This study was to evaluate the biological activity of flavor components extracted from E. ciliata and E. splendens in order to survey the possibility applicable to tobacco and food industry. Flavor components were extracted with dividing into three parts; essential oil, absolute, oleoresin. In the nonenzymatic lipid peroxidation system, the inhibition rate($\%$) of essential oil were $67.3\;\pm\;20.7\%,\;58.1\;\pm\;19.3\%$ at the concentration of 50 ${\mu}g/mL$ of E. ciliata and E. splendens, respectively. The inhibition rate($\%$) of the oleoresin in E. ciliata was higher than one in E. splendens. In the enzymatic lipid peroxidation system, the inhibition rate($\%$) of essential oil and oleoresin was$14.28\;\pm\;2.38\%,\;and\;65.93\;\pm\;0.01\%,\;and\;was\;22.58\;\pm\;2.84\%\;and\;40.73\;pm\;6.04\%$. The oleoresin of two species were showed above $90\%$ of the inhibition rate($90\%$) against autooxidative lipid peroxidation system. $EC_{50}$ values in neutral red uptake assays 24 h of exposure times were $23.3\;{\mu}g/mL,\;341.0\;{\mu}g/mL\;and\;17.2\;{\mu}g/mL$ in essential oil, absolute and oleoresin from E. ciliata respectively, and were $46.4\;{\mu}g/mL,\;681.7\;{\mu}g/mL\;17.6\;{\mu}g/mL$ in three extractions of E. splendens. Oleoresin of two species showed high rate in the cytotoxic effect by neutral red uptake assay. Absolute and oleoresin did not show antibiotic and mutagenic activity. On the contrary, essential oil with over 500 ug/plate showed antibiotic and mutagenic activity in Ames test. Essential oil and oleoresin have a prolongating effect the ciliostasis of rat trachea. This results indicate that flavor components extracted from E. ciliata and E. splendens can be considered to be toxicological safe and to be the possibility applicable the cigarette, food and drug industry as a flavor for expectoration.
재래종 적색 자두 (Prunus salicina)에서 효소를 추출하여 4종류의 polyphenol화합물과 반응시켜 얻어진 갈변반응 생성물에 대하여 Bacillus subtilis H17과 M45를 이용한 rec-assay와 Salmonella typhimurium TA98과 TA100 두 균주를 이용한 Ames test, 그리고 calfcthymus DNA를 이용하는 DNA절단시험을 이용하여 돌연변이원성과 돌연변이 억제작용을 조사하였다. 포자 rec-assay 에서는 pyrogallol, hydroxyhydroquinone, 3,4-dihydroxytoluene, chlorogenic acid 의 갈변반응 생성물은 모두 DNA손상능력이 없었으며 8가지 금속이온 중 ${Zn}^{2+}$과 ${Ni}^{2+}$의 첨가로 고초균 DNA손상에 약한 영향을 나타내었다. DNA절단시험 결과 4종류 갈변반응 생성물 모두 DNA절단작용이 없었으며 금속이온의 영향에 있어서는 pyrogallol 갈변반응 생성물이 ${Cu}^{2+}$의 영향을 받아 ${Cu}^{2+}$의 농도가 증가함에 따라 강한 절단작용을 나타내었으며 3,4-dihydroxytoluene 과 hydroxyhydroquinone갈변반응 생성물은 금속이온의 영향을 전혀 받지 않았다. 또한 chlorogenic acid갈변반응 생성물은 DNA 절단을 억제하는 효과를 나타내었다. Ames test에서는 4가지 갈변반응 생성물 모두 변이원성은 없었으며 benzo$[{\alpha}]$pyrene을 사용한 변이원성 억제작용 실험결과 benzo$[{\alpha}]$pyrene의 활성을 강하게 억제하는 것으로 나타났다.
Ganoderma lucidum is commonly known as medically potent mushroom, which has been widely used in China and other oriental countries for the treatment of various diseases, including cancer. In this report, we investigated the anti-oxidant and protective effect of Ganodema lucidum extract (GLE) against the DNA damage induced by free radical and U.V. In the assay of cell growth inhibition, the inhibitory cell growth rate induced by hydroxyl radical was dose-dependently decreased by GLE. This results support that GLE has a detoxifying activity against cytotoxicity of hydroxyl radical in E. coli cell. GLE also protected ColE1 plasmid DNA damage in the concentration of 200$\mu\textrm{g}$ per reaction on the DNA fragmentation assay. The nuclear tailing by hydrogen peroxide in single cell gel electrophoresis(SCGE) was decreased by GLE in the concentration of 50$\mu\textrm{g}$/ml. These data indicate that Ganoderma lucidum has an anti-oxidative activity to hydrogen peroxide. The mutation rate after irradiation of U.V. was reduced by 50$\mu\textrm{g}$/ml GLE and total number of Rif (Rifampicin) resistant mutants was decreased in a concentration dependent manner when added the GLE exogenously in a culture media. According to the results, it is likely that GLE has not only an anti-oxidative activity to hydroxyl radical but also an anti-mutagenic activity to U.V. mutagenesis.
Antimutagenic activity of crushed kimchi fermented with starter under various conditions such as temperature(5-20$^{\circ}C$), salt concentration(2-10%), addition rate of starter (0-20%) was investigated. The kimchi was fermented with crushed Chinese cabbage without salting, red pepper powder, crushed garlic, crushed ginger, anchovy juice and starter. Well fermented kimchi juice(fermented at 10$^{\circ}C$ for 15 days) and sterilized radish juice was used as a source of lactic acid bacteria and starter medium, respectively. Antimutagenic activity showed the highest in the crushed kimchi fermented at 15$^{\circ}C$ for 15 days, 4% salt concentration, 5% starter added, respectively. The inhibition rate of mutagenic activity of the kimchi against S. typhimurium TA98 induced by NQO and S. typhimurium TA100 induced by MNNG was 56.41% and 60.11%, respectively. And the inhibition rate of the kimchi juice showed 56-60% per 100ul.
본 연구는 삼지구엽초의 기능성식품 이용성 증진을 위한 기초적인 연구로써 우리나라 산야에서 존재하며 예로부터 약용으로 이용되고 있는 삼지구엽초를 극성에 따라 용매별 분획 추출물들의 면역관련 활성을 검토하였다. 삼지구엽초 분획물별 생육촉진 활성은 B와 T cell 모두에서 에틸아세테이트와 물 분획 추출물이 대조구에 비해 활성이 높게 나타났으며, 시료의 농도가 증가할수록 생육도 증가하였다. 삼지구엽초 추출물의 돌연변이 및 항돌연변이성에 미치는 영향을 조사한 결과, 삼지구엽초 추출물뿐만 아니라 각 용매별 분획물들도 돌연변이성을 나타내지 않았다. 간접변이원 B(${\alpha}$)P에서는 TA98 균주에서 에틸아세테이트 분획 추출물이 98%, TA100 균주에서는 부탄올 분획 추출물이 84%로 가장 높은 억제효과를 보였다. 직접변이원 4NQO에서는 TA98 균주와 TA100 균주에서 클로로포름 분획 추출물을 제외한 모든 시료가 70% 이상의 높은 억제효과를 나타내었으며, 특히 TA98 균주에서는 에틸아세테이트 분획 추출물이 80%, TA100 균주에서는 부탄올 분획 추출물이 90%의 높은 억제효과를 나타내었다. 이러한 결과는 삼지구엽초를 이용한 기능성 식품 및 소재로서의 이용성 증진을 위한 기초자료로 제공될 수 있을 것으로 판단된다.
Park, Jae-Eun;Do, Su-Il;Lee, Ki-Sung;Lee, Sang-Soo
BMB Reports
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제37권5호
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pp.597-602
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2004
N-terminal His-tagged recombinant $\beta$-1,4-galactosyltransferase from Neisseria meningitidis was expressed and purified to homogeneity by column chromatography using Ni-NTA resin. Mutations were introduced to investigate the roles of, Ser68, His69, Glu88, Asp90, and Tyr156, which are components of a highly conserved region in recombinant $\beta$-1,4 galactosyltransferase. Also, the functions of three other cysteine residues, Cys65, Cys139, and Cys205, were investigated using site-directed mutagenesis to determine the location of the disulfide bond and the role of the sulfhydryl groups. Purified mutant galactosyltransferases, His69Phe, Glu88Gln and Asp90Asn completely shut down wild-type galactosyltransferase activity (1-3%). Also, Ser68Ala showed much lower activity than wild-type galactosyltransferase (19%). However, only the substitution of Tyr156Phe resulted in a slight reduction in galactosyltransferase activity (90%). The enzyme was found to remain active when the cysteine residues at positions 139 and 205 were replaced separately with serine. However, enzyme reactivity was found to be markedly reduced when Cys65 was replaced with serine (27%). These results indicate that conserved amino acids such as Cys65, Ser68, His69, Glu88, and Asp90 may be involved in the binding of substrates or in the catalysis of the galactosyltransferase reaction.
This study was carried out to investigate whether Chrysanthermum zawadskii var. latilobum Kitamura (C. zawadskii) extracts has an inhibitory effect against the mutagenicity by cigarette smoke condensates (CSC). C. zawadskii was extracted with 70% ethanol and the yield was 18.5%. We further fractioned 70% ethanol extract sequentially to diethylether, chloroform, dichloromethane, and aqueous water, and gained the yield of 17.5%, 5.6%, 5.8%, 32.8% and 35.5%, respectively. In the Ames test, there was no mutagenic effect of crude extract and its solvent fractions up to 2 mg/plate toward Salmonella typhimurium TA 98 with or without S-9 mix metabolic activations. On the contrary, the crude extract showed an inhibitory activity against the mutagenicity of CSC in the presence of S-9 mix metabolic activation. Diethyl ether layer among five solvent fractions showed the highest inhibitory activity. The inhibitory activity of diethyl ether fraction was also increased in a dose-dependent manner and the inhibitory rate was about 97.7% at the concentration of 1 mg/plate. In this study, we conclude that crude extract of C. zawadskii itself is potentially safe for mutagenicity, and the diethyl ether fraction has an inhibitory effect against the mutagenicity of CSC.
Stability of the $\beta$-sitosterol glycoside from Schima wallichii sp. at various physical conditions were investigated, mutagenecity of the steroid saponin was determined by Ames test. When exposed in pH 3 to pH 8, the $\beta$-sitosterol glycoside was stable on antimicrobial activity against yeasts. The antimicrobial activity of the $\beta$-sitosterol glycoside also stable in high temperature, $N_2$, $O_2$ gas and light exposure, and metal ion. Ames test result revealed that $\beta$-sitosterol glycoside did not have any mutagenic activity. These results suggest that the $\beta$-sitosterol glycoside might be a promising candidate as a natural antimicrobial compound.
Activated macrophages express inducible isoforms of nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase (COX-2), and produce excessive amounts of nitric oxide (NO) and prostaglandin E$_2$ (PGE$_2$), which play key roles in the processes of inflammation and carcinogenesis. The root of Paeonia lactiflora Pall., and the root cortex of Paeonia suffruticosa Andr., are important Chinese crude drugs used in many traditional prescriptions. 1,2,3,4,6-penta-O-galloyl-$\beta$-D-glucose (PGG) is a major bioactive constituent of both crude drugs. PGG has been shown to possess potent anti-oxidant, anti-mutagenic, anti-proliferative and anti-invasive effects. In this study, we examined the inhibitory effects of 1,2,3,4,6-penta-O-galloyl-$\beta$-D-glucose (PGG) isolated from the root of Paeonia lactiflora Pall. on the COX-2 and iNOS activity in LPS-activated Raw 264.7 cells, COX-1 in HEL cells. To investigate the structure-activity relationships of gallate and gallic acid for the inhibition of iNOS and COX-2 activity, we also examined (-)-epigallocatechin gallate (EGCG), gallic acid, and gallacetophenone. The results of the present study indicated that PGG, EGCG, and gallacetophenone treatment except gallic acid significantly inhibited LPS-induced NO production in LPS-activated macrophages. All of the four compounds significantly inhibited COX-2 activity in LPS-activated macrophages. Among the four compounds examined, PGG revealed the most potent in both iNOS ($IC_{50}$ = 18 $\mu\textrm{g}/mL$) and COX-2 inhibitory activity (PGE$_2$: $IC_{50}$ = 8 $\mu\textrm{g}/mL$ and PGD$_2$: $IC_{50}$ = 12 $\mu\textrm{g}/mL$), respectively. Although further studies are needed to elucidate the molecular mechanisms and structure-activity relationship by which PGG exerts its inhibitory actions, our results suggest that PGG might be a candidate for developing anti-inflammatory and cancer chemopreventive agents.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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