Martinec, Jan;Feltl, Tomas;Nokhrina, Katerina;Zazimalova, Eva;Machackova, Ivana
식물조직배양학회지
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제27권5호
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pp.375-377
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2000
It is now generally accepted that a phosphoinositide cycle is involved in the transduction of a variety of signals in plant cells. In animal cells, the hydrolysis of phosphatidyl-4,5-bisphosphate catalysed by phosphatidylinositol - specific phospholipase C yields to D-myo-inositol - 1,4,5-trisphosphate and diacylglycerol, which are well known second messengers. The binding of InsP$_3$to a receptor located on the endoplasmic reticulum triggers a calcium release from the endoplasmic reticulum. We have detected and partially characterised key components of phosphoinositide signaling. First, tobacco microsomal fraction and plasma membrane PI-PLC. Consecutively, using a radioligand binding assay we have identified a $Ca^{2+}$ -dependent high affinity InsP$_3$binding site in microsomal membrane fraction vesicle preparation and then we have measured inositol-1,4,5-trisphosphate induced calcium release from tobacco microsomal fraction. These findings suggest that phosphoinositide signaling system is present and operates in the tobacco suspension culture.e.
Skeletal muscle regeneration is a highly orchestrated process initiated by activation of adult muscle satellite cells. Upon muscle injury, the inflammatory process is always accompanied by muscle regeneration. Leukotriene $B_4$ is one of the essential inflammatory mediators. We isolated and cultured primary satellite cells. RT-PCR showed that myoblasts expressed mRNA for $LTB_4$ receptors BLT1 and BLT2, and $LTB_4$ promoted myoblast proliferation and fusion. Quantitative real-time PCR and immunoblotting showed that $LTB_4$ treatment expedited the expression process of differentiation markers MyoD and M-cadherin. U-75302, a specific BLT1 inhibitor, but not LY2552833, a specific BLT2 inhibitor, blocked proliferation and differentiation of myoblasts induced by $LTB_4$, which implies the involvement of the BLT1 pathway. Overall, the data suggest that $LTB_4$ contributes to muscle regeneration by accelerating proliferation and differentiation of satellite cells.
조피볼락용 실험 대조사료에 적합한 비타민 혼합물을 검토하기 위해, 평균체중 4.25 g의 치어를 대상으로 실험 사료마다 3반복으로 사육 실험하여 성장효과 및 체성분 변화를 조사하였다. 실험사료는 단백질원으로 casein과 탈지 북양어분을, 탄수화물원으로 a 및 b형 감자전분을, 지질원으로 EPA와 DHA가 $85\%$ 함유된 정제유와 corn oil을 사용하여 기본사료를 제조하였다. 기본사료에 첨가될 vitamin 혼합물은 모두 4종류를 준비하였는데 premix-1에 첨가한 혼합물은 Halver (1957)가 제안한 처방 수준으로, premix-2에는 수산청 (1995)에서 제시한 수준으로, premix-3은 다른 어종들을 대상으로 연구된 결과 (NRC, 1983, 1993 ; Halver, 1972)를 토대로 요구량이 대부분의 어종에 충족되도록, premix-4는 각각의 비타민이 몇몇 어종의 최소요구량에 가깝도록 배합하여 준비하였다. 10주간 사육 실험한 결과, premix-1이 첨가된 실험구가 다른 실험구보다 증중율, 사료효율 및 영양소 축적율이 유의적으로 높았고(P<0.05), 그 외 세 실험구들은 서로 비슷한 결과를 보였다. 근육 및 전어체의 일반성분, 간의 지질 함량 및 간 조직 성상은 사료의 비타민 혼합물에 특별한 영향을 받지 않았다. 본 실험의 결과로부터, pre-mix-1에 배합된 비타민 혼합물은 필수영양소의 요구량을 구명할 때 대조구(positive control diet)에 사용될 수 있을 것으로 기대된다.
Han, Yunfei;Guo, Wenrui;Su, Rina;Zhang, Yanni;Yang, Le;Borjigin, Gerelt;Duan, Yan
Animal Bioscience
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제35권4호
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pp.614-623
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2022
Objective: The objective of this study was to investigate the effects of sheep slaughter age on myogenic characteristics in skeletal muscle satellite cells (SMSCs). Methods: Primary SMSCs were isolated from hind leg biceps femoris muscles of Wurank lambs (slaughtered at three months, Mth-3) and adults (slaughtered at fifteen months, Mth-15). SMSCs were selected by morphological observation and fluorescence staining. Myogenic regulatory factors (MRF) and myosin heavy chain (MyHC) expressions of SMSCs were analyzed on days 1, 3, 4, and 5. Results: The expressions of myogenic factor 5 (Myf5), myogenic differentiation (MyoD), Myf6, and myogenin (MyoG) in Mth-15 were significantly higher in Mth-15 than in Mth-3 on days 1, 3, and 4 (p<0.05). However, MyoG expression in Mth-15 was significantly lower than in Mth-3 on day 5 (p<0.05). The expressions of MyHC I, MyHC IIa, and MyHC IIx in Mth-15 were significantly higher than in Mth-3 on days 1 and 3 (p<0.05), and MyHC IIb were significantly lower than in Mth-3 on days 3 and 4 (p<0.05). In contrast, the expression of MyHC IIx in Mth-15 was significantly lower and MyHC IIb was significantly higher than in Mth-3 on days 5 (p<0.05). Conclusion: The slaughter age altered the expression of MRFs and MyHCs in SMSCs while differentiation, which caused the variation of myogenic characteristics, and thus may affect the meat quality of Wurank sheep.
A novel inhibitor against maltose-producing a-amylase was prepared via stepwise degradation of a high molecular weight acarbose (HMWA) using Thermus maltogenic amylase (ThMA). The structure of the purified inhibitor was determined to be ${\alpha}$-D-glucopyranosyl-${\alpha}$-acarviosinyl-D-glucopyranose (GlcAcvGlc). Progress curves of p-nitrophenyl-${\alpha}$-D-maltoside (PNPG2) hydrolysis by various amylolytic enzymes, including maltogenase (MGase), ThMA, and cyclodextrinase(CDase) I-5, in the presence of acarbose or GlcAcvGlc indicated a slow-binding mode of inhibition. The inhibition potency of GlcAcvGlc for MGase, ThMA, and CDase I-5 was 3 orders of magnitude higher than that of acarbose.
Skeletal myogenesis is essential to keep muscle mass and integrity, and impaired myogenesis is closely related to the etiology of muscle wasting. Recently, miR-141-3p has been shown to be induced under various conditions associated with muscle wasting, such as aging, oxidative stress, and mitochondrial dysfunction. However, the functional significance and mechanism of miR-141-3p in myogenic differentiation have not been explored to date. In this study, we investigated the roles of miR-141-3p on CFL2 expression, proliferation, and myogenic differentiation in C2C12 myoblasts. MiR-141-3p appeared to target the 3'UTR of CFL2 directly and suppressed the expression of CFL2, an essential factor for actin filament (F-actin) dynamics. Transfection of miR-141-3p mimic in myoblasts increased F-actin formation and augmented nuclear Yes-associated protein (YAP), a key component of mechanotransduction. Furthermore, miR-141-3p mimic increased myoblast proliferation and promoted cell cycle progression throughout the S and G2/M phases. Consequently, miR-141-3p mimic led to significant suppressions of myogenic factors expression, such as MyoD, MyoG, and MyHC, and hindered the myogenic differentiation of myoblasts. Thus, this study reveals the crucial role of miR-141-3p in myogenic differentiation via CFL2-YAP-mediated mechanotransduction and provides implications of miRNA-mediated myogenic regulation in skeletal muscle homeostasis.
Actin dynamics play an essential role in myogenesis through multiple mechanisms, such as mechanotransduction, cell proliferation, and myogenic differentiation. Twinfilin-1 (TWF1), an actin-depolymerizing protein, is known to be required for the myogenic differentiation of progenitor cells. However, the mechanisms by which they epigenetically regulate TWF1 by microRNAs under muscle wasting conditions related to obesity are almost unknown. Here, we investigated the role of miR-103-3p in TWF1 expression, actin filament modulation, proliferation, and myogenic differentiation of progenitor cells. Palmitic acid, the most abundant saturated fatty acid (SFA) in the diet, reduced TWF1 expression and impeded myogenic differentiation of C2C12 myoblasts, while elevating miR-103-3p levels in myoblasts. Interestingly, miR-103-3p inhibited TWF1 expression by directly targeting its 3'UTR. Furthermore, ectopic expression of miR-103-3p reduced the expression of myogenic factors, i.e., MyoD and MyoG, and subsequently impaired myoblast differentiation. We demonstrated that miR-103-3p induction increased filamentous actin (F-actin) and facilitated the nuclear translocation of Yes-associated protein 1 (YAP1), thereby stimulating cell cycle progression and cell proliferation. Hence, this study suggests that epigenetic suppression of TWF1 by SFA-inducible miR-103-3p impairs myogenesis by enhancing the cell proliferation triggered by F-actin/YAP1.
Myo-inositol monophosphate phosphatase (IMPP) is a key enzyme in the phosphoinositide cell-signaling system. This study found that incubating the IMPP from a porcine brain with pyridoxal-5'-phosphate (PLP) resulted in a time-dependent enzymatic inactivation. Spectral evidence showed that the inactivation proceeds via the formation of a Schiff's base with the amino groups of the enzyme. After the sodium borohydride reduction of the inactivated enzyme, it was observed that 1.8 mol phosphopyridoxyl residues per mole of the enzyme dimer were incorporated. The substrate, myo-inositol-1-phosphate, protected the enzyme against inactivation by PLP. After tryptic digestion of the enzyme modified with PLP, a radioactive peptide absorbing at 210 nm was isolated by reverse-phase HPLC. Amino acid sequencing of the peptide identified a portion of the PLP-binding site as being the region containing the sequence L-Q-V-S-Q-Q-E-D-I-T-X, where X indicates that phenylthiohydantoin amino acid could not be assigned. However, the result of amino acid composition of the peptide indicated that the missing residue could be designated as a phosphopyridoxyl lysine. This suggests that the catalytic function of IMPP is modulated by the binding of PLP to a specific lysyl residue at or near its substrate-binding site of the protein.
본 논문은 학습으로 공감각 현상을 지각할 수 있는 의도적인 공감각을 기반으로 신체의 움직임에서 시각과 청각정보로의 변환 및 역변환 시스템을 구현하였다. 신체의 움직임은 웨어러블 암밴드인 Myo의 출력인 오일러 각을 사용하였고, 근감각 정보로서 롤(Roll), 피치(Pitch), 요(Yaw) 신호를 사용하였다. 또한, 시각과 청각 정보로서 미디(MIDI, Musical Instrument Digital Interface)신호와 HSI 컬러 모델을 사용하였다. 근감각 신호와 시 청각 신호 사이의 상호변환 방법은 일대일 대응 관계를 적용함으로써 직관적으로 쉽게 유추할 수 있도록 하였다. 시뮬레이션 결과에서 신체의 움직임 정보와 시 청각 정보의 상호변환이 가능함을 ROS(Root Operation System)와 3D 시뮬레이션 툴인 Gazebo를 사용하여 입력과 출력을 비교하였고 변환 오차가 작음을 확인하였다.
파리지옥풀 first trap leaf에만 발현하는 유전자군을 탐색하기 위하여 기내배양 식물체와 포충능력을 가진 3년생 실생주을 이용하여 각각의 포충잎 (leaf base), 꽃조직 (flower tissue) 및 포충잎트랩 (first trap leaf)으로부터 분리한 RNA로 Fluorescent differential display (FDD)를 실시하였다. First trap leaf특이발현 유전자 15개를 screening하여 염기서열을 분석하였다. 분리된 DNA들은 protease inhibitor (Pl), myo-inositol-1-phosphate synthase 및 lipocalin-type prostaglandin D syn-thase 유전자들과 매우 유사하였다. 또한 Northern blot분석 결과, 이들 유전자들이 first trap leaf에 특이적으로 발현하고 있는 것을 확인하였다 FDD방법은 세포, 조직 및 기관에 특이적으로 발현하고 있는 유전자들을 선발하는데 매우 유용한 수단으로 사용될 수 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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