Fruit bodies similar to the Phellinus sp. residing on the mulberry were collected at Yang-yang in Kang-won-do province and one strain of Phellinus sp. was isolated from the fruit bodies. For mass production of the isolated mycelia in a submerged culture, the culture conditions, medium composition, and the effect of various culture systems on the mycelial growth, were investigated. The morphological characteristics of the fruit body were as follows: covered with blackish to black and rough, lower surface with yellowish-brown to dull-brown and smooth, 5-7 cm thick and hard woody. Also, the pure cultured mycelia showed yellowish-brown color, capability of purplish-brown pigment production on the PDA plate media, no-formation of clamp-connection, much binding branch, and enzyme activities such as laccase, tyrosinase and peroxidase. Therefore, pure cultured strain was identified to be Phellinus sp. In the flask culture, the optimum culture conditions for the mycelial production were obtained after cultivation of 8 days at inoculum level of 5%(v/v), media volume of 70 mL, 150 rpm, initial pH 6, and temperature of $30^{\circ}C$. Optimum medium composition from the response surface analysis were determined to be glucose 12.12 g/L, sucrose 12.12 g/L, yeast extract 11.15 g/L, malt extract 11.15 g/L, $KH_2PO_4$ 0.855 g/L and $CaCl_2$ 0.855 g/L. The production of the mycelia after 4 and 8 days of cultivation was 1.95 and 9.89 g/L, respectively. The maximum specific growth rate and productivity were $0.020\;hr^{-1}$ and 1.25 g/L/day, respectively. Among the three different culture systems for the growth of mycelia, the maximum mycelial dry weight of 7.5 g/L was obtained after cultivation of 4 days in the air-lift fermentor under aeration rate of 2.5 vvm. The maximum specific growth rate and productivity were $0.033\;hr^{-1}$ and 1.9 g/L/day, respectively, which were about 1.7 and 4.2 times higher than those of flask culture.
LEE, JI-HYUN;JEONG-HWA KIM;MI-RYUNG KIM;SUNG-MI LIM;SOO-WAN NAM;JIN-WOO LEE;SUNG-KOO KIM
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.12
no.1
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pp.1-7
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2002
The effects of DO and pH on the mass production of pullulan with high molecular weight and the morphology of A. pullulans ATCC 42023 were evaluated. A. pullulans showed a maximum production of pullulan (11.98 g/l) when the initial pH of the culture broth was 6.5 in a shake-flask culture. In a batch culture, the mixture of a yeast-like and mycelial cell forms was found at a pH of 4.5, and the maximum production of pullulan (13.31 g/l) was obtained. However, a high proportion of high molecular weight pullulan (M.W.>2,000,000) was produced at a pH of 6.5, with a yeast-like morphology. The maximum pullulan production yield ($51\%$) was obtained at a pH noncontrol (initial pH 6.5) and DO control (above $50\%$) condition. Pullulan degrading enzyme was activated when the pH of the broth was lower than 5.0 and the portion of low molecular weight pullulan was increased. The formation of a black pigment was observed at an initial stationary phase, at 40 h of fermentation. Therefore, the fermentation should be carried out in a pH noncontrol (initial pH of 6.5) and DO control (above $50\%$) condition, and should be harvested before reaching the stationary phase (around 40 h) for the production of high molecular weight pullulan.
An extracellular PHB depolymerase was purified from P. simplicissimum LAR13 cultural medium by Sepharose CL-6B chromatography. When the fungus was grown in a basal salt medium with poly(3-hydroxybutyrate) (PHB) as the sole carbon source, PHB depolymerase production reached maximum at its stationary phase. The mycelial growth rate was higher at 37$^{\circ}C$ than at 30$^{\circ}C$ and even higher than at 25$^{\circ}C$, However, the enzyme production was lower at 37$^{\circ}C$ than 30$^{\circ}C$ or 25$^{\circ}C$. The isolated enzyme is composed of a single polypeptide chain with a molecular mass of about 36 kDa as determined by SDS-PAGE. The optimum conditions for the enzyme activity are pH 5.0 and 45$^{\circ}C$. The enzyme was stable for 30 min at a temperature lower than 50$^{\circ}C$, and stable at pH higher than 2.0 but it was unstable at pH 1.0.1 mM Fe$\^$2+/ reduced the enzyme activity by 56% and the enzyme was inhibited almost completely by 4 mM Fe$\^$2+/ . The enzyme was partially inhibited by phenylmethylsulfonyl fluoride and was very sensitive to diazo-DL-norleucine methyl esters dithiothreitol and mercuric ion. However, N-p - tosyl - L - Iysinechloromethyl ketone, p -hydroxymercuricbenzoate and N- acetylimidazole had no influence upon its activity.
We aim at providing consumers and farmers with various parts of mushrooms through development of new mushroom cultivation. For the mass artificial cultivation, we elucidated suitable environment conditions of Neolentinus lepideus. The results were summarized as follows. For the efficient cultivation of N. lepideus, temperature of mycelial growth and development of the fruit body were suitable $20{\sim}23^{\circ}C$ and $20^{\circ}C$, respectively.
The glyoxylate cycle can conserve carbons and adequately supply tricarboxylic acid (TCA) cycle intermediates for biosynthesis when microorganisms grow on $C_{2}$ carbon sources. It has been reported that isocitrate lyase (ICL1), a key enzyme of the glyoxylate cycle, is highly induced when Magnaporthe grisea, the causal agent of rice blast, infects its host. Therefore, the glyoxylate cycle is considered as a new target for antifungal agents. A 1.6-kb DNA fragment encoding the ICL1 from M. grisea KJ201 was amplified by PCR, cloned into a vector providing His-tag at the N-terminus, expressed in Escherichia coli, and purified using Ni-NTA affinity chromatography. The molecular mass of the purified ICL1 was approximately 60 kDa, as determined by SDS-PAGE. The ICL1 inhibitory effects of TCA cycle intermediates and their analogs were investigated. Among them, 3-nitropropionate was found to be the strongest inhibitor with an $IC_{50}$ value of $11.0{\mu}g/ml$. 3-Nitropropionate inhibited the appressorium development in M. grisea at the ${\mu}M$ level, whereas conidia germination remained unaffected. This compound also inhibited the mycelial growth of the fungus on minimal medium containing acetate as a $C_{2}$ carbon source. These results suggest that ICL1 plays a crucial role in appressorium formation of M. grisea and is a new target for the control of phytopathogenic fungal infection.
During winter season of 2004 to 2006, a scab disease on balsam pear (Momordica charantia) caused by Cladosporium cucumerinum was observed in Daesan-myon, Changwon-city, Gyeongnam province, Koyea. The disease symptom started with small dark brown speck on the fruits and leaves then the lesions expanded and spreaded irregularly. The aggregated mycelial mass and conidia of the fungus formed sooty scab. The colony of purely isolated fungus grew in greenish black to velvety on potato dextrose agar (PDA). Conidia were ellipsoidal, fusiform or subspherical, mostly one-celled but occasionally septated and $3{\sim}32{\times}2{\sim}6{\mu}m$ in size. The conidiophores were erected and had long branch, chains pale olivaceous brown in color and $6{\times}280{\mu}m$ in size. Ramoconidia were $10{\sim}34{\times}3{\sim}8{\mu}m$ in size. The fungus was identified as Cladosporium cucumerinum based on the morphological characteristics. The pathogenicity of the fungus was confirmed according to Koch's postulate. The optimum temperature of the isolate was about $20^{\circ}C$. This is the first report on scab of balsam pear caused by C. cucumerinum in Korea.
Lee, Min-Woong;Hur, Hyeon;Chang, Kwang-Choon;Lee, Tae-Soo;Ka, Kang-Hyeon;Jankovsky, L.
Mycobiology
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v.36
no.4
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pp.199-202
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2008
Inonotus obliquus is a fungus that causes white heart rot on several broad-leaved species. This fungus forms typical charcoal-black, sterile conks (chaga) or cinder conks on infected stems of the birche (Betula spp). The dark brown pulp of the sterile conk is formed by a pure mycelial mass of fungus. Chaga are a folk remedy in Russia, reflecting the circumboreal distribution of I. obliquus in boreal forest ecosystems on Betula spp. and in meridional mountain forests on beech (Fagus spp.) in Russia, Scandinavia, Central Europe, and Eastern Europe. Distribution at lower latitudes in Western and Southern Europe, Northern America, Asia, Japan, and Korea is rare. Infected trees grow for many years without several symptoms of decline. The infection can penetrate through stem injuries with exterior sterile conks developing later. In the Czech Republic, cinder conk is found on birches inhabiting peat bogs and in mountain areas with a colder and more humid climate, although it is widespread in other broad leaved species over the Czech Republic. The most common hosts are B. pendula, B. pubescens, B. carpatica, and F. sylvatica. Less frequent hosts include Acer campestre, Acer pseudoplatanus, Alnus glutinosa, Alnus incana, Fraxinus excelsior, Quercus cerris, Q. petraea, Q. robur, Q. delachampii, and Ulmus sp.
Ivanova, Tetiana S.;Bisko, Nina A.;Krupodorova, Tetiana A.;Barshteyn, Victor Yu.
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.42
no.1
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pp.67-72
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2014
A new substrate, breadcrumbs, was investigated for biomass accumulation, the pH of the cultural broth, the formation of primary metabolites such as the proteins and endopolysaccharides of Schizophyllum commune 1768 and Trametes versicolor 353, as well as its bioconversion efficiency. The results showed that S. commune gives more mycelial mass ($23.96{\pm}0.8g/l$) and in a shorter period (4 days) than T. versicolor ($15.76{\pm}0.5g/l$ in 5 days). The pH values changed from the initial 6.1 to 3.6 in S. commune cultural broth and to 4.4 in T. versicolor cultural broth. Maximal endopolysaccharide content in the mycelia of S. commune and T. versicolor were 7.13% and 6.42%, correspondingly. Crude protein content in S. commune mycelium was 18.83 % on the 4th day of cultivation, and 20.03%, in the mycelium of T. versicolor, on the 6th day of cultivation. Kinetic parameters for the quantitative estimation of cultivation efficiency were calculated for biomass, endopolysaccharide, and crude protein concentrations.
Suphachai Tharavecharak;Corina N. D'Alessandro-Gabazza;Masaaki Toda;Taro Yasuma;Taku Tsuyama;Ichiro Kamei;Esteban C. Gabazza
Mycobiology
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v.51
no.2
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pp.94-108
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2023
Termitomyces sp. that grow in symbiosis with fungus-farming Termites have medicinal properties. However, they are rare in nature, and their artificial culture is challenging. The expression of AXL receptor tyrosine kinase and immune checkpoint molecules favor the growth of cancer cells. The study evaluated the optimal conditions for the artificial culture of Termitomyces and their inhibitory activity on AXL and immune checkpoint molecules in lung adenocarcinoma and melanoma cell lines. The culture of 45 strains of Termitomyces was compared. Five strains with marked growth rates were selected. Four of the selected strains form a single cluster by sequence analysis. The mycelium of 4 selected strains produces more fungal mass in potato dextrose broth than in a mixed media. The bark was the most appropriate solid substrate for Termitomyces mycelia culture. The mycelium of all five selected strains showed a higher growth rate under normal CO2 conditions. The culture broth, methanol, and ethyl acetate of one selected strain (T-120) inhibited the mRNA relative expression of AXL receptor tyrosine kinase and immune checkpoint molecules in cancer cell lines. Overall, these results suggest the potential usefulness of Termitomyces extracts as a coadjuvant therapy in malignant diseases.
In this study, the efficacy of the essential oil of Mentha longifolia, Achillea arabica and Artemisia absinthium plants were evaluated against important soil-borne fungal pathogens as Verticillium dahliae, Rhizoctonia solani, and Fusarium oxysporum. Essential oils were obtained from plants by hydrodistillation method and the chemical components of essential oils were determined by analyzing by gas chromatography-mass spectrometry. The main components found as piperitone oxide (13.61%), piperitenone oxide (15.55%), pulegone (12.47%), 1-menthone (5.75%), and camphor (5.75%) in M. longifolia, á-selinene 13.38%, camphor 13.34%, L-4-terpineneol 8.40%, (-)-á-Elemene 7.01%, 1,8-cineole 4.71%, and (-)-spathulenol 3.84% in A. arabica, and á-thujone (34.64%), 1,8-cineole (19.54%), pulegone (7.86%), camphene (5.31%), sabinene (4.86%), and germacrene-d (3.67%) in A. absinthium. The antifungal activities of the oils were investigated 0.05, 0.1, 0.25, 0.5, 1.00, and 2.00 μl/ml concentrations with the contact effect method. M. longifolia oil (1.00 and 2.00 μl/ml) has displayed remarkable antifungal effect and provided 100% inhibition on mycelial growth of V. dahliae, R. solani and F. oxysporum. The results obtained from this study may contribute to the development of new alternative and safe methods against soil-borne fungal pathogens.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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