The photosynthetic rate of Q. gilva was found to be decreased, but that of Q. glauca was not significantly affected, after long-term exposure to elevated $CO_2$ and temperature. Stomatal conductance of Q. glauca was reduced by 21.7%, but that of Q. gilva was not significantly affected, by long-term exposure to $CO_2$ and temperature. However, the transpiration rate of the two oak species decreased. Water use efficiency of Q. gilva was not significantly affected by elevated $CO_2$ and temperature, while that of Q. glauca was increased by 56.6%. The leaves of Q. gilva grown under treatment conditions had an increased C:N ratio due to their reduced nitrogen content, while those of Q. glauca were not significantly affected by long-term exposure to elevated $CO_2$ and temperature. These results suggest that the long-term responses to elevated $CO_2$ and temperature between Q. gilva and Q. glauca are different, and that Q. gilva, the endangered species, is more sensitive to elevated $CO_2$ and temperature than Q. glauca.
Leaf mesophy11 protoplast cultures from six Nicotiana species, N. debneyi, N. rustica, N. amplexicaulis, N. glauca, N. glutinosa, and N. sylvestris were carried out. When we reduced the NH4NO3 and Fe.EDTA concentration to 1/3(7 mM) and 1/10(10$\mu$M) from the Murashige and Skoog medium respectively, cell division of the protoplasts was efficiently induced in four Nicotiana species, N. debneyi, N. rustica, N. amplexicaulis and N. glauca. However, other two species, N. glutinosa and N. sylvestris were failed in inducing cell division at the same culture condition. The protoclone calluses derived from four Nicotiana species were consequently regenerated on a MS basal medium supplemented with the appropriate auxin and cytokinin.
기능성 느타리버섯 재배를 위하여 국내에서 자생하는 감태나무의 적정 첨가량을 구명하기 위하여 실험을 실시하였다. 감태나무 톱밥의 수분함량은 6.8%였고, pH는 6.0이였다. 총질소함량은 0.16%였고, 총탄소함량은 40.9%였으며, C/N율은 215이었다. 혼합배지의 pH는 4.8~5.0이였으며, 총질소함량은 2.8~3.0%로 처리간에 뚜렷한 차이가 없었다. 무기성분인 $P_2O_5$, CaO, MgO, $Na_2O$ 함량은 감태나무 톱밥의 첨가비율이 높아질수록 증가하였지만, $K_2O$ 함량은 뚜렷한 차이를 보이지 않았다. 느타리버섯 균사 생육은 감태나무 톱밥 첨가시 오히려 빨랐으며, 자실체의 수량은 감태나무 톱밥 20%첨가시에 $163g/850m{\ell}$로 가장 높았다. 갓의 크기와 두께는 감태나무 톱밥의 첨가비율이 높아질수록 증가하였고, 대의 굵기와 길이도 증가하였다. 대의 경도는 처리간에 뚜렷한 차이를 보이지 않았지만, 갓의 경도는 감태나무 톱밥의 첨가량이 증가할수록 높은 경향을 보였다. 수확기 갓의 색도를 측정한 결과 L값은 감태나무 톱밥 10% 첨가시 가장 높았으며, 첨가비율이 높을수록 낮아지는 경향을 보였지만, a, b값은 처리간에 뚜렷한 차이가 없었다.
Chipped stem wood from Lindera glauca was extracted repeatedly with 80% aqueous methanol at room temperature, and the concentrated methanolic extract was successively partitioned with ethyl acetate (EtOAc), n-butyl alcohol, and $H_2O$. From the EtOAc fraction, four sterols were isolated through a repeated silica gel and octadecyl silica gel column chromatography. The chemical structures of the sterols were elucidated as ${\beta}$-sitosterol (1), 7-ketositosterol (2), 7${\beta}$-hydroxysitosterol (3), and daucosterol (4). Among them, compounds 2 and 3 were isolated for the first time from the stem woods of this plant.
연초 crown gall tumor와 genetic tumor의 형성시 형태적 특성과 조직배양시 식물호르몬에 대한 반응을 조사하였다. Crown gall tumor는 A. tumefaciens C58을 감염시켜 형질전환된 tumor조직으로부터 획득하였으며, genetic tumor는 N. glauca (2n=24)와 N. langsdorffii (2n=18)의 종간교배에 의하여 유기된 잡종식물체에서 자발적으로 발생한 tumor조직으로부터 획득하였다. 형성된 crown gall tumor, genetic tumor및 teratoma shoot의 형태적 특성은 매우 비슷하였으며, 식물조직배양시 식물호르몬이 전혀 첨가되지 않은 기본배지에서 생장이 왕성하였다. Crown gall tumor는 식물호르몬 무첨가배지에서 전형적인 tumor callus가 형성되었으며 teratoma shoot도 형성되었다. 반면에 genetic tumor는 2,4-D 0.5mg/L 첨가된 배지에서 tumor callus가 형성되었으며, 식물호르몬 무첨가배지에서는 많은 teratoma shoot가 형성되어 식물호르몬의 조절에 의해서 phenotype을 거의 비슷하게 할 수 있었다. Genetic tumor는 재분화시 정상적인 식물체보다는 뿌리를 갖지 못하는 teratoma shoots가 형성되는데 외부에서 인위적으로 식물호르몬인 IAA와 GA, 그리고 active carbon을 첨가하여 완전한 식물체를 생산하는 데는 실패하였다. 그러나 간혹 식물호르몬 무첨가배지에서 뿌리를 갖는 정상식물체로 생장하는 shoot가 형성되었는데 이런 식물체에서도 생장하면서 줄기부분에서 다시 genetic tumor가 형성되었으며, 잎절편을 다시 식물호르몬 무첨가배지에 접종할 경우에도 teratoma shoots를 형성하였다.
담배(N. glauca) 잎 절편 유래 callus 배양에 있어서 callus 생장 단계에 따라 nicotine 생성에 미치는 두 가지 auxin (2,4-D와 NAA)의 영향을 HPLC를 이용하여 조사하였다. 고농도($11.5\;\mu\textrm{M}$)의 2,4-D는 배양 4주째에, NAA는 배양 2주째에 nicotine 생성을 촉진시켜 최대함량을 나타내었고, 그 이후로는 감소하였다. 새성된 nicotine이 다른 alkaloid로 전환되었다. 한편, 전구물질로 알려진 L-arginine 또는 L-aspartic acid 첨가배양에서 저농도($1.5\;\mu\textrm{M}$)의 2,4-D는 고농도에 비해 nicotine 생성을 촉진시켰고, 저농도의 NAA는 고농도에 비해 억제시켰다. 그러나 L-aspartic acid 첨가배양에서 저농도의 NAA는 배양 5주까지 nicotine 생성을 촉진시켰다. 이와 같은 결과로부터 두 가지 auxin은 nicotine 생성에 대해 효과가 다르며, L-aspartic acid가 nicotine 생합성의 전구물질로서, 저농도의 NAA는 이 합성경로에 작용하여 nicotine 생성을 유도하였음을 추론할 수 있었다.
It remains to be determined whether there is a geographical distribution pattern and phylogenetic signals for the Mycena strains with seed germination of the orchid plant Gastrodia elata. This study analyzed the community composition and phylogenetics of 72 Mycena strains associated with G. elata varieties (G. elata. f. glauca and G. elata. f. viridis) using multiple gene fragments (ITS+nLSU+SSU). We found that (1) these diverse Mycena phylogenetically belong to the Basidiospore amyloid group. (2) There is a phylogenetic signal of Mycena for germination of G. elata. Those strains phylogenetically close to M. abramsii, M. polygramma, and an unclassified Mycena had significantly higher germination rates than those to M. citrinomarginata. (3) The Mycena distribution depends on geographic site and G. elata variety. Both unclassified Mycena group 1 and the M. abramsii group were dominant for the two varieties of G. elata; in contrast, the M. citrinomarginata group was dominant in G. elata f. glauca but absent in G. elata f. viridis. Our results indicate that the community composition of numerous Mycena resources in the Zhaotong area varies by geographical location and G. elata variety. Importantly, our results also indicate that Mycena's phylogenetic status is correlated with its germination rate.
A Korean isolate of Pepper mild mottle virus (PMMoV-Kr) was isolated from a diseased pepper crop in Chunchon, Korea. The isolate was biologically purified on Nicoticaa tabacum cv. Xanthi-nc by successive single local transfer steps, and propagated on N. tabacum cv. Samsun. PMMoV-Kr could systemically infect on N. glauca, N. benthmiana, N. occidentalis and Lycopersicon esculentum, which is typical of known isolates of PMMoV. PMMoV-Kr belongs to the pathotype P1,2 based on pepper-tobamoviral indicator experiments; Capsicn chinone harboring L3 gene revealed resistant (necrotic local lesion on inoculated leaf, HR) whereas L+, L1 and L2 pepper plants expressed susceptible reactions of mosaic systemic symptoms for the isolate. To confirm the pathology and delineate symptom determinant of the isolate, full-length cDNAs of PMMoV-Kr were amplified by RT-PCR with a primer set corresponding to the 5'- and 3'-ends of PMMoV. The RT-PCR molecules amplified from genome RNA of the isolate was cloned into the pUC18 vector. Full-length cDNA clones constructed under the control of the T7 RNA promoter could be successfully transcribed to produce in vitro transcript RNA. Infectivity of the capped transcripts and its progeny virus was verified by Western blot and RT-PCR analyses.
Genus Nicotiana has 76 species including N. tabacum. These plants are used not only as a material for cigarette manufacturing but also as ornamental plant, medicinal plant, poisonous substance plant, and bug repellent plant. N. tabacum is used as a main material for cigarette manufacturing with N. rustica. N. sylvestris and N. alata is used as ornamental plants because of their beautiful flowers and N. rustica is used for bug repellent or pesticide because of its high concentration of nicotine. N. glauca, a tree tobacco, is used for bio-fuel production. N. tabacum is used as a popular model plant system for degeneration, regeneration, and transformation. N. benthamiana is also used as a model system for foreign gene expression by agroinfiltration. The transformation ability of tobacco plant is a good target for molecular farming. Hepatitis B virus envelop protein, E. coli heat-labile enterotoxin, diabetes autoantigen, and cholera toxin B subunit were produced using tobacco plants. Secondary metabolites of tobacco include nicotine, anabasine, nornicotine, anatabine, cembranoid, solanesol, linoleic acid, rutin, lignin and sistosterol, and they are used for various medicine productions which cannot be produced by organic synthesis for their complicated structures. In conclusion, we have to understand the applicability of tobacco plant in detail and study to enlarge the usage of the plants.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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