Rapid and quantitative analysis of physiological change and clavulanic acid production was studied by the combination of pyrolysis mass spectrometry (PyMS) and artificial neural network (ANN) in Streptomyces clavuligerus. Firstly, the continuous culture studies were carried out to get the physiological background and PyMS samples. Clavulanic acid production was inversely related to growth rate: Mycelium growth and $q_{cal}$ were optimum at 0.1 $h^{-1}\; and \;0.025 h^{-1}$ respectively. Changes in specific nutrient uptake rates ($q_{gly}$ and $q_{amn}$) also affected clavulanic acid production since clavulanic acid production appeared to be stimulated by the limitation of carbon and nitrogen. Fermentation broth containing mycelium taken from continuous cultures was analyzed by PyMS, and the PyMS spectra were analyzed with multivariate statistics. PCCV plots revealed that samples harvested under the same culture condition were clustered together but samples from different culture conditions formed separate clusters. To deconvolute the pyrolysis mass spectra so as to obtain quantitative information on the concentration of clavulanic acid, ANN was trained on Py MS data using a radial basis function classifier. The results showed that the physiological stages with different growth rate were successfully differentiated and it was possible to monitor the clavulanic acid production precisely and rapidly.
생육온도가 느타리버섯 자실체의 생육 및 조직에 미치는 영향을 검토하기 위하여 온도를 $7^{\circ}C,\;15^{\circ}C,\;23^{\circ}C$로 달리하여 생육시키고, 자실체의 특성 및 조직의 미세구조 변화를 관찰 한 결과, 생육온도가 높을수록 갓의 두께는 얇아지고, 대의 두께 및 대의 길이는 길어졌으며, 버섯의 갓 색깔이 백색에 가깝게 변화하였다. 생육온도에 따른 자실체의 미세구조변화는 생육온도가 높아질수록 주름에 있어서 담자포자의 비산이 빠르고, 노화현상이 두드러졌다. 생육온도별로 느타리버섯 대부위의 물리적 특성을 조사한 결과 생육온도가 높을수록 경도는 낮아졌는데 이는 세포의 노화 및 균사의 밀도가 낮았기 때문으로 생각된다. 또한 대의 세포학적인 특정으로 액포화가 두드러져 생육온도가 높을수록 생육일수는 빨라지나 그만큼 노화가 쉽게 일어남을 확인하였다.
Production of extracellular polysaccharide by Monilinia fructigena in B-I medium containing cereals was higher than that in glucose medium. Productivities in B-I medium and glucose medium were 0.7g/l nd 0.2-03g/l respectively. The maximum content of polysaccharide occurred at the rising point from the lowest pH of culture. As the apparent viscosity of the polysaccharide solution increased, the flow Index (m) decreased, and the consistency Index (Kc) also increased. The polysaccharide solution was a typical pseudoplastic fluid. The mycelium was separated from the culture solution by $300\mu m$ mesh-filter and the polysaccharide was precipitated by adding 50% of ethanol (v/v). The amount of the polysaccharide removed from the filtrated solution was 0.45 g/l and the amount adhered to the mycelium was 0.25g/l. In experiments for investigating growth enhancement of rotifer (Brachionus plicatilis) by the polysaccharide, the dose of the polysaccharide was 1mg per 10,000 organisms of rotifer. Maximum specific growth rate of rotifer with feed consisting of sea Chlorella sp. and the polysaccharide was 1.095/day in the batch culture for 10 days. A semi-continuous culture was done for 30 days, the biomass of rotifer could be harvested twice. Maximum specific growth rate with sea Chlorella sp. and the polysaccharide was 0.734/day before the first harvest, and 1.685/day before the second harvest. Productivity was 38 $cells/ml\; \cdot\; day$ with sea Chlorella sp. and the polysaccharide.
약용버섯의 균사체(Ganoderma lucidum 7094, Fomitella fraxinea 81003, Phellinus igniarius 26005)를 곡류와 같은 고체재료에 배양하고 발효된 곡류의 유리당 조성 변화를 관찰함으로써 기능성식품 개발의 가능성을 검토하였다. 담자균사체의 대량배양 조건 실험을 실시한 결과, 냉침에 의해 최대수화에 도달한 곡물을 배양용기에 담고, 액체배양 후 균질화한 담자균사체를 곡물에 접종함으로써 접종초기 짧은 시간에 균사가 완전히 활착되도록 할 수 있었다. 또한 균사 배양중기에 멸균 증류수를 첨가함으로써 균사의 활력을 유지시킬수 있었다. 담자균사체는 종류에 따라 유리당 총량 및 구성비에 있어서 큰 차이를 나타내었다. 또한 담자균사체가 배양된 곡물의 유리당 함량을 측정한 결과, 유리당 총량 및 대부분의 유리당 함량이 곡물 자체에서 보다 증가하였으며, 담자균과 곡물배지의 종류에 따라 당의 이용성에 큰 차이를 나타내었다.
Tricholoma matsutake has been the most valuable ectomycorrhizal fungi in Asia because of its unique flavor and taste. However, due to the difficulty of artificial cultivation, the cultivation of T. matsutake has relied on natural growth in forests. To cultivate the T. matsutake artificially, microorganisms in fairy rings were introduced. In this study, we isolated 30 fungal species of microfungi from the soil of fairy rings. Among them, one single fungal strain showed a promoting effect on the growth of T. matsutake. The growth effect was confirmed by measuring the growth area of T. matsutake and enzyme activities including a-amylase, cellulase, and b-glucosidase. In comparison with control, microfungal metabolite increased the growth area of T. matsutake by 213% and the enzyme activity of T. matsutake by 110-200%. The isolated fungal strain was identified as Penicillium citreonigrum by BLAST on the NCBI database. The Discovery of this microfungal strain is expected to contribute to artificial cultivation of T. matsutake.
The effects of media composition on citric acid fermentation using surface immobilized Saccharomycopsis lipolytica were studied. The use of the standard medium for these organisms resulted in rapid decrease of citric acid production and a transformation of immobilized cell morphologies from a yeast-type to a mycelium-type. When the standard medium was enriched with vitamins, trace minerals, a growth factor and ammonium to form a Vigorous Stationary Phase (VSP) fermentation type medium, relatively stable citric acid production (10 mg/lㆍh) was obtained. Using the VSP type medium, the surface immobilized cells also retained their yeast-type form.
Effects of gibberellin on alpha and beta-amylase activities of Aspergillus orygae var. microsporus have been studied. Results obtained are as follows: 1. The growth of mycelium and dry weight of surface ped was accelerated by 0, 0001% gibberellin solution, spores of Aspergillus oryzae var. microsporus. were preveously soaked for three days. 2. Adding to culture media with 0, 0015% gibberellin, alpha-amylase was increased 50% much as beta-Amylase was as much as 50%.
생물반응기를 이용한 회분배양에서 균체량 생산에 있어서 조건은 200 rpm, 1 vvm 으로 선정하였으며, 이때 균체량은 11 g/L이었고, polysaccharide는 0.6 g/L이었다. 또한 pH를 초기 pH인 5.5로 고정하여 배양한 결과 pigment들로 인한 균사체의 활성이 떨어지는 것으로 나타났다 균체량을 증가시키기 위한 최적의 회분배양 조건에서는 초기 200 rpm으로 배양을 시작하여 300 rpm으로 증가시키고 glucose 5 g/L를 간헐적으로 첨가함으로써 균체량은 24.2 g/L, polysaccharide는 2.2 g/L로 나타났다. 또한 erinacine A의 분석은 HPLC를 사용하였으며 배양 4.5일째 균사체로부터 추출하여 mobile phase를 Methanol/water (9:1)로 flow rate은 0.7 ml/min으로 실험한 결과 erinacine A는 0.4 mg/g cell 로 측정되었다.
Twenty plant extracts were tested against mycelial growth, sclerotium formatiom and dry weight of mycelium with sclerotia of Sclerotium rolfsii Sacc. The highest(90 mm) mycelial growth was measured in Adhatoda vasica, Tegetes erecta, Allium cepa, and Curcuma longa. The lowest(25 mm) was in Azadirachta indica. No mycelial growth was found in any concentration of cow, buffalo, and goat urine. The highest(90 mm) and the lowest(15 mm) mycelial growth were measured in Biomil and Urea, respectively. No mycelial growth was observed in Zinc. The highest(60 mm) and the lowest(2 mm) mycelial growth were recorded in Macuprex(Dodine; 65% WP) and Boron(100% Boric acid and 17% Boron) respectively. Mycelial growth was totally inhibited in Rovral(Iprodione; 50% WP).
A destructive stem rot of strawberry (cv. Akihime) occurred sporadically in farmers' fields around Daegok-Myeon, Jinju City, Gyeongnam province in Korea. The infected plants showed stem and crown rot, sometimes whole plant blighted. White mycelia spread over stems of infected clones and sclerotia formed on the old lesions near to soil surface. The fungus formed white colony on PDA and showed maximum mycelial growth and scleotial formation around 30$^{\circ}C$. The fungus usually have many narrow mycelial strands in the aerial mycelium and the width were 4.0∼10.0$\mu\textrm{m}$. The typical clamp connections were formed on the mycelium. The shape of sclerotia was globoid and 1.0∼2.8 mm in size. The fungus was isolated repeatedly from the infected tissues and identified as Sclerotium rolfsii. The fungus was inoculated to strawberry and confirmed its pathogenecity This is the first report on the stem rot of strawberry caused by Scierotium rolfsii in Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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